2. Materials and methods2.1. Pestic

2. Materials and methods
2.1. Pesticide and plant materials
Cyanophos (Cyanox 50% EC) 0, 0-dimethyl 0-(4-cyanophenyl) phosphorothioate was obtained from the Central Agriculture Pesticide Laboratory, Agriculture Research Center, Dokki, Gaiza, Egypt.
Seedlings of the common broadleaf plantain (Plantago major L.) were used in phytoremediation experimental from meadow-land in Zagazig University, Zagazig, Sharkia Governorate, Egypt.
2.2. Experimental design
To evaluate the removal of cyanophos from the soil, nine treatments—each consisting of five replicates—were performed, as follows: (1) Cyanophos-contaminated autoclaved soil without plants. (2) T1: Cyanophos-contaminated soil without plants. (3) T2: Cyanophos-contaminated soil with P. major only. (4) T3: Cyanophos-contaminated autoclaved soil with P. major only. (5)T4: Cyanophos-contaminated soil with P. major and amended with soluble silicon dioxide (SiO2), the so-called silica, at 750 mg/L for a total concentration of 187.5 mg kg. (6) T5: Cyanophos-contaminated soil with P. major and amended with 2-hydroxypropyl-beta-cyclodextrin (HPβCD) at 1.0% ( Chen et al., 2010). (7) T6: Cyanophos-contaminated soil with P. major and amended with humic acid solution (HA) at 10 mg/L (humus WSG 90, Organist, Hungary), reportedly the critical micelle concentration of HA ( Guetzloff and Rice, 1994). (8) T7: Cyanophos-contaminated soil with plantain and amended with polyoxyethylene sorbitan monooleate (Tween 80) at 9.2 mg L, corresponding to 0.5 critical micelle concentration (CMC), where the CMC of Tween 80 was determined as 13–45 mg/L ( Edwards et al., 1990 and Mitton et al., 2012). (9) T8: Cyanophos-contaminated soil with P. major and amended with rice bran at 1 g/ L.
In experiments (3)–(8), each pot contained one seedling of P. major. Each whole plant uptake experiment was performed in potted soil for 9 days. Air-dried sieved clay loam soil (organic matter, 1.79%, pH 7.8, electric conductivity 2.36 mS/m; Aboutwala, Minya al-Qamh, Sharqia, Egypt) was placed in plastic pots. The pots were filled with 500 g of air-dried soil. After planting, cyanophos dissolved in acetone was spiked into the 150 mL of distilled water used for irrigation to obtain original concentrations of 20 µg/g. Cyanophos concentration in irrigation water was added to the pots with caution from direct contact with the plant shoots. The treatment without cyanophos spiked into the soil acted as the control. After third and ninth day, exposed plants and the control were collected. Plant roots from the soil were rinsed in running tap water for two minutes and were blotted dry. The plants dissected into individual roots, shoots and then four grams of leaves and roots, in addition to twenty grams of soil were analyzed for the pesticide. All pots were watered with 50 ml tap water every four days with adding additional water when necessary.
2.3. Agents enhanced recovery of cyanophos
Laboratory studies were conducted to determine the adsorption equilibrium of cyanophos in soil in solutions of distilled water and the solubility enhancing agents, SiO2, HPβCD, HA, Tw 80 and rice bran using a batch equilibrium technique. Batch equilibrium adsorption isotherms of cyanophos in soil in distilled water and aqueous solutions of SiO2, HPβCD, HA, Tw 80, and rice bran at the same concentrations as above in Experimental design were evaluated with 40 µg/mL of cyanophos in 100 mL glass-stoppered conical flasks. The final volume in each flask was 20 mL by the addition of the requisite volumes of the cyanophos solution and distilled water or solutions of SiO2, HPβCD, HA, Tw 80, and and rice bran. To these solutions, one gram of each soil was added, and the resulting suspensions were maintained at 25 °C for 21 h in an incubator following a period of shaking of 3 h. All experiments were conducted in duplicate. Preliminary studies showed that there was no measurable increase in the adsorption of cyanophos in the soil after 24 h. Suspensions were centrifuged at 15,000 rpm for 10 min and the amount of cyanophos in supernatants was estimated by HPLC.
The amount of cyanophos adsorbed was calculated as the difference between the initial cyanophos concentration and the equilibrium concentration according to the following expression: x/m=(C0−Ce) V/W, where x/m is the concentration of cyanophos in the soil (µg/g), C0 is the initial cyanophos concentration (µg/mL), Ce is the equilibrium cyanophos concentration (µg/mL), V is the solution volume, and W is the weight of soil sample employed.
2.4. Residue analysis
2.4.1. Cyanophos extraction and analysis
Soil samples were extracted and cleaned up following the method of Krause et al. (1986). Soil samples (20 g) were shaken mechanically with 50 ml of acetone–water (3:1) for one hour in a 500 ml glass stopper bottle. The extract was filtered through a clean pad of cotton, and then 50 ml of filtrate was concentrated by using a rotary evaporator in a water bath at 40 °C to remove acetone and then extracted twice with 50 ml of chloroform. The combined chloroform extract was dried using anhydrous sodium sulfate and then evaporated to dryness at 40 °C using a rotary evaporator for high-performance liquid chromatography (HPLC) determination. Cyanophos was extracted from the root and leaf samples with acetone or water–acetone and then extracted with petroleum ether and dichloromethane. The organic phase was separated, dried, and concentrated just to dryness (Luke et al., 1981). The organic phase was dissolved in 5 ml of hexane then cleaned up by passing it through a column prewashed with 50 ml of hexane+acetone (9:1 v/v). The column was filled with acidic alumina (5 g)+sodium sulfate (2 mg) and was eluted with 100 ml of a mixture of hexane+acetone (9:1 v/v) (Zaalok and Sherif, 2011). The eluted solution was evaporated to dryness and the residue was dissolved in 1 ml methanol and then analyzed by HPLC with a UV-detector at 236 nm. A 5U C18 column (250 mm×4.6 mm) was used, and the mobile phase was a mixture of methanol and water (70:30, v/v). The flow rate was 1 ml/min. The retention time of cyanophos was 3.38 min. The metabolite 4-cyanophenol was synthesized in our laboratory by hydrolyzing cyanophos with methanolic sodium hydroxide (Chiba et al., 1976) and identified by HPLC with the same conditions as cyanophos. Under these conditions, the retention time of 4-cyanophenol was 1.33 min.
