The PCR was performed in 50 ml reac

The PCR was performed in 50 ml reaction mixtures
containing 5 ml of 10 PCR buffer (Amersham Pharmacia
Biotech, Uppsala, Sweden), 0.2 mmol l
1 of
each of the four dNTP (Amersham Pharmacia Biotech),
2 mmol l
1 MgCl2, 0.5 mmol l
1 of each primer, 1%
(v/v) for mamide, 2.5 U of Taq polymerase (Amersham
Pharmacia Biotech), and 1 ml of the lysed cells. For
LAB, two primers were used: a fluorescein labelled
forward primer Cy5-16S-1500F; 5VAAG TCC TAA
CAA GGT A-3V (50 pmol/ml) and a reverse primer
23S-30R; 5VGCC ARG GCA TGG ACC-3V(50 pmol/
ml). Similarly, for yeasts, two primers were used: a
fluorescein labelled CY5-Y-ITS-1F forward primer;
5VTCC GTA GGT GAA CCT GCG G-3V(50 pmol/ml)
and a reverse primer Y-ITS-4R; 5VTCCTCCGCT TAT
TGA TAT GC-3V (50 pmol/ml) (T-A-G Copenhagen
APS, Denmark). The PCR-reaction was performed in
a thermocycler (TRIO-Thermoblockk, Biometra,
Go¨ttingen, Germany) with heated lid (TRIO Heated
Lid, Biometra).
PCR conditions were for LAB an initial step of 94

C for 5 min, followed by amplification using the
following thermal profile: 10 cycles of 94, 48 and 72

C each for 30 s, 25 cycles of 94, 55 and 72
C each
for 30 s. Finally, the mixture was heated at 72
C for 7
min and subsequently cooled to 4
C until use.
PCR conditions were for yeasts an initial denaturation
step of 95
C for 5 min, followed by a total of
35 cycles of amplification using the thermal profile:
95, 55 and 72
C each for 30 s. Finally the mixture
was heated at 72
C for 7 min and subsequently
cooled to 4
C for up to 24 h.
2.6. Electrophoresis
Fragments amplified by the PCR reaction were
separated by gel electrophoresis on the automatic
DNA sequencer, ALFexpress (Amersham Pharmacia
Biotech). The electrophoresis was carried out on a
denaturing polyacrylamide gel composed of 6% Long
Ranger (FMC, Vallensbæk Strand, Denmark), 7 mol
l
1 urea and 0.6 TBE (1 M Tris-base, 0.83 M
Boric acid and 10 mM EDTA, Amersham Pharmacia
Biotech) and were cast with 0.3 mm spacers. The PCR
products were mixed with an equal volume of loading
dye (Amersham Pharmacia Biotech), denatured at
94
C for 2 min. A size marker, Cy5 sizer 50–500
(Amersham Pharmacia Biotech) was included. The
electrophoresis conditions were 700 V, 60 mA at
55
C for 200 min with 0.6 TBE as the running
buffer. Peak positions and intensity of the separated
ITS fragments were analysed by use of the computer
program Fragment Manager (Amersham Pharmacia
Biotech). Isolates with the same profiles of ITS fragments
were grouped manually.
