Within the framework of biochemical analyses, the authors determined
enzymatic activity and have chosen chemical properties of soil
samples. Soil sampleswere collected in October 2011 fromthe soil surface
layers (0–25 cm) of the examined objects. The analyzed samples were
the means obtained from 5 samples from each object. The performed
analyses comprised determinations of: organic carbon (ISO 14255),
ammonia nitrogen and nitrate nitrogen (ISO 14255), soil reaction — pH
in H2O and in 1 mol dm−3 KCl (ISO 10390) and activity of soil enzymes
(dehydrogenases, acid phosphatase, urease and protease). Dehydrogenase
activity determination was based on the estimation of 2,3,5-
triphenyltetrasolium chloride (TTC) reduction rate to triphenylformazan
(TPF) in soils after incubation at 30 °C for 24 h as described by
Thalmann (1968). Acid phosphatase activity was assayed as described
by Tabatabai and Bremner (1969) using p-nitrophenyl phosphate
(pNPP, 0.115 M) as the substrate. These assays are based on the release
and detection of p-nitrophenol (pNP). 4 cm3 of 0.1 M MUB (modified
universal buffer) with pH 6.5 and 1 cm3 of substrate were added to 1 g
soil sample and incubated at 37 °C for 1 h. After stopping the reaction
the amount of pNP released by the enzymewas determined spectrophotometrically
at 400 nm. Urease activity was assayed as described by
Zantua and Bremner (1975) using urea as the substrate. After incubation
at 37 °C for 2 h, the N-NH4+ formed was extracted with 1 MKCl and
subsequently measured. Protease activity was assayed as described
by Ladd and Butler (1972) using 2% solution of sodium caseinate in
Tris (hydroxymethyl) buffer with pH 8.1 as the substrate. After incubation
in a water bath at 50 °C for 1 h, the level of activity of the
enzyme is determined according to the amount of amino acids produced
colorimetrically with Folin reagents. Measure the color intensity
in a spectrophotorimeter at wavelength of 700 nm.
Enzyme activities determination was done on fresh, sieved (b2 mm)
soils. Control tests with autoclaved soils were included in all enzyme assays
to evaluate the spontaneous or abiotic transformation of substrates.
The sameprocedureas for theenzymeassaywas followed for the controls
but the substrate was added to soil after incubation and immediately
prior to reaction ending. All determinations were made in triplicate and
the results were corrected for oven-dry (105 °C) moisture content. The
activity of dehydrogenases was given in cm3 H2 necessary to reduce
TTC to TFP (triphenyl phormosan); of phosphatases in mmols of