The performance of the HPLC method was assessed by evaluating quality parameters, such as recovery values and limits of detection. The limits of detection (LOD) and quantification (LOQ) were evaluated using the following equations (Thomsen et al., 2003): LOD=3.3S0/b and LOQ=10S0/b (3). Where S0 is the standard deviation of the calibration line and b is the slope. The linearity was significant with an excellent correlation coefficient of R2=0.994. The LOD and LOQ of cyanophos were 0.08 μg/g and 0.26 μg/g, respectively. The extraction efficiency of the analytical procedure was evaluated via recovery experiments conducted in triplicate using the fortified blank P. major and soil samples at two different concentrations, 0.2 and 0.5 μg/g. The average percentage of obtained recoveries ranged between 85.1± 5.3%, 90.9± 4.5% and 88.3± 3.6% in soil, leaves, and roots, respectively.
2.4.2. Data analysis
The rate of degradation (K) and half-life (t 1/2) was obtained from the following Equation: The rate of degradation (K)=2.303×slope. Half-life (t 1/2)=0.693/K ( Gomaa and Belal, 1975).
The removal percentage of cyanophos at the day 3 and 9 was calculated as: Removal percentage=(C0–C1)/C0×100% C0: initial concentration of cyanophos in soil and C1: concentration of cyanophos in soil. In this study, all statistical analyses (one-way ANOVA test) were performed by CoStat 6.311 CoHort Software. Significance of differences between the treatments was statistically evaluated by standard deviation and Duncan's test (p

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. แมลงและพืชCyanophos (Cyanox 50% EC) 0, 0-dimethyl 0-(4-cyanophenyl) phosphorothioate ได้รับจากห้อง ปฏิบัติการสารพิษเกษตรกลาง ศูนย์วิจัยเกษตร Dokki, Gaiza อียิปต์กล้าไม้ของกล้าย broadleaf ทั่วไป (Plantago สำคัญ L.) ถูกใช้ใน phytoremediation ทดลองจากโดว์ที่ดินใน มหาวิทยาลัย Zagazig, Zagazig, Sharkia รัฐ อียิปต์2.2. ทดลองออกแบบประเมินเอา cyanophos จากดิน การรักษาเก้า — ซึ่งเหมือนกับห้า — ดำเนิน เป็นดังนี้: (1) ปนเปื้อน Cyanophos autoclaved ดิน โดยพืช (2) T1: Cyanophos ปนเปื้อนดิน โดยพืช (3) T2: Cyanophos ปนเปื้อนดิน P. หลักเท่านั้น (4) T3: Cyanophos ปนเปื้อน autoclaved ดิน P. หลักเท่านั้น (5) T4: Cyanophos ปนเปื้อนดินพีสำคัญ และแก้ไขกับละลายซิลิกอนไดออกไซด์ (SiO2), เรียกว่าซิลิก้า ที่ 750 mg/L ในความเข้มข้นรวมของ 187.5 มก.กก. (6) T5: Cyanophos ปนเปื้อนดินพีสำคัญ และแก้ไขกับ 2-hydroxypropyl-เบต้า-cyclodextrin (HPβCD) 1.0% (Chen et al., 2010) (7) T6: Cyanophos ปนเปื้อนดินพีสำคัญ และแก้ไข ด้วยฮิวมิคกรดโซลูชั่น (HA) ที่ 10 mg/L (เกิดการเปลี่ยนแปลงกลาย WSG 90 นัก ฮังการี), รายงานสำคัญ micelle ความเข้มข้นของฮา (Guetzloff และข้าว 1994) (8) T7: Cyanophos ปนเปื้อนดินกล้าย และแก้ไขกับ polyoxyethylene sorbitan monooleate (Tween 80) ที่ 9.2 มิลลิกรัม L ที่ตรงกับความเข้มข้นวิกฤต micelle 0.5 (CMC), CMC Tween 80 ที่ได้กำหนดเป็น 13-45 mg/L (เอ็ดเวิร์ดและ al., 