Sonne-Hansen & Ahring, 1999). Recently, a new strictly
chemolithoautotrophic, iron-reducing species, ‘Geothermobacterium
ferrireducens’, was isolated from hot springs at
Yellowstone National Park (USA). This organism represents
the only member of the family Thermodesulfobacteriaceae
that is unable to reduce sulfate (Kashefi et al., 2002).
We describe here the isolation and characterization of
another novel thermophilic, strictly chemolithoautotrophic,
sulfate-reducing bacterium. The new isolate was obtained
from a sample of an active black smoker collected at a
depth of 2420 m at the Kairei vent field (25u199 S, 70u 029 E)
on the Central Indian Ridge (Van Dover et al., 2001) in
April 2001. The chimney fragment was collected by the
ROV Jason and was placed in an isolated container for the
trip to the surface. Subsamples of the chimney fragment
were ground in a mortar and the slurry was stored under an
atmosphere of nitrogen at 4 uC until used as an inoculum.
Initial enrichments were done using the following medium
that contained (l21 distilled water): 29 g NaCl; 7 g
MgSO4.7H2O; 4 g NaOH; 0?5 g KCl; 2 g Na2S2O3.5H2O;
1?66 g MgCl2.6H2O; 0?4 g CaCl2.2H2O; 0?2 g NH4Cl;
0?3 g K2HPO4.3H2O; and 10 ml of a trace element
stock solution according to Boone et al. (1989) (http://
methanogens.pdx.edu/OCM_media.html). The medium
was prepared with anoxic water and, prior to autoclaving,
the pH was adjusted to pH 6 at room temperature with
sulfuric acid. The medium was dispensed under a CO2
atmosphere into Bellco tubes and capped with butylrubber
stoppers. After inoculation with the sulfide slurry
[10% (v/v) inoculum], the tubes were pressurized with H2
(100 %; 138 kPa) and incubated at 70 uC without shaking.
After 4 days, cultures of small motile rods producing
sulfide were observed. Enrichments that produced sulfide
were subsequently transferred to a sulfate-reducing bacteria
(SRB) medium that consisted of (l21 distilled water): 20 g
NaCl; 4 g Na2SO4; 3 g MgCl2.6H2O; 0?2 g KH2PO4; 0?5 g
KCl; 0?25 g NH4Cl; 3?46 g PIPES; 0?15 g CaCl2.2H2O; 1 mg
resazurin; 2 mg sodium tungstate; 0?5 mg sodium selenate;
1 ml vitamin mixture (Widdel & Bak, 1992); 1 ml thiamin
solution (Widdel & Bak, 1992); and 0?05 mg vitamin B12.
The pH of the medium was adjusted to pH 6?7 at room
temperature using 5 M HCl. After autoclaving under N2
(100 %), the pH had decreased to 6?5. Medium (10 ml) was
dispensed anaerobically in 50 ml vials sealed with butylrubber
stoppers and reduced with 0?1 ml of a 10% (w/v)
Na2S.9H2O sterile solution; H2/CO2 (80 : 20; 200 kPa) was
used as the gas phase. Cultures were incubated at 70 uC with
shaking (150 r.p.m.). The pH of the medium in uninoculated
vials checked at room temperature after incubation
at 70 uC decreased from 6?5 to 6?3.