2.7. Sequencing of 16S rRNA genes
DNA was extracted as described for the ITS
amplification (see above) and used for amplification
of a part of the 16S rRNA gene from basepair 968–
1401. The PCR reaction was performed in a total
volume of 100 ml containing five-unit Taq-Polymerase
(Amersham Pharmacia Biotech), 10 ml of 10 PCR
buffer, 0.2 mM dNTP mix, 1.5 mM MgCl2 and 40
pmol of each the primers: 968F (5V-GAACGCGAAGAACCTTAC-
3V) and 1401R (5V-GCGTGTGTACAAGACCC-
3V). PCR conditions were 94
C for 3
min followed by 30 cycles of 94
C for 30 s, 56
C for
30 s, 72
C for 60 s, and finally an elongation step of
72
C for 7 min. The amplified PCR fragments were
purified with a QIAquick PCR purification kit (QIAGEN,
Hilden, Germany). The sequence reaction was
performed in both directions with Cy5 market primers,
Cy5-968 and Cy5-1372, by a Thermosequanase
fluorescent labelled primer cycle sequencing kit
(Amersham Pharmacia Biotech) following the instructions
given by the manufacturer. Fragments were
separated by gel electrophoresis on the automatic
DNA sequencer, ALFexpress (Amersham Pharmacia
Biotech). Searches for 16S rRNA sequences were
performed in the GenBank database by BLAST at
NCBI (www.ncbi.nlm.nih.gov).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ดำเนินการใน 50 มล.ผสมปฏิกิริยาการ PCRประกอบด้วย 5 ml ของ PCR บัฟเฟอร์ 10 (ฟาร์ Amershamเทคโนโลยีชีวภาพ อุปซาลา สวีเดน), 0.2 โมล l 1แต่ละ dNTP สี่ (Amersham ฟาร์ไบโอเทค),2 mmol l 1 0.5 mmol l 1 ของแต่ละสีรองพื้น 1%, MgCl2(v/v) สำหรับพอลิเมอเรส U Taq 2.5 (Amersham, mamideเทคโนโลยีชีวภาพฟาร์), และ 1 มิลลิลิตรของเซลล์ lysed สำหรับห้องปฏิบัติการ ใช้ไพรเมอร์สอง: fluorescein ที่มีป้ายรองพื้นไปข้างหน้า Cy5 16S 1500F ท่า TCC 5VAAGCAA GGT A-3V (50 pmol/มิลลิลิตร) และรองพื้นย้อนกลับ23S 30R 5VGCC อาร์กิวเมนต์ของค่า GCA TGG ACC-3V(50 pmol/มิลลิลิตร) . ในทำนองเดียวกัน สำหรับยีสต์ ไพรเมอร์สองใช้: มีมีป้าย fluorescein CY5-Y-ของชั้น 1 พื้นไปข้างหน้า5VTCC GTA GGT ไหว้ CCT GCG G-3V(50 pmol/ml)และรองพื้น Y-มันเป็น-4R ย้อนกลับ ททท. 5VTCCTCCGCTTGA ตาด GC-3V (50 pmol มล) (T-A-G โคเปนเฮเกนAPS เดนมาร์ก) ดำเนินการในปฏิกิริยา PCRthermocycler (TRIO Thermoblockk, BiometraGo¨ttingen เยอรมนี) พร้อมฝาปิดเครื่องทำความร้อน (TRIO Heatedฝา Biometra)ได้สภาวะ PCR สำหรับห้องปฏิบัติการเป็นขั้นตอนแรกของ 94C 5 นาที ตาม ด้วยการใช้ขยายตัวต่อความร้อนโปรไฟล์: รอบ 10 94, 48 และ 72C ละ 30 s, 94, 55 และ 72 C ละ 25 รอบ30 s ในที่สุด ส่วนผสมถูกความร้อน 72 c เป็นเวลา 7นาที และเย็นในเวลาต่อมาที่ 4 C จนกว่าจะใช้ได้สภาวะ PCR สำหรับยีสต์แปรสภาพเป็นต้นขั้นตอนของ 95 C 5 นาที ตาม ด้วยทั้งหมดรอบ 35 ของขยายโดยใช้ส่วนกำหนดค่าความร้อน:95, 55 และ 72 C ละ 30 s ในที่สุดส่วนผสมถูกความร้อนที่ 72 C 7 นาที และต่อมาเย็นที่ 4 C เป็นเวลานานถึง 24 ชม2.6. อิมีชิ้นส่วนที่ถูกขยาย โดยปฏิกิริยา PCRคั่น