1990 และ Mitton et al., 2012) (9) T8: Cyanophos ปนเปื้อนดินพีสำคัญ และแก้ไข ด้วยรำข้าวที่ 1 g/lในการทดลอง (3)–(8) แต่ละหม้อประกอบด้วยแหล่งหนึ่งของ P. หลัก ทดลองดูดซับแต่ละโรงงานทั้งหมดถูกทำในกระถางดิน 9 วัน Air-dried ดิน sieved loam ดิน (อินทรีย์ 1.79%, pH 7.8 นำไฟฟ้า 2.36 mS/m Aboutwala อียิปต์ al-Qamh, Sharqia มินยา) ถูกวางลงในกระถางพลาสติก หม้อเต็มไป ด้วย 500 กรัมของดิน air-dried หลังจากปลูก cyanophos ละลายในอะซิโตนมี spiked เป็น 150 mL ของน้ำกลั่นที่ใช้สำหรับการชลประทานเพื่อให้ได้ความเข้มข้นเดิมของไมโครกรัมเป็นเครื่อง 20 กรัมความเข้มข้นในน้ำชลประทานได้เพิ่มหม้อด้วยความระมัดระวังจากการติดต่อโดยตรงกับการถ่ายภาพโรงงาน Cyanophos ดำเนินการรักษาโดยไม่ cyanophos spiked ลงในดินเป็นตัวควบคุม หลังจากวันที่ 3 และ 9 พืชสัมผัสและตัวควบคุมถูกเก็บรวบรวม รากพืชจากดินได้ rinsed ทำประปาสองนาที และถูก blotted แห้ง พืช dissected เป็นรากละ ถ่ายภาพ และ 4 กรัมของใบ และราก นอกจาก 20 กรัมของดินที่วิเคราะห์สำหรับแมลง หม้อทั้งหมดมีผู้น้ำประปา 50 ml ทุกสี่วันกับเพิ่มน้ำเพิ่มเติมเมื่อจำเป็น2.3. ตัวแทนสนับสนุนการฟื้นตัวของ cyanophosห้องปฏิบัติการศึกษาได้ดำเนินการกำหนดสมดุลดูดซับของ cyanophos ในดินในโซลูชั่นของน้ำกลั่นและตัวละลายส่งเสริมแทน SiO2, HPβCD ฮา ผู้ที่ใช้ 80 และรำข้าวที่ใช้เทคนิคสมดุลชุด ชุดสมดุลดูดซับ isotherms ของ cyanophos ในดินในกลั่นน้ำและโซลูชั่นอควีของ SiO2, HPβCD ฮา 80 ผู้ที่ใช้ และรำข้าวในที่เดียวกันความเข้มข้นเป็นข้างในออกแบบการทดลองที่ถูกประเมินกับไมโครกรัมเป็นเครื่อง 40 mL ของ cyanophos ใน stoppered แก้วน้ำทรงกรวย 100 มล เล่มสุดท้ายในแต่ละหนาวถูก 20 mL โดยการเพิ่มไดรฟ์ข้อมูลที่จำเป็นของการแก้ปัญหา cyanophos และน้ำกลั่น หรือโซลูชั่นของ SiO2, HPβCD ฮา ผู้ที่ใช้ 80 และ และรำข้าว การแก้ไขปัญหาเหล่านี้ เพิ่มหนึ่งกรัมของดินแต่ละ และบริการได้ถูกเก็บรักษาที่ 25 ° C สำหรับ h 21 ในการบ่มเพาะวิสาหกิจตามระยะเวลาของการสั่นของ 3 h ทั้งหมดได้ดำเนินการทดลองในซ้ำ การศึกษาเบื้องต้นพบว่า มีการดูดซับของ cyanophos ในดินเพิ่มวัดหลังจากพัก 24 h. ถูก centrifuged ที่ 15000 rpm สำหรับ 10 นาที และจำนวน cyanophos ใน supernatants ถูกประเมิน โดย HPLCจำนวน cyanophos adsorbed ถูกคำนวณเป็นผลต่างระหว่างความเข้มข้นเริ่มต้น cyanophos และความเข้มข้นสมดุลตามนิพจน์ต่อไปนี้: x/m=(C0−Ce) V/W ที่ x / m คือ ความเข้มข้นของ cyanophos ในดิน (กรัมไมโครกรัมเป็นเครื่อง), C0 เป็นความเข้มข้นเริ่มต้น cyanophos (ไมโครกรัมเป็นเครื่อง/มล), Ce มีความเข้มข้น cyanophos สมดุล (ไมโครกรัมเป็นเครื่อง/มล) V คือ ปริมาตรโซลูชัน และ W เป็นน้ำหนักของตัวอย่างดินที่ทำงาน2.4 การการวิเคราะห์ตกค้าง2.4.1. Cyanophos สกัดและวิเคราะห์ตัวอย่างดินถูกสกัด และล้างตามวิธีของ Krause และ al. (1986) ตัวอย่างดิน (20 กรัม) ถูกเขย่ากลไก ด้วยอะซีโตนน้ำ 50 มล (3:1) ไปในขวดจุกแก้วขนาด 500 มล. สารสกัดที่ถูกกรองผ่านแผ่นทำความสะอาดผ้าฝ้าย แล้ว เข้มข้น โดย evaporator โรตารี่ในอ่างน้ำที่ 40 ° C การลบอะซิโตนแล้ว สกัด ด้วย 50 ml ของคลอโรฟอร์มสอง 50 ml ของสารกรอง สารสกัดคลอโรฟอร์มรวมอบแห้งโดยใช้โซเดียมซัลเฟตไดแล้ว หายไปกับความแห้งกร้านที่ 40 ° C ใช้ evaporator โรตารี่ chromatography