One pure culture, strain CIR29812T, was obtained by
using shake dilution tubes (Widdel & Bak, 1992) of SRB
solidified medium, where agar was replaced by 0?7% (w/v)
Phytagel (Sigma). After 6 days incubation at 70 uC, smooth,
brown, spindle-shaped colonies of approximately 1 mm in
Sonne-Hansen & Ahring, 1999) ล่าสุด ใหม่อย่างเคร่งครัดchemolithoautotrophic เหล็กลดสปีชีส์, ' Geothermobacteriumferrireducens' ถูกแยกจากแหล่งน้ำพุร้อนที่อุทธยานแห่งชาติ (สหรัฐอเมริกา) หมายถึงสิ่งมีชีวิตนี้สมาชิกเพียงหนึ่งเดียวของครอบครัว Thermodesulfobacteriaceaeที่ไม่สามารถลดซัลเฟต (Kashefi et al., 2002)เราถึงการแยกและคุณสมบัติของอีกนวนิยาย thermophilic, chemolithoautotrophic อย่างเคร่งครัดซัลเฟตลดแบคทีเรีย แยกใหม่กล่าวจากตัวอย่างสูบบุหรี่สีดำเป็นงานทางการลึกเมตร 2420 ที่ฟิลด์ระบาย Kairei (25u199 S, 70u 029 E)บนริดจ์อินเดียกลาง (รถตู้โดเวอร์และ al., 2001) ใน2001 เมษายน ส่วนปล่องไฟถูกรวบรวมโดยการROV Jason และถูกวางไว้ในภาชนะที่แยกต่างหากสำหรับการเดินทางไปยังพื้นผิว Subsamples ส่วนปล่องไฟมีพื้นดินในครก และน้ำถูกเก็บไว้ภายใต้การบรรยากาศของไนโตรเจนที่ uC 4 จนกระทั่งใช้เป็น inoculumทำ enrichments เริ่มต้นใช้สื่อต่อไปนี้ที่อยู่ (l21 กลั่นน้ำ): 29 g NaCl 7 gMgSO4.7H2O 4 กรัม NaOH 0 ? 5 กรัม KCl 2 g Na2S2O3.5H2O1 ? g 66 MgCl2.6H2O 0 ? 4 กรัม CaCl2.2H2O 0 ? 2 g NH4Cl0 ? g 3 K2HPO4.3H2O และ 10 ml ของจุลธาตุแก้ปัญหาสินค้าคงคลังตาม Boone et al. (1989) (ของ http://methanogens.pdx.edu/OCM_media.html) สื่อได้เตรียมน้ำ anoxic และ ก่อน autoclavingถูกปรับ pH pH 6 อุณหภูมิห้องด้วยกรดซัลฟิวริก สื่อมีคำภายใต้เป็น CO2บรรยากาศใน Bellco ท่อ และปรบมือ ด้วย butylrubberจุก หลังจาก inoculation ด้วยสารละลายซัลไฟด์[inoculum 10% (v/v)], หลอดไม่หนีกับ H2(100%; 138 kPa) และ incubated ที่ uC 70 ไม่สั่นหลังจาก 4 วัน วัฒนธรรมของก้าน motile ขนาดเล็กที่ผลิตนายสุภัคซัลไฟด์ Enrichments ที่ผลิตซัลไฟด์ต่อมาได้โอนไปแบคทีเรียที่ลดซัลเฟตปานกลาง (SRB) ซึ่งประกอบด้วย (น้ำกลั่น l21): 20 กรัมNaCl 4 g Na2SO4 3 g MgCl2.6H2O 0 ? 2 g KH2PO4 0 ? 5 กรัมKCl 0 ? g 25 NH4Cl 3 ? 46 g ท่อ 0 ? 15 กรัม CaCl2.2H2O 1 มิลลิกรัมresazurin 2 มิลลิกรัมโซเดียม tungstate 0 ? 5 มิลลิกรัมโซเดียม selenate1 ml ผสมวิตามิน (Widdel & บัค 1992); มล. 1 thiaminโซลูชั่น (Widdel & บัค 1992); และ 0 ? 05 มิลลิกรัมวิตามินบี 12ปรับ pH ของตัวกลางมี pH 6 ? 7 ห้องอุณหภูมิที่ใช้ 5 M HCl หลังจาก autoclaving ภายใต้ N2(100%), ลดลงถึง 6 pH ? 5 มีขนาดกลาง (10 มล.)คำ anaerobically ในการปิดผนึก ด้วย butylrubber vials 50 mlจุก และลดลง ด้วย 0 ? 1 ml 10% (w/v)Na2S.9H2O กอซโซลูชั่น มี H2/CO2 (80:20, 200 kPa)ใช้เป็นระยะก๊าซ วัฒนธรรมถูก incubated ที่ uC 70 ด้วยสั่น (รอบ 150 ต่อนาที) PH ของกลางใน uninoculatedvials ตรวจหลังจากบ่มที่อุณหภูมิห้องที่ 70 uC ลดลงจาก 6 ? 5-6 ? 3วัฒนธรรมบริสุทธิ์หนึ่ง ต้องใช้ CIR29812T ได้รับโดยใช้ปั่นท่อการเจือจาง (Widdel & บัค 1992) ของ SRBหล่อปานกลาง agar ซึ่งถูกแทน ด้วย 0 ? 7% (w/v)Phytagel (ซิกมา) หลังจากฟักตัว 6 วันที่ 70 uC ราบรื่นสีน้ำตาล รูปแกนอาณานิคมประมาณ 1 มม.ใน
การแปล กรุณารอสักครู่..