p–nitrophenol (PNP) produced from sodium 4-nitrophenylphosphate;
urease – in mg N-NH4
+ developed from hydrolyzed urea; proteaseinmg tyrosine developed from sodium caseinate. All assays were prepared
in three replications.
ภายในกรอบการวิเคราะห์เชิงชีวเคมี ผู้เขียนกำหนดกิจกรรมของเอนไซม์ในระบบ และเลือกคุณสมบัติทางเคมีของดินตัวอย่างการ เก็บในเดือน 2011 ตุลาคม sampleswere ดินจากผิวดินชั้น (0-25 ซม.) ของวัตถุกล่าวถึง ตัวอย่างที่วิเคราะห์ได้หมายถึงรับจาก 5 ตัวอย่างจากแต่ละวัตถุ การดำเนินการวิเคราะห์ประกอบด้วย determinations ของ: อินทรีย์คาร์บอน (ISO 14255),ไนโตรเจนแอมโมเนียและไนเตรตไนโตรเจน (ISO 14255), ปฏิกิริยาของดินซึ่งค่า pHและ 1 โมล H2O dm−3 KCl (ISO 10390) และกิจกรรมของเอนไซม์ของดิน(dehydrogenases กรดฟอสฟาเตส ยู กรติเอส) Dehydrogenaseกำหนดกิจกรรมเป็นไปตามการประเมินของ 2,3,5-อัตราลดคลอไรด์ (ทีทีซีจำกัด) triphenyltetrasolium triphenylformazan(TPF) ในดินเนื้อปูนหลังจากบ่มที่ 30 ° C ใน 24 ชมตามที่อธิบายไว้โดยThalmann (1968) กรดฟอสฟาเตสกิจกรรมถูก assayed ดังที่โดย Tabatabai และ Bremner (1969) ใช้ฟอสเฟต p-nitrophenyl(pNPP, 0.115 M) เป็นพื้นผิว Assays เหล่านี้ขึ้นอยู่กับการเปิดตัวและตรวจพบ p-nitrophenol (pNP) 4 cm3 0.1 เมตร MUB (ปรับเปลี่ยนบัฟเฟอร์สากล) มีค่า pH 6.5 และ 1 cm3 ของพื้นผิวถูกเพิ่มให้ 1 gดินชิ้นงานตัวอย่าง และ incubated ที่ 37 ° C สำหรับ 1 h หลังจากหยุดปฏิกิริยายอดของ pNP ออก โดย enzymewas ที่กำหนด spectrophotometricallyที่ 400 nm กิจกรรมยูถูก assayed ตามที่อธิบายไว้โดยZantua และ Bremner (1975) โดยใช้ยูเรียกับพื้นผิว หลังจากบ่มที่ 37 ° C สำหรับ 2 h, N-NH4 + เกิดถูกสกัด ด้วย 1 MKCl และต่อมาวัด กิจกรรมรติเอสถูก assayed ดังที่โดย Ladd และบัตเลอร์ (1972) ใช้โซลูชัน 2% ของโซเดียม caseinate ในบัฟเฟอร์ตรี (hydroxymethyl) มีค่า pH 8.1 เป็นพื้นผิว หลังจากบ่มในอ่างน้ำที่ 50 ° C สำหรับ h 1 ระดับของกิจกรรมของการเอนไซม์จะถูกกำหนดตามจำนวนกรดอะมิโนที่ผลิตcolorimetrically กับ Folin reagents วัดความเข้มของสีใน spectrophotorimeter ที่ความยาวคลื่น 700 nmทำการวัดกิจกรรมของเอนไซม์ในสด sieved (b2 mm)ดินเนื้อปูน ควบคุมการทดสอบดินเนื้อปูน autoclaved รวมอยู่ใน assays เอนไซม์ทั้งหมดเพื่อประเมินการเปลี่ยนแปลงที่อยู่ หรือ abiotic ของพื้นผิวตาม sameprocedureas การ theenzymeassaywas ตัวควบคุมแต่พื้นผิวถูกเพิ่มในดินหลัง จากบ่ม และทันทีก่อนที่จะสิ้นสุดปฏิกิริยา Determinations ทั้งหมดที่เกิดขึ้นใน triplicate และผลลัพธ์ได้แก้ไขสำหรับเตาอบแห้ง (105 ° C) ความชื้นเนื้อหา ที่กิจกรรมของ dehydrogenases ได้รับใน H2 cm3 ต้องลดทีทีซีจำกัดกับ TFP (triphenyl phormosan); ของ phosphatases ใน mmols ของp-nitrophenol (PNP) ผลิตจากโซเดียม 4-nitrophenylphosphateยู – ในมก. N NH4+ พัฒนาจากยูเรีย hydrolyzed proteaseinmg tyrosine พัฒนาจาก caseinate โซเดียม มีเตรียมทั้งหมด assaysในระยะ 3
การแปล กรุณารอสักครู่..