เหลวประสิทธิภาพสูง (HPLC) กำหนด Cyanophos สกัดจากรากและใบตัวอย่างด้วยอะซิโตนหรือน้ำ – อะซีโตนแล้ว สกัด ด้วยปิโตรเลียมอีเทอร์และ dichloromethane ระยะอินทรีย์ถูกคั่น แห้ง และเข้มข้นกับความแห้งกร้าน (ลูกา et al., 1981) ระยะอินทรีย์ที่ละลายใน 5 ml ของเฮกเซน แล้วล้าง โดยผ่านมันคอลัมน์ prewashed กับ ml 50 เฮกเซน +อะซีโตน (9:1 v/v) คอลัมน์ก็เต็มไป ด้วยกรดอลูมินา (5 กรัม) และโซเดียมซัลเฟต (2 mg) และมี eluted กับ 100 ml ผสมระหว่างโพลี + อะซีโตน (9:1 v/v) (Zaalok และ Sherif, 2011) โซลูชั่น eluted หายไปกับความแห้งกร้าน และสารตกค้างที่ละลายในเมทานอล 1 ml แล้ว วิเคราะห์ ด้วย HPLC กับตรวจจับ UV ที่ 236 nm คอลัมน์ C18 5U (250 มม. × 4.6 mm) ถูกใช้ และระยะเคลื่อนส่วนผสมของน้ำ (70:30, v/v) และเมทานอล อัตราการไหล 1 ml/min เวลาเก็บรักษาของ cyanophos ถูกนาที 3.38 4-cyanophenol metabolite ที่สังเคราะห์ในห้องปฏิบัติการของเรา โดย hydrolyzing cyanophos มี methanolic โซเดียมไฮดรอกไซด์ (ชิบะ et al., 1976) และระบุ โดย HPLC ด้วยเงื่อนไขเดียวกันเป็น cyanophos ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้ เวลาเก็บข้อมูล 4-cyanophenol ถูก 1.33 นาทีมีประเมินประสิทธิภาพของวิธี HPLC โดยประเมินคุณภาพพารามิเตอร์ กู้คืนค่าและข้อจำกัดของการตรวจสอบ ขีดจำกัดของการตรวจสอบ (ลอด) และนับ (LOQ) ได้ถูกประเมินโดยใช้สมการต่อไปนี้ (Thomsen et al., 2003): ลอด = 3.3S0 / b และ LOQ = 10S0 (3) b ที่ S0 คือ ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานของรายการเทียบ และ b เป็นความชัน แบบดอกไม้ที่มีสำคัญกับสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ยอดเยี่ยมของ R2 = 0.994 ลอดและ LOQ ของ cyanophos ได้ 0.26 μg/g และ 0.08 ตามลำดับ μg/g ตามลำดับ ประสิทธิภาพการสกัดขั้นตอนวิเคราะห์ถูกประเมินผ่านทดลองกู้คืนใน triplicate ใช้ P. ว่างธาตุที่สำคัญ และตัวอย่างดินที่ความเข้มข้นแตกต่างกันสอง 0.2 และ 0.5 μg/g เปอร์เซ็นต์ค่าเฉลี่ยของ recoveries ที่ได้รับอยู่ในช่วงระหว่าง 85.1± 5.3%, 90.9± 4.5% และ 88.3± 3.6% ในดิน ทิ้ง และ ราก ตามลำดับ2.4.2. ข้อมูลวิเคราะห์อัตราการสลายตัว (K) และฮาล์ฟ-ไลฟ์ (t 1/2) ที่ได้จากสมการต่อไปนี้: อัตราการสลายตัว (K) = 2.303 ×ลาด ฮาล์ฟ-ไลฟ์ (t 1/2)=0.693/K (Gomaa และ Belal, 1975)คำนวณเป็นเปอร์เซ็นต์เอาของ cyanophos ในวันที่ 3 และ 9: เปอร์เซ็นต์เอา =(C0–C1) /C0×100% C0: เริ่มต้นความเข้มข้นของ cyanophos ในดินและ C1: ความเข้มข้นของ cyanophos ในดิน ในการศึกษานี้ วิเคราะห์สถิติทั้งหมด (ทดสอบการวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบทางเดียว) ที่ทำ โดยซอฟต์แวร์ CoHort 6.311 CoStat ทางสถิติเป็นประเมินความสำคัญของความแตกต่างระหว่างการรักษา โดยส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานและทดสอบของดันแคน (p < 0.05)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 สารกำจัดศัตรูพืชและวัสดุพืช
Cyanophos (Cyanox 50% EC) 0, 0-dimethyl 0- (4 cyanophenyl) phosphorothioate ที่ได้รับจากสารกำจัดศัตรูพืชเกษตรกลางห้องปฏิบัติการเกษตรศูนย์วิจัย Dokki, Gaiza อียิปต์.
ต้นกล้ากล้าของใบกว้างทั่วไป ( Plantago สำคัญ L. ) ถูกนำมาใช้ในการทดลองบำบัดจากทุ่งหญ้าในที่ดิน Zagazig มหาวิทยาลัย Zagazig, Sharkia เรทอียิปต์.