ด้วยอิเจบนอัตโนมัติดีเอ็นเอซีเควนเซอร์ ALFexpress (ฟาร์ Amershamเทคโนโลยีชีวภาพ) อิที่ดำเนินการในการตรวจสอบวิเคราะห์ denaturing ประกอบด้วย 6% นานเรนเจอร์ (ตัว Vallensbæk Strand เดนมาร์ก), 7 โมลยูเรีย l 1 และ 0.6 TBE (1 M ทริฐาน 0.83 เมตรเป็นกรดและ 10 มม. EDTA ฟาร์ Amershamไบโอเทค) และถูกโยนกับแหวน 0.3 mm การ PCRผลิตภัณฑ์ถูกผสมกับปริมาณโหลดเท่ากับเอทิลแอลกอฮอล์ที่ย้อมสี (Amersham ฟาร์ไบโอเทค),C 94 สำหรับ 2 นาที เครื่องหมายขนาด Cy5 ขนาด 50 – 500(Amersham ฟาร์ไบโอเทค) มาพร้อม การเงื่อนไขอิถูก 700 V, 60 mA ที่55 C 200 นาทีกับ TBE 0.6 เป็นการทำงานบัฟเฟอร์ ตำแหน่งสูงสุดและความเข้มของการแยกชิ้นส่วนถูกนำมาวิเคราะห์ โดยใช้คอมพิวเตอร์โปรแกรมผู้จัดการส่วน (ฟาร์ Amershamเทคโนโลยีชีวภาพ) แยกกับโพรไฟล์เดียวกันของชิ้นส่วนถูกจัดกลุ่มด้วยตนเอง2.7. จัดลำดับของยีน 16S rRNAดีเอ็นเอที่ถูกแยกไว้สำหรับของขยาย (ดูข้างต้น) และใช้สำหรับขยายส่วนของยีนใน rRNA 16S จาก basepair 968 –1401. ปฏิกิริยา PCR ได้ดำเนินการในทั้งหมดปริมาณ 100 มล.ประกอบด้วยห้าหน่วย Taq-พอลิเมอเรส(Amersham ฟาร์ไบโอเทค), 10 ml ของ 10 PCRบัฟเฟอร์ ผสม dNTP 0.2 mM, 1.5 มม. MgCl2 และ 40pmol ของแต่ละที่ไพรเมอร์: 968F (5V - GAACGCGAAGAACCTTAC -3V) และ 1401R (5V - GCGTGTGTACAAGACCC -3V) . เงื่อนไข PCR ถูก 94 C 3นาทีตาม ด้วย 94 C รอบ 30 30 s, C 56 สำหรับs, C 72 60 30 s และในที่สุดขั้นตอนการยืดตัวของC 72 7 นาที ส่วน PCR ที่ขยายได้บริสุทธิ์ ด้วยชุดฟอก QIAquick PCR (QIAGENHilden เยอรมนี) ปฏิกิริยาลำดับดำเนินการในทั้งสองทิศทางกับตลาด Cy5 ไพรเมอร์Cy5-968 และ Cy5-1372 โดย Thermosequanaseรองพื้นติดป้ายเรืองแสงรอบลำดับชุด(Amersham ฟาร์ไบโอเทค) ตามคำแนะนำกำหนด โดยผู้ผลิต มีเศษคั่น ด้วยอิเจบนอัตโนมัติดีเอ็นเอซีเควนเซอร์ ALFexpress (ฟาร์ Amershamเทคโนโลยีชีวภาพ) ค้นหา 16S rRNA ที่ถูกลำดับดำเนินการในฐานข้อมูลโดยระเบิดที่ GenBankNCBI (www.ncbi.nlm.nih.gov)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

PCR ที่ได้ดำเนินการใน 50 มล. ผสมปฏิกิริยา
ที่มีขนาด 5 ml 10? PCR บัฟเฟอร์ (Amersham Pharmacia
ไบโอเทค, Uppsala, สวีเดน) 0.2 มิลลิโมลต่อลิตร? 1 ของ
แต่ละสี่ dNTP (Amersham Pharmacia ไบโอเทค)
2 มิลลิโมลต่อลิตร? 1 MgCl2, 0.5 มิลลิโมลต่อลิตร? 1 ของแต่ละไพรเมอร์, 1%
(v / v) สำหรับ mamide 2.5 U ของ Taq โพลิเมอร์ (Amersham
Pharmacia ไบโอเทค) และ 1 มิลลิลิตรของเซลล์ lysed สำหรับ
ห้องปฏิบัติการทั้งสองถูกนำมาใช้ไพรเมอร์: การติดป้ายชื่อ fluorescein
ไพรเมอร์ไปข้างหน้า Cy5-16S-1500F; 5VAAG TCC TAA
CAA GGT A-3V (50 pmol / ml) และไพรเมอร์กลับ
23S-30R; 5VGCC หาเรื่อง GCA TGG ACC-3V (50 pmol /
ml) ในทำนองเดียวกันสำหรับยีสต์สองไพรเมอร์ถูกนำมาใช้ก
fluorescein ที่มีป้ายกำกับ CY5-Y-ITS-1F ไปข้างหน้าไพรเมอร์;
5VTCC GTA GGT GAA CCT GCG G-3V (50 pmol / ml)
และไพรเมอร์กลับ Y-ITS-4R; 5VTCCTCCGCT ททท
TGA ททท GC-3V (50 pmol / ml) (TAG โคเปนเฮเกน
APS, เดนมาร์ก) PCR-ปฏิกิริยาถูกดำเนินการใน
thermocycler (TRIO-Thermoblockk, Biometra,
Göttingen, เยอรมนี) ที่มีฝาปิดอุ่น (TRIO ร้อน
ฝา Biometra).