Sonne-Hansen & Ahring, 1999) เมื่อเร็ว ๆ นี้ใหม่อย่างเคร่งครัด
chemolithoautotrophic ชนิดเหล็กลด 'Geothermobacterium
ferrireducens'
ถูกแยกออกจากบ่อน้ำพุร้อนที่อุทยานแห่งชาติเยลโลว์สโตน(USA) ชีวิตนี้เป็นเพียงสมาชิกคนหนึ่งของครอบครัว Thermodesulfobacteriaceae ว่าไม่สามารถที่จะลดซัลเฟต (Kashefi et al., 2002). เราอธิบายที่นี่แยกและลักษณะของอุณหภูมินวนิยายอีก chemolithoautotrophic อย่างเคร่งครัดแบคทีเรียซัลเฟตลด แยกใหม่ที่ได้รับจากกลุ่มตัวอย่างของผู้สูบบุหรี่สีดำที่ใช้งานที่เก็บรวบรวมได้ในระดับความลึก2,420 เมตรที่สนามระบาย Kairei (25u199 S, 70U 029 E) ในอินเดียกลางสัน (Van โดเวอร์ et al., 2001) ในเมษายน2001 . ส่วนปล่องไฟที่ถูกเก็บรวบรวมโดยROV เจสันและถูกวางไว้ในภาชนะที่แยกสำหรับการเดินทางไปยังพื้นผิว subsamples ส่วนของปล่องไฟมาบดในครกและสารละลายที่ถูกเก็บไว้ภายใต้บรรยากาศของไนโตรเจนที่4 UC จนใช้เป็นหัวเชื้อ. enrichments ถูกเริ่มต้นทำโดยการใช้สื่อดังต่อไปนี้ที่มี(น้ำกลั่น L21): 29 กรัมโซเดียมคลอไรด์; 7 กรัมMgSO4.7H2O; 4 กรัม NaOH; 0 5 กรัมโพแทสเซียมคลอไรด์; 2 กรัม Na2S2O3.5H2O; 1 66 กรัม MgCl2.6H2O; 0 4 กรัม CaCl2.2H2O; 0 2 กรัม NH4Cl; 0 3 กรัม K2HPO4.3H2O; และ 10 มล. ของธาตุแก้ปัญหาหุ้นตามเนet al, (1989) (http: // methanogens.pdx.edu/OCM_media.html) สื่อที่ถูกจัดทำขึ้นด้วยน้ำซิกและก่อนที่จะนึ่งฆ่าเชื้อ, ค่าพีเอชที่จะมีการปรับค่า pH 6 ที่อุณหภูมิห้องที่มีกรดซัลฟูริก สื่อที่ได้รับการจ่ายภายใต้ CO2 บรรยากาศเข้าไปในท่อ Bellco และปกคลุมด้วย butylrubber stoppers หลังจากฉีดวัคซีนกับสารละลายซัลไฟด์[10% (v / v) หัวเชื้อ] หลอดที่ถูกแรงดันกับ H2 (100%; 138 ปาสคาล). และบ่มที่ 70 UC โดยไม่ต้องสั่นหลังจากวันที่4 วัฒนธรรมของแท่งเคลื่อนที่ขนาดเล็กผลิตซัลไฟด์ได้สังเกต enrichments ที่ผลิตซัลไฟด์ต่อมาย้ายไปซัลเฟตลดแบคทีเรีย(SRB) กลางที่ประกอบด้วย (น้ำกลั่น L21): 20 กรัมโซเดียมคลอไรด์; 4 กรัม Na2SO4; 3 กรัม MgCl2.6H2O; 0 2 กรัม KH2PO4; 0 5 กรัมโพแทสเซียมคลอไรด์; 0 25 กรัม NH4Cl; 3 46 กรัมท่อ; 0 15 กรัม CaCl2.2H2O; 1 มิลลิกรัมresazurin; 2 มิลลิกรัมโซเดียม tungstate; 0 5 มิลลิกรัมโซเดียม selenate; 1 มิลลิลิตรผสมวิตามิน (Widdel และบาก, 1992); วิตามินบี 1 มล. วิธีการแก้ปัญหา (Widdel และบาก, 1992); และ 0? 