2.2 การออกแบบการทดลอง
เพื่อศึกษาการกำจัดของ cyanophos จากดินเก้ารักษาแต่ละประกอบด้วยห้าซ้ำ-ได้ดำเนินการดังต่อไปนี้ (1) Cyanophos ที่ปนเปื้อนในดินโดยไม่ต้องเบาพืช (2) T1: Cyanophos ดินที่ปนเปื้อนโดยไม่ต้องพืช (3) T2: Cyanophos ดินที่ปนเปื้อนด้วยที่สำคัญพีเท่านั้น (4) T3: Cyanophos ที่ปนเปื้อนในดินเบากับพีที่สำคัญเท่านั้น (5) T4: Cyanophos ดินที่ปนเปื้อนกับพีที่สำคัญและที่แก้ไขเพิ่มเติมกับซิลิคอนไดออกไซด์ที่ละลายน้ำได้ (SiO2) ซิลิกาที่เรียกว่า 750 มิลลิกรัม / ลิตรสำหรับความเข้มข้นรวมของ 187.5 มิลลิกรัมต่อกิโลกรัม (6) T5: (. เฉิน et al, 2010) Cyanophos ดินที่ปนเปื้อนกับพีที่สำคัญและที่แก้ไขเพิ่มเติมกับ 2 ไฮดรอกซีเบต้าสัมพรรค (HPβCD) ที่ 1.0% (7) T6: Cyanophos ดินที่ปนเปื้อนกับพีที่สำคัญและที่แก้ไขเพิ่มเติมด้วยสารละลายกรดฮิวมิก (HA) 10 มิลลิกรัม / ลิตร (ซากพืช WSG 90, ออแกน, ฮังการี) รายงานความเข้มข้นไมเซลล์ที่สำคัญของ HA (Guetzloff และข้าวปี 1994 ) (8) T7: Cyanophos ดินที่ปนเปื้อนกับกล้าและที่แก้ไขเพิ่มเติมด้วยซอร์ polyoxyethylene monooleate (Tween 80) ที่ 9.2 มิลลิกรัมต่อลิตรซึ่งสอดคล้องกับความเข้มข้น 0.5 สำคัญไมเซลล์ (CMC) ซึ่ง CMC ของ Tween 80 ได้รับการกำหนดให้เป็น 13-45 mg / L (เอ็ดเวิร์ด et al., 1990 และ Mitton et al., 2012) (9) T8: Cyanophos ดินที่ปนเปื้อนกับพีที่สำคัญและที่แก้ไขเพิ่มเติมกับรำข้าว ณ วันที่ 1 กรัม / ลิตร
ในการทดลอง (3) - (8), หม้อละหนึ่งต้นกล้าพีสำคัญ การทดสอบการดูดซึมพืชแต่ละคนทั้งที่ได้ดำเนินการในดินกระถาง 9 วัน อากาศแห้งดินร่วนดินร่อน (อินทรียวัตถุ 1.79% ค่า pH 7.8 การนำไฟฟ้า 2.36 mS / m; Aboutwala, Minya อัล Qamh, Sharqia อียิปต์) ถูกวางไว้ในกระถางพลาสติก หม้อที่เต็มไปด้วย 500 กรัมของดินอากาศแห้ง หลังจากปลูก cyanophos ละลายในอะซีโตนได้รับการถูกแทงเข้าไปใน 150 มิลลิลิตรน้ำกลั่นใช้เพื่อการชลประทานที่จะได้รับความเข้มข้นของเดิม 20 ไมโครกรัม / กรัม ความเข้มข้น Cyanophos ในน้ำชลประทานถูกบันทึกอยู่ในหม้อด้วยความระมัดระวังจากการสัมผัสโดยตรงกับใบพืช รักษาโดยไม่ต้อง cyanophos ถูกแทงลงไปในดินทำหน้าที่เป็นผู้ควบคุม หลังจากวันที่สามและเก้าพืชสัมผัสและการควบคุมที่ถูกเก็บรวบรวม รากพืชจากดินที่ถูกล้างในการทำงานน้ำประปาสองนาทีและเปื้อนแห้ง โรงงานชำแหละสู่รากแต่ละหน่อแล้วสี่กรัมของใบและรากที่นอกเหนือไปจากยี่สิบกรัมของดินสำหรับการวิเคราะห์สารกำจัดศัตรูพืช หม้อทั้งหมดถูกรดน้ำด้วย 50 มล. น้ำประปาทุกสี่วันที่มีการเพิ่มน้ำเพิ่มเติมเมื่อมีความจำเป็น.
2.3 ตัวแทนการกู้คืนที่เพิ่มขึ้นของ cyanophos
การศึกษาในห้องปฏิบัติการได้ดำเนินการเพื่อตรวจสอบความสมดุลการดูดซับของ cyanophos ในดินในการแก้ปัญหาน้ำกลั่นและการละลายเสริมสร้างตัวแทน SiO2, HPβCD, HA, Tw 80 และรำข้าวโดยใช้เทคนิคสมดุลชุด การดูดซับความสมดุล Batch isotherms ของ cyanophos ในดินในน้ำกลั่นและการแก้ปัญหาน้ำของ SiO2, HPβCD, HA, Tw 80 และรำข้าวที่ความเข้มข้นเดียวกันกับข้างต้นในการออกแบบการทดลองได้รับการประเมิน 40 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร cyanophos ใน 100 มล glass- จุกขวดรูปกรวย เล่มสุดท้ายในแต่ละขวดเป็น 20 มลโดยการเพิ่มของปริมาณที่จำเป็นของการแก้ปัญหา cyanophos และน้ำกลั่นหรือการแก้ปัญหาของ SiO2, HPβCD, HA, Tw 80 และและรำข้าว เพื่อแก้ปัญหาเหล่านี้หนึ่งกรัมของดินแต่ละถูกบันทึกและสารแขวนลอยที่เกิดถูกเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 21 ชั่วโมงในการบ่มเพาะตามระยะเวลาของการสั่นของ 3 ชั่วโมง การทดสอบทั้งหมดได้ดำเนินการในที่ซ้ำกัน การศึกษาเบื้องต้นพบว่าไม่มีการเพิ่มขึ้นวัดได้ในการดูดซับของ cyanophos ในดินหลังจาก 24 ชั่วโมง แขวนลอยถูกหมุนเหวี่ยงที่ 15,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาทีและปริมาณของ cyanophos ใน supernatants ถูกประเมินโดยวิธี HPLC.
