Stanley Cohen, Paul Berg and Herbert Boyer made what would be one of the first genetic engineering experiments, in 1973. They demonstrated that the gene for frog ribosomal RNA could be transferred into bacterial cells and expressed by them. First they developed a chemical cell transformation method for Escherichia coli,[5] then they constructed a plasmid, which would be the vector, called pSC101.[6] This plasmid contained a single site for the restriction enzyme EcoRI and a gene for tetracycline resistance. The restriction enzyme EcoRI was used to cut the frog DNA into small segments. Next, the frog DNA fragments were combined with the plasmid, which had also been cleaved with EcoRI. The sticky ends of the DNA segments aligned themselves and were afterwards joined together using DNA ligase. The plasmids were then transferred into a strain of E. coli and plated onto a growth medium containing tetracycline. The cells that incorporated the plasmid carrying the tetracycline resistance gene grew and formed a colony of bacteria. Some of these colonies consisted of cells that carried the frog ribosomal RNA gene. The scientists then tested the colonies that formed after growth for the presence of frog ribosomal DNA. (Thieman, W.J and Palladino, M.A., Introduction to Biotechnology, Pearson Education, Benjamin Cummings, 2024. page 55)
สแตนเลย์โคเฮน, พอลเบิร์กและเฮอร์เบิร์บอยเยอร์ทำสิ่งที่จะเป็นหนึ่งในคนแรกทดลองพันธุวิศวกรรมในปี 1973 พวกเขาแสดงให้เห็นว่ายีน RNA กบโซมอลจะถูกโอนเข้าสู่เซลล์ของแบคทีเรียและแสดงโดยพวกเขา ก่อนที่พวกเขาพัฒนาวิธีการเปลี่ยนแปลงของเซลล์เคมีสำหรับเชื้อ Escherichia coli, [5] แล้วพวกเขาก็สร้างพลาสมิดซึ่งจะเป็นเวกเตอร์ที่เรียกว่า pSC101. [6] พลาสมิดนี้มีเว็บไซต์เดียวสำหรับเอนไซม์ จำกัด EcoRI และยีนต้านทานยา . เอนไซม์ จำกัด EcoRI ที่ถูกใช้ในการตัดดีเอ็นเอกบเป็นส่วนเล็ก ๆ ถัดไปดีเอ็นเอกบถูกรวมกับพลาสมิดที่ยังได้รับการเกาะติดกับ EcoRI ปลายเหนียวของกลุ่มดีเอ็นเอชิดตัวเองและหลังจากนั้นได้เข้าร่วมกันโดยใช้ดีเอ็นเอลิกาเซ พลาสมิดถูกย้ายแล้วเป็นสายพันธุ์ของเชื้อ E. coli และชุบลงบนสื่อที่มีการเจริญเติบโต tetracycline เซลล์ที่ บริษัท ที่พลาสมิดแบกยีนต้านทานยาขึ้นเรื่อย ๆ และเกิดขึ้นอาณานิคมของแบคทีเรีย บางส่วนของอาณานิคมเหล่านี้ประกอบด้วยเซลล์ที่ดำเนินกบโซมอลอาร์เอ็นเอของยีน นักวิทยาศาสตร์จากนั้นทดสอบโคโลนีที่เกิดขึ้นหลังจากการเจริญเติบโตของการปรากฏตัวของดีเอ็นเอไรโบโซมกบ (Thieman, WJ และพอลลา, MA, รู้เบื้องต้นเกี่ยวกับเทคโนโลยีชีวภาพการศึกษาเพียร์สัน, เบนจามินคัมมิ่งส์ 2024 หน้า 55)
การแปล กรุณารอสักครู่..