เงื่อนไข PCR ได้สำหรับห้องปฏิบัติการเป็นขั้นตอนเริ่มต้นของ 94
องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาทีตาม โดยใช้เครื่องขยายเสียงโดยใช้
รายละเอียดดังต่อไปนี้ความร้อน: 10 รอบของ 94, 48 และ 72
องศาเซลเซียสละ 30 s 25 รอบของ 94, 55 และ 72 C แต่ละ
เป็นเวลา 30 วินาที สุดท้ายส่วนผสมที่ถูกความร้อนที่อุณหภูมิ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7
นาทีและต่อมาเย็นถึง 4 องศาเซลเซียสจนถึงการใช้งาน.
เงื่อนไข PCR ได้สำหรับยีสต์เริ่มต้น denaturation
ขั้นตอนของ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาทีตามด้วยรวมเป็น
35 รอบของการขยายการใช้ รายละเอียดของการระบายความร้อน:
95, 55 และ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 แต่ละ s? สุดท้ายส่วนผสม
ที่ถูกความร้อนที่ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7 นาทีและต่อมา
เย็นถึง 4 องศาเซลเซียสได้นานถึง 24 ชม.
2.6 อิเล็ก
เศษขยายโดยปฏิกิริยา PCR ถูก
แยกจากกันโดย gel electrophoresis บนอัตโนมัติ
ซีเควนดีเอ็นเอ ALFexpress (Amersham Pharmacia
ไบโอเทค) electrophoresis ได้ดำเนินการใน
เจลอะคริเลต denaturing ประกอบด้วย 6% ยาว
แรนเจอร์ (เอฟเอ็ม, Vallensbæk Strand, เดนมาร์ก) 7 mol
L? 1 ยูเรียและ 0.6? TBE (1 M Tris ฐาน 0.83 M
กรดบอริกและ 10 มิลลิ EDTA, Amersham Pharmacia
ไบโอเทค) และถูกโยนกับ spacers 0.3 มิลลิเมตร PCR
ผลิตภัณฑ์ได้รับการผสมกับปริมาตรที่เท่ากันของการโหลด
ย้อม (Amersham Pharmacia ไบโอเทค), เอทิลแอลกอฮอล์ที่
94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2 นาที ป้ายขนาด Cy5 sizer 50-500
(Amersham Pharmacia ไบโอเทค) ถูกรวม
เงื่อนไข electrophoresis 700 V, 60 mA ที่
55? C เป็นเวลา 200 นาทีกับ 0.6? TBE เป็นที่ทำงาน
บัฟเฟอร์ ตำแหน่งสูงสุดและความเข้มของการแยก
ชิ้นส่วนที่ได้รับการวิเคราะห์โดยใช้คอมพิวเตอร์
โปรแกรมจัดการ Fragment (Amersham Pharmacia
ไบโอเทค) แยกกับโปรไฟล์เดียวกันของเศษ ITS
ถูกแบ่งด้วยตนเอง.