ปริมาณการดูดซับ cyanophos ที่คำนวณได้เป็นความแตกต่างระหว่างความเข้มข้น cyanophos เริ่มต้นและความเข้มข้นของความสมดุลตามนิพจน์ต่อไปนี้: x / m = (C0-Ce) V / W ที่ x / m คือความเข้มข้นของ cyanophos ในดิน (g / g), C0 เป็นความเข้มข้น cyanophos ครั้งแรก (ไมโครกรัม / มิลลิลิตร), Ce คือความเข้มข้น cyanophos สมดุล (ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) , V คือปริมาตรการแก้ปัญหาและ W คือน้ำหนักของตัวอย่างดินที่ใช้.
2.4 การวิเคราะห์สารพิษตกค้าง
2.4.1 สกัด Cyanophos และการวิเคราะห์
ตัวอย่างดินถูกสกัดและการทำความสะอาดขึ้นดังต่อไปนี้วิธีการกรอสและอัล (1986) ตัวอย่างดิน (20 กรัม) ถูกเขย่ากล 50 มล. ของน้ำอะซิโตน (3: 1) เป็นเวลาหนึ่งชั่วโมงในขวดจุกแก้ว 500 มล. สารสกัดถูกกรองผ่านแผ่นทำความสะอาดผ้าฝ้ายแล้ว 50 มิลลิลิตรกรองเป็นความเข้มข้นโดยใช้เครื่องระเหยแบบหมุนในอ่างน้ำที่ 40 ° C ถึงลบอะซีโตนและสกัดแล้วสองครั้งกับ 50 มิลลิลิตรคลอโรฟอร์ม สารสกัดคลอโรฟอร์มรวมถูกทำให้แห้งโดยใช้โซเดียมซัลเฟตปราศจากแล้วระเหยแห้งที่ 40 องศาเซลเซียสโดยใช้เครื่องระเหยแบบหมุนสำหรับประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC) ความมุ่งมั่น Cyanophos ถูกสกัดจากรากและใบตัวอย่างด้วยอะซิโตนหรือน้ำอะซิโตนและสกัดด้วยปิโตรเลียมอีเทอร์และไดคลอโรมีเทน เฟสอินทรีย์ถูกแยกออกแห้งและเข้มข้นเพียงเพื่อความแห้งกร้าน (ลูกา et al., 1981) เฟสอินทรีย์ถูกละลายใน 5 มิลลิลิตรของเฮกเซนจากนั้นทำความสะอาดขึ้นโดยผ่านมันผ่าน prewashed คอลัมน์ที่มี 50 มล. ของเฮกเซน + อะซิโตน (9: 1 v / v) คอลัมน์ก็เต็มไปด้วยกรดอะลูมินา (5 กรัม) + โซเดียมซัลเฟต (2 มก.) และได้รับการชะ 100 มิลลิลิตรส่วนผสมของเฮกเซน + อะซิโตน (9: 1 v / v) (Zaalok และ Sherif 2011) วิธีการแก้ปัญหาที่ถูกชะระเหยที่จะแห้งกร้านและที่เหลือก็เลือนหายไปใน 1 มิลลิลิตรเมทานอลและวิเคราะห์แล้วโดย HPLC กับเครื่องตรวจจับรังสียูวีที่ 236 นาโนเมตร คอลัมน์ C18 5U (250 มิลลิเมตร× 4.6 มิลลิเมตร) ถูกนำมาใช้และเฟสเคลื่อนที่เป็นส่วนผสมของเมทานอลและน้ำ (70:30, v / v) อัตราการไหล 1 มล. / นาที เวลาการเก็บรักษา cyanophos เป็น 3.38 นาที metabolite 4 cyanophenol ถูกสังเคราะห์ในห้องปฏิบัติการของเราโดยการไฮโดรไลซ์ cyanophos กับโซดาไฟเมทานอล (ชิบะ et al., 1976) และระบุ HPLC ด้วยเงื่อนไขเดียวกับ cyanophos ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้เวลาเก็บของ 4 cyanophenol เป็น 1.33 นาที.
ประสิทธิภาพการทำงานของวิธี HPLC ได้รับการประเมินโดยการประเมินพารามิเตอร์ที่มีคุณภาพเช่นค่าการกู้คืนและข้อ จำกัด ของการตรวจสอบ ข้อ จำกัด ของการตรวจสอบ (LOD) และปริมาณ (LOQ) ได้รับการประเมินโดยใช้สมการดังต่อไปนี้ (ทอมเซ่น, et al, 2003.) LOD = 3.3S0 / b และ LOQ = 10S0 / b (3) ที่ไหน S0 เป็นส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานของสายการสอบเทียบและ B คือความลาดชัน เป็นเส้นตรงอย่างมีนัยสำคัญที่มีค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ที่ดีของ R2 = 0.994 LOD และ LOQ ของ cyanophos เป็น 0.08 ไมโครกรัม / กรัมและ 0.26 ไมโครกรัม / กรัมตามลำดับ ประสิทธิภาพการสกัดของขั้นตอนการวิเคราะห์ที่ได้รับการประเมินผ่านการทดลองดำเนินการในการกู้คืนเพิ่มขึ้นสามเท่าโดยใช้พีป้อมว่างเปล่าตัวอย่างดินที่สำคัญและที่สองความเข้มข้นที่แตกต่างกัน, 0.2 และ 0.5 ไมโครกรัม / กรัม ร้อยละเฉลี่ยของกลับคืนได้อยู่ระหว่าง 85.1 ± 5.3%, 90.9 ± 4.5% และ 88.3 ± 3.6% ในดินใบและรากตามลำดับ.
2.4.2 การวิเคราะห์ข้อมูล
อัตราการย่อยสลาย (K) และครึ่งชีวิต (t 1/2) ที่ได้รับจากสมการดังต่อไปนี้: อัตราการย่อยสลาย (K) = 2.303 ×ลาดชัน ครึ่งชีวิต (t 1/2) = 0.693 / K (โกและ Belal, 1975).
