Strain suspensions in phosphate buffered saline (PBS) (Sigma
Aldrich, Brøndby, Denmark) were adjusted to an optical density of
0.220 at 600 nm (OD600). One ml of this suspensionwas inoculated
into 9 ml of MRS broth and incubated at 37 C. After 12 h, 24 h, 36 h,
48 h, 72 h and six days of incubation, the probiotic cultures were
centrifuged at 4000 g for 10 min and the supernatantwas collected,
filter-sterilized using a 0.2 mm membrane syringe filter (Fisher
Scientific, Slangerup, Denmark) and divided into two aliquots, one
of which was neutralized to pH 7.0 using 5mMNaOH. Both aliquots
were checked for absence of viable cells by plating on trypticase soy
agar (Oxoid) supplemented with 5% bovine blood (Oxoid) and then
frozen at 80 C for later use
สายพันธุ์ที่แขวนลอยในฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ ( PBS ) ( Sigma
Aldrich br ขึ้น ndby , เดนมาร์ก ) ปรับให้มีความหนาแน่นของ Optical
0.220 ที่ 600 nm ( od600 ) หนึ่งมิลลิลิตร เชื้อนี้ suspensionwas
9 ml ของ MRS broth บ่มที่ 37 C หลังจาก 12 ชั่วโมง , 24 ชั่วโมง , 36 H ,
48 ชั่วโมงและ 72 ชั่วโมง 6 วัน 1 , โปรไบโอติก คือวัฒนธรรม
ระดับ 4000 กรัม 10 นาทีและ supernatantwas รวบรวม
กรองฆ่าเชื้อโดยใช้เยื่อกรอง 0.2 มม. เข็ม ( Fisher
ทางวิทยาศาสตร์ slangerup , เดนมาร์ก ) และแบ่งออกเป็นสองส่วนที่หารลงตัว หนึ่ง
ที่เป็นกลาง pH 7.0 ใช้ 5mmnaoh . ทั้งเฉยๆ
ถูกตรวจสอบการวางเซลล์ โดยชุบบน trypticase ถั่วเหลือง
( oxoid ) เสริมด้วย 5 % เลือดวัว ( oxoid ) แล้ว
แช่แข็ง 80 C สำหรับใช้ในภายหลัง
การแปล กรุณารอสักครู่..