2.7 การเรียงลำดับของยีน 16S rRNA
ดีเอ็นเอถูกสกัดตามที่อธิบายไว้สำหรับ ITS
ขยาย (ดูด้านบน) และนำมาใช้สำหรับการขยาย
ส่วนหนึ่งของการแสดงออกของยีน 16S rRNA จาก basepair 968-
1401 ปฏิกิริยา PCR ที่ได้ดำเนินการในจำนวน
ปริมาณ 100 มล. มีห้าหน่วย Taq-Polymerase
(Amersham Pharmacia ไบโอเทค), 10 มล. 10? PCR
บัฟเฟอร์ 0.2 มิลลิผสม dNTP 1.5 มิลลิ MgCl2 และ 40
pmol ของแต่ละไพรเมอร์: 968F (5V-GAACGCGAAGAACCTTAC-
3V) และ 1401R (5V-GCGTGTGTACAAGACCC-
3V) เงื่อนไข PCR เป็น 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3
นาทีตามด้วย 30 รอบจาก 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาที 56? C เป็นเวลา
30 วินาที 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 วินาทีและในที่สุดก็เป็นขั้นตอนการยืดตัวของ
72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7 นาที ชิ้นดีเอ็นเอ PCR ถูก
บริสุทธิ์กับชุดฟอก QIAquick PCR (QIAGEN,
ฮิลเดน, เยอรมนี) ปฏิกิริยาลำดับได้รับการ
ดำเนินการในทั้งสองทิศทางกับไพรเมอร์ตลาด Cy5,
Cy5-968 และ Cy5-1372 โดย Thermosequanase
ชุดเรืองแสงที่มีป้ายกำกับรอบไพรเมอร์ลำดับ
(Amersham Pharmacia ไบโอเทค) ตามคำแนะนำที่
กำหนดโดยผู้ผลิต ชิ้นส่วนที่ถูก
แยกจากกันโดย gel electrophoresis บนอัตโนมัติ
ซีเควนดีเอ็นเอ ALFexpress (Amersham Pharmacia
ไบโอเทค) ค้นหาสำหรับลำดับ 16S rRNA ถูก
ดำเนินการในฐานข้อมูลของ GenBank ระเบิดที่
NCBI (www.ncbi.nlm.nih.gov)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ร่วมแสดงในปฏิกิริยาผสม 50 มิลลิลิตรประกอบด้วย 5 มิลลิลิตร ( 10 ) ที่มุ่งมั่น กันชนเทคโนโลยีชีวภาพ อุปซอลา , สวีเดน ) 0.2 มิลลิโมล L 1 แห่งแต่ละสี่ dntp ( ที่มุ่งมั่น ไบโอเทค )2 mmol l 1 ชุด , 0.5 มิลลิโมลชั้น 1 ของแต่ละคู่ , % 1( v / v ) mamide 2.5 U ของทัค พอลิเมอเรส ( ชามมุ่งมั่นพัฒนา ) และ 1 มิลลิลิตรของ lysed เซลล์ สำหรับแล็บ 2 ไพรเมอร์ใช้ : ี่ติดป้ายcy5-16s-1500f 5vaag ทีซีซี ทารองพื้นไปข้างหน้าcaa GGT a-3v ( 50 pmol / มิลลิลิตร ) และแบบไพรเมอร์23s-30r ; 5vgcc arg GCA tgg acc-3v ( 50 pmol /มิลลิลิตร ) ในทำนองเดียวกันสำหรับยีสต์ สองชนิดที่ใช้ :ี่ติดป้าย cy5-y-its-1f ไปข้างหน้า ไพรเมอร์5vtcc GTA GGT GAA CCT gcg g-3v ( 50 pmol / ml )และรองพื้น y-its-4r ย้อนกลับ ; 5vtcctccgct ททท.