ร้อยละของการกำจัด cyanophos ในวันที่ 3 และ 9 ที่คำนวณได้เป็น: การกำจัดร้อยละ = (C0-C1) / C0 × 100% C0 : ความเข้มข้นเริ่มต้นของ cyanophos ในดินและ C1: ความเข้มข้นของ cyanophos ในดิน ในการศึกษาครั้งนี้ทั้งหมดการวิเคราะห์ทางสถิติ (ทางเดียวการทดสอบ ANOVA) ดำเนินการโดย CoStat 6.311 หมู่ซอฟแวร์ ความสำคัญของความแตกต่างระหว่างการรักษาที่ได้รับการประเมินทางสถิติโดยเบี่ยงเบนมาตรฐานและการทดสอบของดันแคน (p <0.05)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . สารเคมีและวัสดุพืช
cyanophos ( cyanox 50 % EC ) 0 0-dimethyl 0 - ( 4-cyanophenyl ) phosphorothioate ได้มาจากกลางการเกษตรสารเคมีห้องปฏิบัติการ ศูนย์วิจัยเกษตร dokki gaiza , อียิปต์ , .
ต้นกล้าของต้นไม้ใบกว้างทั่วไป ( แพลนตาโกสาขา L . ) ที่ถูกใช้ในการบําบัดจากการทดลองของทุ่งหญ้าที่ดินใน egypt . kgm มหาวิทยาลัยอียิปต์ egypt . kgm ชาร์เกีย , Al .
2.2 .
การออกแบบการทดลองเพื่อประเมินผลการบำบัด cyanophos จากดิน , การรักษาแต่ละประกอบด้วยห้านาทีได้ ดังนี้ ( 1 ) cyanophos ปนเปื้อนดินสังเคราะห์โดยพืช ( 2 ) T1 : cyanophos ปนเปื้อนดินปราศจากพืช ( 3 ) T2 : cyanophos ดินปนเปื้อนกับหน้าหลักเท่านั้น ( 4 ) T3 :cyanophos ปนเปื้อนดินสังเคราะห์กับหน้าหลักเท่านั้น ( 5 ) T4 : cyanophos ดินปนเปื้อนกับหน้า หลัก และผสมกับซิลิคอนไดออกไซด์ ( SiO2 ) ละลายซิลิกาที่เรียกว่า , 750 มิลลิกรัมต่อลิตรความเข้มข้นรวมของ 187.5 กกมิลลิกรัม ( 6 ) T5 : cyanophos ดินปนเปื้อนกับหน้า หลัก และผสมกับ 2-hydroxypropyl-beta-cyclodextrin ( HP บีตา CD ) ที่ 1.0 % ( Chen et al . , 2010 ) ( 7 ) T6 :cyanophos ดินปนเปื้อนกับหน้า หลัก และผสมกับสารละลายกรดฮิวมิก ( ฮา ) 10 mg / l ( ฮิวมัส wsg 90 คนเล่นออร์แกน ฮังการี ) , รายงานวิเคราะห์ความเข้มข้นไมเซลล์ของฮา ( guetzloff และข้าว , 1994 ) ( 8 ) * * 3 : cyanophos ปนเปื้อนดินกับต้นไม้และที่แก้ไขเพิ่มเติมกับพอลีออกซีเอทิลีนซอบิแทนโมโนโอลิ ( ทวีน 80 ) ที่ 9.2 มิลลิกรัมต่อลิตรที่ความเข้มข้น 0.5 วิกฤตการเกิดไมเซลล์ ( CMC )ที่บริษัทของ Tween 80 ถูกกำหนดเป็น 13 – 45 mg / l ( Edwards et al . , 1990 และมิตตัน et al . , 2012 ) ( 9 ) T8 : cyanophos ดินปนเปื้อนกับหน้า หลัก และผสมกับรำข้าว 1 กรัม / ลิตร
ในการทดลอง ( 3 ) และ ( 8 ) แต่ละหม้อมีต้นกล้าของหน้าหลัก แต่ละโรงงานทั้งหมดใช้ทดสอบดินในกระถาง 9 วัน เครื่องอบแห้งขนาดดินดินร่วนดินเหนียว ( สารอินทรีย์ 1.79 %พีเอช 7.8 , การนำไฟฟ้า 2.36 MS / m ; aboutwala Minya egypt . kgm qamh , อัล , อียิปต์ ) ถูกวางในกระถางพลาสติก หม้อที่เต็มไปด้วย 500 กรัมของอากาศในดินแห้ง หลังจากปลูก cyanophos ละลายในอะซิโตนถูกลง 150 มิลลิลิตร น้ำใช้เพื่อการชลประทานเพื่อให้ได้ความเข้มข้นเดิม 20 µกรัม / กรัมcyanophos ความเข้มข้นในน้ำถูกเพิ่มไปยังหม้ออย่างระมัดระวังจากการติดต่อโดยตรงกับโรงงาน ยอด การรักษาโดยไม่ cyanophos ถูกแทงลงในดินทำหน้าที่ควบคุม หลังจาก 3 และ 9 วัน สัมผัสพืชและควบคุมการเก็บรวบรวม รากพืชจากดินในน้ำล้าง วิ่งสองนาทีและลบแห้งผ่าเข้าไปในรากพืชแต่ละหน่อแล้ว 4 กรัมของใบและราก นอกจาก 20 กรัมของดินเพื่อวิเคราะห์หายาฆ่าแมลง ทั้งหมดหม้อถูกอาบไปด้วย 50 มล. น้ำทุกๆ 4 วัน ด้วยการเพิ่มน้ำเพิ่มเติมเมื่อจำเป็น
