The top LB agarose (0.7%) of 3 mL m

The top LB agarose (0.7%) of 3 mL maintained in molten (47 ํC) condition was added, mixed and poured onto LB agar plates, allowed to set and incubated for 6-8 h at 37 ํC. The phage was recovered by adding 3 mL of SM buffer to each plate and the plates were stored at 4-8 ํC for several hours with gentle shaking on rocking platform to allow bacteriophage to diffuse from the agarose. SM buffer containing phage particles was transferred to a polypropylene tube, 0.2 mL of chloroform was added and again 2 mL of SM buffer was also added. The lysate was drained to recover the maximum phage particles. The mixture was gently vortexed, then centrifuged at 4000 x g for 15 min at 4-8 ํC. The supernatant was aspirated, a drop fo chloroform was added, and the phage suspension was stored at 4-8 ํC. The titres of phage stocks were determined by plaquing 10-fold dilutions by the soft agarose overlay method.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สุดปอนด์ agarose (0.7%) ของ mL 3 ยังคงอยู่ในสภาพที่หลอมละลาย (ํC 47) ถูกเพิ่ม ผสม และ poured บนแผ่น agar ปอนด์ อนุญาตให้การตั้งค่า และ incubated สำหรับ 6-8 h ที่ 37 ํC Phage ถูกกู้คืน ด้วยการเพิ่ม 3 mL ของ SM บัฟเฟอร์แต่ละแผ่น และแผ่นถูกเก็บไว้ที่ 4-8 ํC หลายชั่วโมงด้วยการสั่นเบา ๆ บนแพลตฟอร์มโยกให้แบคทีขจายจากใน agarose บัฟเฟอร์ SM ประกอบด้วย phage อนุภาคถูกถ่ายโอนไปหลอด polypropylene, 0.2 mL ของคลอโรฟอร์มเพิ่ม และอีก 2 mL บัฟเฟอร์ SM ถูกเพิ่ม ที่ lysate นั้นหมดกำลังกู้คืนอนุภาค phage สูงสุด ส่วนผสมถูกเบา ๆ vortexed แล้ว centrifuged ที่ 4000 x g สำหรับ 15 นาทีที่ 4-8 ํC Supernatant ถูก aspirated คลอโรฟอร์มโฟวางเพิ่ม และระงับ phage ถูกเก็บไว้ที่ 4-8 ํC Titres ของ phage หุ้นถูกกำหนด โดย plaquing dilutions 10-fold โดย agarose นุ่มวางทับวิธีการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ด้านบน agarose LB (0.7%) จาก 3 มิลลิลิตรเก็บรักษาไว้ในสภาพที่หลอมเหลว (47 ํ C) ถูกเพิ่มเข้ามาผสมและเทลงบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อ LB ได้รับอนุญาตให้ตั้งและบ่มเป็นเวลา 6-8 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 ํ C ทำลายจุลินทรีย์ที่ได้รับการกู้คืนโดยการเพิ่ม 3 มิลลิลิตรของบัฟเฟอร์เอสเอ็มให้กับแต่ละแผ่นและแผ่นที่ถูกเก็บไว้ที่ 4-8 ํ C เป็นเวลาหลายชั่วโมงกับอ่อนโยนสั่นโยกบนแพลตฟอร์มที่จะช่วยให้ bacteriophage จะกระจายจาก agarose บัฟเฟอร์เอสเอ็มที่มีอนุภาคทำลายจุลินทรีย์ที่ได้รับการถ่ายโอนไปยังท่อโพรพิลีน, 0.2 มิลลิลิตรคลอโรฟอร์มถูกเพิ่มเข้ามาและอีกครั้ง 2 มิลลิลิตรของบัฟเฟอร์ SM ถูกเพิ่มเข้ามานอกจากนี้ยังมี lysate ได้ถูกระบายออกเพื่อกู้คืนอนุภาคทำลายจุลินทรีย์สูงสุด ส่วนผสมที่ได้รับการ vortex เบา ๆ แล้วหมุนเหวี่ยงที่ 4000 xg เป็นเวลา 15 นาทีที่ 4-8 ํ C ใสได้รับการสำลักลดลงสำหรับคลอโรฟอร์มถูกเพิ่มเข้ามาและระงับทำลายจุลินทรีย์ถูกเก็บไว้ที่ 4-8 ํ C ไตเตอร์ของหุ้นฟาจถู​​กกำหนดโดย plaquing เจือจาง 10 เท่าโดยวิธีการซ้อนทับ agarose นุ่ม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ที่โรสปอนด์ด้านบน ( 0.7% ) 3 ml รักษาในหล่อ ( 47 องศาเซลเซียส ) เงื่อนไขเพิ่ม ผสม ราดลงบนจานวุ้นปอนด์ ได้รับอนุญาตให้ตั้งและบ่มที่ 37 ํ C เป็นเวลา 6-8 ชั่วโมงว่าถูกค้นพบโดยการเพิ่ม 3 มล. ของ SM บัฟเฟอร์ แต่ละจาน และจานที่อุณหภูมิ 4-8 องศาเซลเซียส เป็นเวลาหลายชั่วโมง เขย่าโยกอ่อนโยนบนแพลตฟอร์มเพื่อให้โรงพยาบาล เพื่อกระจายจากโรส .SM บัฟเฟอร์ที่มีอนุภาคฟาถูกโอนไปยังท่อโพลีโพรพิลีน 0.2 มิลลิลิตร และคลอโรฟอร์ม ได้เพิ่มอีก 2 ml ของ SM บัฟเฟอร์ก็เพิ่ม การ lysate คือเนื้อกู้สูงสุดว่า อนุภาค ผสมเบา vortexed แล้วระดับ 4000 x G สำหรับ 15 นาทีที่ 4-8 ํ C สูงคือ aspirated หยดสำหรับคลอโรฟอร์มเป็นเพิ่มว่าถูกระงับและเก็บไว้ที่ 4-8 ํ C titres ของเฟจหุ้นถูกกำหนดโดย plaquing 10 วิธีการพับโดยอ่อนซ้อน , วิธีการ