Mitochondrial DNA amplification and

Mitochondrial DNA amplification and sequencing
We used primers L14910 (50-GAC CTG TGA TMT GAA AAA CCA
YCG TTG T-30) (de Queiroz et al., 2002) and H16064 (50-CTT TGG
TTT ACA AGA ACA ATG CTT TA-30) (Burbrink et al., 2000) to amplify
the cytochrome b gene. Mitochondrial DNA was amplified from
template DNA in 100 ll reactions using a hot-start method in a
thermal cycler with a 7-min denaturing step at 94 C followed by
40 cycles of denaturing for 40 s at 94 C, primer annealing for
30 s at 46 C and elongation for one min at 72 C with a final
7-min elongation step at 72 C. Cycle sequencing was conducted
with primer L14919 (Burbrink et al., 2000), L15584 (de Queiroz
et al., 2002), H15149 (Kocher et al., 1989), and H15715 (Slowinski
and Lawson, 2005

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ขยายยลดีเอ็นเอและลำดับเราใช้ไพรเมอร์ L14910 (50 GAC CTG TGA TMT GAA AAA CCA YCG TTG T-30) (de Queiroz et al., 2002) และ H16064 (50 CTT TGG TTT ACA AGA ACA ATG CTT TA-30 ) (Burbrink et al., 2000) เพื่อขยายcytochrome ขยีน ยลดีเอ็นเอถูกขยายจากดีเอ็นเอแม่แบบใน 100 ปฏิกิริยา ll จะใช้วิธีการเริ่มร้อนใน Cycler ความร้อนกับ 7 นาทีขั้นตอน denaturing ที่ 94 องศาเซลเซียสตามด้วย40 รอบของ denaturing 40 s ที่ 94 องศาเซลเซียส, หลอมไพรเมอร์สำหรับ30 s ที่ 46 องศาเซลเซียสและการยืดตัวเป็นเวลาหนึ่งนาทีที่ 72 องศาเซลเซียสเป็นครั้งสุดท้ายที่มีขั้นตอนการยืดตัว7 นาทีที่ 72 องศาเซลเซียส ลำดับวงจรได้ดำเนินการกับไพรเมอร์ L14919 (Burbrink et al., 2000) L15584 (เด Queiroz et al., 2002) H15149 (Kocher et al., 1989) และ H15715 (Slowinski และลอว์สัน, 2005

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เราเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอ และการใช้ไพรเมอร์ l14910 ( 50-gac CTG TGA TMT GAA AAA CCA
ycg ทีทีจีลบ 30 ) ( เดอ เคยรอซ et al . , 2002 ) และ h16064 ( 50-ctt tgg
TTT ACA AGA ACA ATG ta-30 CTT ) ( burbrink et al . , 2000 ) เพื่อขยาย
- B ยีน ยลดีเอ็นเอ amplified DNA ต้นแบบจาก
100 จะปฏิกิริยาโดยใช้วิธีเริ่มร้อนใน
Thermal cycler กับ 7-min ี่ขั้นตอนที่ 94  C ตามด้วย
40 รอบี่ 40 s ที่ 94  C , รองพื้นอ่อนสำหรับ
30 วินาทีที่ 46  C และยืดตัวหนึ่ง นาทีที่ 72  C สุดท้าย
7-min ยืดขั้นตอนที่ 72  C วงจรการศึกษาด้วยไพรเมอร์ l14919
( burbrink et al . , 2000 ) l15584 ( เดอ เคยรอซ
et al . , 2002 ) , h15149 ( โคเชอร์ et al . , 1989 ) และ h15715 ( slowinski
กับลอว์สัน2005