2.3 เจ้าหน้าที่ปรับปรุงการกู้คืน cyanophos
การศึกษาในห้องปฏิบัติการ มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาสมดุลการดูดซับของดินใน cyanophos ในโซลูชั่นของน้ำกลั่นและการละลายเพิ่มตัวแทน , SiO2 , HP บีตา CD , ฮา , TW 80 และน้ำมันรำข้าวโดยใช้ชุดของเทคนิค ชุดสมดุลของ cyanophos ไอโซเทอมการดูดซับในดินในน้ำกลั่นและสารละลายของ SiO2 , HP บีตา CD , ฮา , TW 80และรำข้าวที่ความเข้มข้นเดียวกันข้างต้นในการออกแบบการทดลองจำนวน 40 µ g / ml cyanophos 100 มิลลิลิตร ขวดแก้ว stoppered รูปกรวย . เล่มสุดท้ายในแต่ละขวด 20 มิลลิลิตร โดยการเพิ่มของปริมาณความต้องการของ cyanophos โซลูชั่น และน้ำกลั่น หรือโซลูชั่นของ SiO2 , HP บีตา CD , ฮา , TW 80 , และรำข้าว เพื่อแก้ปัญหาเหล่านี้ หนึ่งกรัมของดินแต่ละคือเพิ่มและผลรับน้ำหนักไว้ที่ 25 ° C ( 21 ชั่วโมงในตู้อบต่อไปนี้ระยะเวลาของการสั่นของ 3 ชั่วโมง ทุกการทดลองในที่ซ้ำกัน การศึกษาเบื้องต้น พบว่า ไม่มีวิธีการเพิ่มขึ้นในการดูดซับ cyanophos ในดินหลัง 24 ชั่วโมง ช่วงล่างเป็นระดับที่ 15000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาทีและปริมาณของ cyanophos ใน supernatants ประมาณ 2 .
ปริมาณการดูดซับ cyanophos คำนวณเป็นความแตกต่างระหว่างเริ่มต้น cyanophos ความเข้มข้นและสมดุลความเข้มข้นตามการแสดงออกดังต่อไปนี้ : X / m = ( C0 − CE ) v / W , x / M มีความเข้มข้นของ cyanophos ในดิน ( µ g / g )เป็นสมาธิขั้นต้น ( C0 cyanophos µ g / ml ) , CE เป็นสมดุล cyanophos สมาธิ ( µ g / ml ) , V เป็นโซลูชั่นที่ปริมาณและน้ำหนักคือน้ำหนักของดินตัวอย่างที่ใช้ .
2.4 . การวิเคราะห์สารตกค้าง
เครื่องมือกำจัดเพื่อย้าย . การสกัดและวิเคราะห์ตัวอย่างดิน cyanophos
ถูกสกัดและทำความสะอาดตามวิธีของครอส et al . ( 1986 )ตัวอย่างดิน ( 20 กรัม ) สั่นสะเทือนกลไกกับ 50 มิลลิลิตร ) และน้ำ ( 3 : 1 ) สำหรับหนึ่งชั่วโมง ใน 500 ml จุกแก้วขวด สารสกัดที่ถูกกรองผ่านแผ่นสะอาดของฝ้าย แล้ว 50 มิลลิลิตร กรองนำโดยใช้เครื่องระเหยแบบหมุนในอ่างน้ำที่ 40 ° C เพื่อลบอะซิโตนและแยกสองครั้งกับ 50 มิลลิลิตร คลอโรฟอร์มสารสกัดคลอโรฟอร์มรวมอบแห้งโดยใช้ไฮดรัสโซเดียมซัลเฟตแล้วระเหยแห้งที่อุณหภูมิ 40 องศา C โดยใช้เครื่องระเหยแบบหมุนสำหรับวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC ) มุ่งมั่น cyanophos สกัดจากรากและใบตัวอย่างด้วยอะซิโตน หรืออะซิโตน–น้ำแล้วสกัดด้วยอีเทอร์ และไดคลอโรมีเทน ปิโตรเลียม ระยะอินทรีย์แยก แห้งและน้ำก็แห้ง ( ลุค et al . , 1981 ) เฟสสารอินทรีย์ที่ละลายในน้ำ 5 มิลลิลิตร แล้วทำความสะอาดโดยผ่านมันผ่านคอลัมน์ prewashed กับ 50 มิลลิลิตร สารอะซิโตน ( 9 : 1 v / v ) คอลัมน์ที่เต็มไปด้วยกรดอะลูมินา ( 5 กรัม ) โซเดียมซัลเฟต ( 2 มก. ) และตัวอย่าง 100 มล. ผสมสารอะซิโตน ( 9 : 1 v / v ) ( zaalok และเชอรีฟ , 2011 )ตัวอย่างสารละลายที่ระเหยแห้ง และกากมันที่ละลายใน 1 มิลลิลิตร แล้วนำข้อมูลมาวิเคราะห์โดย HPLC เมทานอลกับ UV เครื่องตรวจจับที่ 236 นาโนเมตร มี 5U คอลัมน์ C18 250 มม. × 4.6 มม. ) ที่ใช้ และระยะเคลื่อนที่เป็นส่วนผสมของเมทานอลและน้ำ ( 70 : 30 , v / v ) อัตราการไหลเท่ากับ 1 มิลลิลิตร / นาที ในเวลา cyanophos เป็น 3.38 นาที