ภายในกรอบของการวิเคราะห์ทางชีวเคมีผู้เขียนกำหนด
กิจกรรมของเอนไซม์และได้เลือกที่คุณสมบัติทางเคมีของดิน
ตัวอย่าง sampleswere ดินที่เก็บรวบรวมในเดือนตุลาคม 2011 fromthe ผิวดิน
ชั้น (0-25 ซม.) ของวัตถุที่ตรวจสอบ ตัวอย่างการวิเคราะห์เป็น
วิธีที่ได้รับจาก 5 ตัวอย่างจากแต่ละวัตถุ ดำเนินการ
วิเคราะห์หาความประกอบด้วยอินทรีย์คาร์บอน (ISO 14255),
แอมโมเนียไนโตรเจนและไนโตรเจนไนเตรต (ISO 14255) ปฏิกิริยาดิน - ด่าง
ใน H2O และใน 1 mol DM-3 KCl (ISO 10390) และการทำงานของเอนไซม์ดิน
(dehydrogenases, phosphatase กรดยูรีเอสและโปรติเอส) dehydrogenase
การกำหนดกิจกรรมที่อยู่บนพื้นฐานของการประมาณ 2,3,5-
triphenyltetrasolium คลอไรด์ (TTC) อัตราการลด triphenylformazan
(TPF) ในดินหลังจากบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงตามที่อธิบายไว้โดย
Thalmann (1968) กิจกรรม phosphatase กรดได้รับการวิเคราะห์ตามที่อธิบายไว้
โดย Tabatabai และ Bremner (1969) โดยใช้ P-nitrophenyl ฟอสเฟต
(pNPP, 0.115 M) เป็นสารตั้งต้น การตรวจเหล่านี้จะขึ้นอยู่กับการเปิดตัว
และการตรวจสอบของ P-nitrophenol (PnP) 4 cm3 0.1 M MUB (แก้ไข
บัฟเฟอร์สากล) ที่มีค่า pH 6.5 และ 1 cm3 ของพื้นผิวถูกเพิ่มเข้าไป 1 กรัม
ตัวอย่างดินและบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง หลังจากที่หยุดปฏิกิริยา
ปริมาณของ PNP ปล่อยออกมาจาก enzymewas กำหนด spectrophotometrically
ที่ 400 นาโนเมตร กิจกรรม urease ได้รับการวิเคราะห์ตามที่อธิบายไว้โดย
Zantua และ Bremner (1975) โดยใช้ปุ๋ยยูเรียเป็นสารตั้งต้น หลังจากการบ่ม
ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2 ชั่วโมง, N-NH4 + ที่เกิดขึ้นถูกสกัดด้วย 1 MKCl และ
วัดต่อมา กิจกรรมโปรติเอสได้รับการวิเคราะห์ตามที่อธิบายไว้
โดยแลดด์และบัตเลอร์ (1972) โดยใช้วิธีการแก้ปัญหา 2% ของโซเดียมเคซีเนตใน
Tris (hydroxymethyl) บัฟเฟอร์ที่มีค่า pH 8.1 เป็นสารตั้งต้น หลังจากการบ่ม
ในอ่างน้ำที่ 50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง, ระดับของกิจกรรมของ
เอนไซม์จะถูกกำหนดตามปริมาณของกรดอะมิโนที่ผลิต
colorimetrically กับน้ำยา Folin การวัดความเข้มของสี
ใน spectrophotorimeter ที่ความยาวคลื่น 700 นาโนเมตร.
การกำหนดกิจกรรมของเอนไซม์ที่ทำสดใหม่, ร่อน (b2 มม)
ดิน การทดสอบการควบคุมด้วยอิฐดินถูกรวมอยู่ในสมรรถนะของเอนไซม์ทั้งหมด
เพื่อประเมินการเปลี่ยนแปลงที่เกิดขึ้นเองหรือ abiotic ของพื้นผิว.
sameprocedureas สำหรับ theenzymeassaywas ตามการควบคุม
แต่พื้นผิวที่ถูกเพิ่มเข้ามาในดินหลังจากบ่มและทันที
ก่อนที่จะมีปฏิกิริยาสิ้นสุด การตรวจวัดทั้งหมดได้ทำในเพิ่มขึ้นสามเท่าและ
ผลการได้รับการแก้ไขสำหรับเตาอบแห้ง (105 ° C) ความชื้น
กิจกรรมของ dehydrogenases ได้รับใน cm3 H2 จำเป็นต้องลด
TTC จะ TFP (Triphenyl phormosan); ของ phosphatases ใน mmols ของ
P-nitrophenol (PNP) ผลิตจากโซเดียม 4 nitrophenylphosphate;
urease - ในมก. N-NH4
+ พัฒนามาจากยูเรียไฮโดรไลซ์; proteaseinmg ซายน์ที่พัฒนามาจากโซเดียมเคซีเนต การตรวจทั้งหมดถูกจัดทำขึ้น
ในสามซ้ำ
การแปล กรุณารอสักครู่..