05 มก. วิตามินบี 12. ค่า pH ของกลางมีการปรับค่าพีเอช 6 7 ณ ห้องอุณหภูมิใช้5 M HCl หลังจากนึ่งฆ่าเชื้อภายใต้ N2 (100%), ค่า pH ลดลงถึง 6 5 ขนาดกลาง (10 มล.) ได้รับการจ่ายแบบไม่ใช้อากาศใน50 มล. ขวดปิดผนึกด้วย butylrubber stoppers และลดลงด้วย 0 1 มิลลิลิตร 10% (w / v)? Na2S.9H2O โซลูชั่นที่ผ่านการฆ่าเชื้อ; H2 / CO2 (80: 20; 200 ปาสคาล) ถูกนำมาใช้เป็นเฟสก๊าซ วัฒนธรรมถูกบ่มที่ 70 UC ด้วยการเขย่า(150 รอบต่อนาที) ค่า pH ของกลางใน uninoculated ที่ขวดตรวจสอบที่อุณหภูมิห้องหลังจากบ่มที่70 UC ลดลงจาก 6? 5-6? 3. หนึ่งวัฒนธรรมบริสุทธิ์ CIR29812T ความเครียดได้โดยใช้การสั่นของหลอดเจือจาง(Widdel และบาก, 1992) ของ SRB กลางแข็งที่วุ้นก็ถูกแทนที่ด้วย 0 7% (w / v) phytagel (ซิกม่า) หลังจากที่ 6 วันที่ 70 บ่ม UC เรียบสีน้ำตาล, อาณานิคมแกนรูปประมาณ 1 มม
การแปล กรุณารอสักครู่..

ซอนเน่ แฮนเซ่น& ahring , 1999 ) เมื่อเร็ว ๆนี้ใหม่อย่างเคร่งครัด
chemolithoautotrophic เหล็กลดชนิด ' geothermobacterium
ferrireducens ' ถูกแยกจากน้ำพุร้อนที่
อุทยานแห่งชาติเยลโลว์สโตน ( อเมริกา ) สิ่งมีชีวิตนี้แทน
thermodesulfobacteriaceae สมาชิกของครอบครัวที่ไม่สามารถลดซัลเฟต ( kashefi et al . , 2002 ) .
เราอธิบายการแยกและการศึกษาคุณสมบัติของ
ที่นี่นวนิยาย และอีกอย่าง chemolithoautotrophic
ซัลเฟต , ลดแบคทีเรีย ใหม่ที่แยกได้จากตัวอย่างของงาน
สีดำ ผู้รวบรวมที่ระดับความลึกจาก M ที่ kairei ระบายฟิลด์ ( 25u199 S , 70u 029 e )
บนสันเขากลางอินเดีย ( แวนโดเวอร์ et al . , 2001 )
เมษายน 2001 ปล่องชิ้นถูกเก็บรวบรวมโดย
rov เจสันและถูกวางในการแยกภาชนะสำหรับ
การเดินทางไปยังพื้นผิว subsamples ของปล่องชิ้น
มาบดในครกและน้ำที่ถูกเก็บไว้ภายใต้บรรยากาศของไนโตรเจนที่ 4
UC จนใช้เป็นเชื้อ .