ด้วย ททท. gc-3v ( 50 pmol / ml ) ( t-a-g โคเปนเฮเกนAPS , เดนมาร์ก ) ร่วมแสดงในปฏิกิริยาเป็นเทอมอไซเคล ์ ( สาม thermoblockk biometra , ,ไปตั้ง ttingen , เยอรมนี ) พร้อมฝาอุ่น ( อุ่น ทรีโอฝา biometra )โดยมีเงื่อนไขการทดลองเริ่มต้นขั้นตอนของ 94C เป็นเวลา 5 นาที ตามด้วยการเพิ่มจำนวนตามโปรไฟล์ร้อน : 10 รอบ 94 , 48 และ 72C แต่ละ 30 , 25 รอบ 94 , 55 และ 72 C แต่ละ30 . ในที่สุด ส่วนผสมจะให้ความร้อนที่ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7นาทีต่อมาเย็น 4 C จนใช้เงื่อนไขสำหรับการเริ่มต้น ( เชื้อยีสต์ขั้นตอนของ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที ตามด้วย รวม35 รอบแบบใช้ความร้อน : รายละเอียด95 , 55 และ 72 C ละ 30 วินาทีสุดท้ายผสมให้ความร้อนที่ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7 นาที และในภายหลังเย็น 4 องศาเซลเซียส นานถึง 24 ชั่วโมง2.6 อิเล็กโตรโฟรีซิสเศษโดยขยายการตรวจปฏิกิริยาคือแยกด้วยเจลบนอัตโนมัติลำดับของดีเอ็นเอ alfexpress ฟาร์มาเซีย ( ชามเทคโนโลยีชีวภาพ ) ที่ได้ดำเนินการในอิเลคโตรโฟเรซีสอะคริลาไมด์เจลี่ประกอบด้วย 6 % นานเรนเจอร์ ( FMC vallensb æ K , สาระ , เดนมาร์ก ) , 7 โมลชั้น 1 และยูเรีย 0.6 ทีบี ( 1 เมตร โดยฐาน 0.83 ม.กรดและ 10 mM EDTA ที่มุ่งมั่น ,เทคโนโลยีชีวภาพ ) และหล่อด้วย 0.3 มม. spacers . pcrผลิตภัณฑ์ผสมที่มีปริมาณเท่ากันของโหลดสี ( ที่ใช้เทคโนโลยีชีวภาพที่มุ่งมั่น )94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2 นาที ขนาดเครื่องหมาย cy5 sizer 50 - 500( ที่มุ่งมั่น ไบโอเทค ) รวม ที่เงื่อนไข electrophoresis คือ 700 V 60 มา ที่55 C 200 นาที 0.6 ทีบีเป็นวิ่งบัฟเฟอร์ ตำแหน่งสูงสุดและความเข้มของการแยกเศษ วิเคราะห์ข้อมูลโดย ใช้คอมพิวเตอร์โปรแกรมส่วนผู้จัดการ ( ที่มุ่งมั่นเทคโนโลยีชีวภาพ ) ไอโซเลตที่มีโปรไฟล์ของชิ้นส่วนของมันเหมือนกันถูกจัดกลุ่มด้วยตนเอง2.7 . การหาลำดับเบสของยีน 16S rRNAดีเอ็นเอตามที่อธิบายไว้สำหรับของ( ( ดูข้างต้น ) และใช้สำหรับการขยายในส่วนของ 16S rRNA ยีนจาก basepair 968 –1401 . การตรวจปฏิกิริยาแสดงในทั้งหมดปริมาณ 100 มิลลิลิตรที่ประกอบด้วยห้าหน่วยการทัค( ที่มุ่งมั่น ไบโอเทค ) 10 ml 10 ดีเอ็นเอบัฟเฟอร์ ผสม dntp 0.2 มม. และ 1.5 มม. ชุด 40pmol ของแต่ละชนิด : 968f ( 5v-gaacgcgaagaaccttac -1401r ( 5v-gcgtgtgtacaagaccc - 3V ) และ3V ) โดยมีเงื่อนไข 3 94 องศาเซลเซียสนาทีตามด้วย 30 รอบ 94 เป็นเวลา 30 วินาที กับ 56 องศาเซลเซียส30 , 72 C 60 , และสุดท้ายการก้าวของ72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7 นาที ซึ่งได้ทำการแตกบริสุทธิ์ด้วย qiaquick PCR ( เพิ่มชุด , บำบัดน้ำเสียฮิลเดน , เยอรมนี ) ลำดับของปฏิกิริยา คือดำเนินการในทั้งสองทิศทาง กับ cy5 ตลาดไพรเมอร์ ,และ cy5-968 cy5-1372 โดย thermosequanaseเรืองแสงป้ายรองพื้นรอบลำดับชุด( ที่มุ่งมั่นพัฒนา ) ตามคําแนะนําที่กำหนดโดยผู้ผลิต ชิ้นส่วนถูกแยกด้วยเจลบนอัตโนมัติลำดับของดีเอ็นเอ alfexpress ฟาร์มาเซีย ( ชามเทคโนโลยีชีวภาพ ) ค้นหาเบส 16S rRNA ลำดับคือดำเนินการในฐานข้อมูล โดยระเบิดที่พบncbi ( www.ncbi . nlm . NIH . gov )