enrichments เริ่มต้นทำโดยการใช้ต่อไปนี้ที่อยู่กลาง
( l21 น้ำกลั่น : 29 g NaCl ; 7 g
mgso4.7h2o ; 4 G โซเดียมไฮดรอกไซด์ ; 0 ? 5 กรัม ปริมาณ 2 กรัม na2s2o3.5h2o ;
1 ?66 กรัม mgcl2.6h2o ; 0 ? 4 g cacl2.2h2o ; 0 ? 4 . 2 G ;
0 ? 3 G k2hpo4.3h2o ; และ 10 ml ของธาตุ
โซลูชั่นหุ้นตามบูน et al . ( 1989 ) ( http : / /
สร้างมีเทน . PDX . edu / ocm_media . html ) สื่อ
เตรียมกับซิก และน้ำ ก่อนอัตราส่วนโฟกัส
pH , ค่า pH 6 ที่อุณหภูมิห้อง
กรดกำมะถัน กลางก็จ่ายได้ที่ co2
บรรยากาศใน bellco หลอดและปกคลุมด้วยบิวทัล รับเบอร์
หยุดก่อน หลังจากปลูกเชื้อด้วยสารละลายซัลไฟด์
[ 10% ( v / v ) 3 ] , ท่อ คือแรงดันกับ H2
( 100% ; 138 กิโลปาสคาล ) และอุณหภูมิ 70 UC โดยไม่สั่น
หลังจาก 4 วัน วัฒนธรรมของแท่งเล็กเคลื่อนที่ผลิต
ซัลไฟด์พบ . enrichments ที่ผลิต โดย จัดการโอนให้
ลดแบคทีเรียซัลเฟต( SRB ) สื่อที่ประกอบด้วย ( l21 น้ำกลั่น ) ขนาด 20 g :
4 g na2so4 ; 3 G mgcl2.6h2o ; 0 ? 2 G kh2po4 ; 0 ? 5 g
. ; 0 ? 25 กรัม 4 . ; 3 46 กรัม ท่อ ; 0 ? 15 กรัม cacl2.2h2o 1 มก.
รีซาซูริน 2 มก. โซเดียมทังสเตท ; 0 ? 5 มก. โธ ;
1 วิตามินผสมน้ำ ( widdel &บาค , 1992 ) ; โซลูชั่นวิตามินบี 1
1 ml ( widdel &บาค , 1992 ) ; และ 0 ? 05 mg วิตามิน B12 .
pH ของอาหารที่มีค่า pH 6 7 ที่ห้อง
อุณหภูมิที่ใช้ 5 M HCl . หลังจากอัตราส่วนโฟกัสได้ที่ N2
( 100% ) , pH ลดลงถึง 6 5 . ปานกลาง ( 10 ml ) คือ
จ่ายพในขวด 50 มล. ปิดด้วยจุกและลดลงบิวทัล รับเบอร์
0 ? 1 ml เท่ากับ 10 % ( w / v )
na2s.9h2o สารละลายเป็นหมัน ; H2 / CO2 ( 80 : 20 ; 200 kPa ) คือ
ใช้เป็นก๊าซระยะ วัฒนธรรมที่อุณหภูมิ 70 UC กับ
สั่น ( 150 r.p.m. )pH ของอาหารในการตรวจสอบอุณหภูมิห้องขวด
หลังจากการบ่มที่ 70 UC ลดลงจาก 6 5 กับ 6 3 .
บริสุทธิ์หนึ่งวัฒนธรรม cir29812t ความเครียดได้โดยการเขย่า ( widdel
ใช้หลอด&บาค , 1992 ) ของ SRB
ก้อนวุ้นขนาดกลางที่ถูกแทนที่ด้วย 0 ? 7 % ( w / v )
phytagel ( Sigma ) หลังจากที่ 6 วันบ่มที่ 70 UC , เรียบ ,
สีน้ำตาล
การแปล กรุณารอสักครู่..
