2.3. Determination of vitamin B12 a

2.3. Determination of vitamin B12 and metabolites
Vitamin B12 was detected by a microbiological assay described and
modified by Denter and Bisping (1994) andHPLCmethodwas reported
previously (Gauch et al., 1992). All of the chromatographic separations
were carried out at roomtemperature. A flow of 0.5mL per min, methanol
with 0.1% formic acid (A) (Merck, Darmstadt, Germany) and ultra
purified water with 0.1% formic acid (B), which were degassed by an
ultrasonic water bath (Sonorex TK 52, ultrasonic water bath, Bandelin
electronics, Berlin, Germany), were used as mobile phases and the gradient
elution was programmed as follows: 0–2 min 20% A; 2–3 min
20–25% A; 3–11 min 25–35% A; 11–19 min 35–20% A; 20–22 min
100–100% A; 22–26 min 100–20% A; and 26–36 min 20% A. The injection
volume was 100 μL and the column eluatewas monitored by Diode Array
Detector (Waters, US) at 361 nm.
Metabolites were detected throughHPLC (Waters E2695, US) with an
organic acid column (850 BP-OA H+, 300 ∗ 7.8 mm, Benson Polymeric,
Sparks, USA) as a solid phase. All of the chromatographic separations
were carried out at 60 °C. A flow of 0.6 mL per min with 26 mM sulfuric
acid was used as mobile phase. The injection volume was 10 μL and the
columneluate wasmonitored by Lachrom RI Detector. 1mL of fermentation
liquidwas centrifuged for 10 min at 17,000 g for 5min (Biofuge pico
centrifuge, Heraeus Instruments, Hanau, Germany). 10 μL of supernatant
was used and injected into HPLC.
The concentrations of cells were determined bymeasuring the optical
density at 600 nm (Spectrophotometer U-2000, Hitachi, Tokyo, Japan).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. ความมุ่งมั่นของวิตามินบี 12 และสารวิตามินบี 12 ถูกตรวจพบ โดยการทดสอบทางจุลชีววิทยาที่อธิบาย และแก้ไข โดย Denter และ Bisping andHPLCmethodwas (1994) รายงานก่อนหน้านี้ (Gauch et al. 1992) ทั้งหมดของการแยกสารที่โครมาดำเนินการใน roomtemperature การไหลของ 0.5mL ต่อนาที เมทานอลกับกรดฟอร์มิก 0.1% (A) (Merck ดาร์มสตัดท์ เยอรมนี) และบริสุทธิ์น้ำ 0.1% กรดฟอร์มิก (B), ซึ่งถูก degassed โดยการอาบน้ำอัลตราโซนิก (Sonorex TK 52 อาบน้ำอัลตราโซนิก Bandelinใช้เป็นโทรศัพท์มือถือระยะและระดับสีอิเล็กทรอนิกส์ เบอร์ลิน เยอรมนี),โปรแกรมชะดัง: 0 – 2 นาที 20% A 2 – 3 นาที20 – 25% มี 3 – 11 นาที 25 – 35% A 11 – 19 นาที 35 – 20% A 20-22 นาที100 – 100% A 22 – 26 นาที 100 – 20% A 20 นาที 26 – 36% a การฉีดจุได้ 100 μL และ eluatewas คอลัมน์การตรวจสอบ โดยไดโอดอาร์เรย์เครื่องตรวจจับ (น้ำ สหรัฐอเมริกา) ที่ 361 nmสารที่ถูกตรวจพบ throughHPLC (น้ำ E2695 สหรัฐอเมริกา) กับการคอลัมน์กรดอินทรีย์ (850 BP โอเออิน 300 ∗ 7.8 มม. Polymeric เบนสันประกายไฟ สหรัฐอเมริกา) เป็นระยะเป็นของแข็ง ทั้งหมดของการแยกสารที่โครมาดำเนินการที่อุณหภูมิ 60 องศาเซลเซียส การไหลของ 0.6 มิลลิลิตรต่อนาทีด้วยกำมะถัน 26 มม.กรดถูกใช้เป็นเฟสเคลื่อน ปริมาณฉีดได้ 10 μL และwasmonitored columneluate โดยตรวจจับ Lachrom RI 1mL ของการหมักliquidwas จากที่จี 17,000 (Biofuge pico 5 นาที 10 นาทีเครื่องเหวี่ยง เครื่องก๊าซ เนา เยอรมนี) 10 μL ของ supernatantใช้ และฉีดเข้าไปใน HPLCความเข้มข้นของเซลล์ถูกกำหนด bymeasuring ที่ออปติคอลความหนาแน่นที่ 600 นาโนเมตร (สเปค U-2000 ฮิตาชิ โตเกียว ญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 ความมุ่งมั่นของวิตามินบี 12 และเมตาบอไล
วิตามินบี 12 ที่ตรวจพบโดยการทดสอบทางจุลชีววิทยาอธิบายและ
แก้ไขโดย Denter และ Bisping (1994) andHPLCmethodwas รายงาน
ก่อนหน้านี้ (Gauch et al., 1992) ทั้งหมดของการแยกสาร
ได้ดำเนินการที่ roomtemperature การไหลของ 0.5mL ต่อนาที, เมทานอล
กับกรดฟอร์มิ 0.1% (A) (เมอร์ค, ดาร์มสตัด, เยอรมนี) และอัลตร้า
น้ำบริสุทธิ์ที่มีกรดฟอร์มิ 0.1% (B) ซึ่งได้รับการกำจัดก๊าซโดย
อ่างน้ำอัลตราโซนิก (Sonorex TK 52, อ่างน้ำล้ำ Bandelin
อิเล็กทรอนิกส์, Berlin, เยอรมนี) ถูกนำมาใช้เป็นขั้นตอนโทรศัพท์มือถือและการไล่ระดับสี
ชะเป็นโปรแกรมดังนี้ 0-2 นาที 20%; 2-3 นาที
20-25% ใน; 3-11 นาที 25-35% ใน; 11-19 นาที 35-20% ใน; 20-22 นาที
100-100% ใน; 22-26 นาที 100-20% ใน; และ 26-36 นาที 20% A. ฉีด
ปริมาณ 100 ไมโครลิตรและคอลัมน์ eluatewas ตรวจสอบโดยไดโอดอาร์เรย์
ตรวจจับ (น่านน้ำสหรัฐ) ที่ 361 นาโนเมตร.
สารที่ถูกตรวจพบ throughHPLC (น้ำ E2695, สหรัฐ) กับ
คอลัมน์กรดอินทรีย์ (850 BP-OA H + 300 * 7.8 มมเบนสันพอลิเมอ,
ปาร์กส์, สหรัฐอเมริกา) เป็นของแข็ง ทั้งหมดของการแยกสาร
ได้ดำเนินการที่ 60 ° C การไหล 0.6 มิลลิลิตรต่อนาทีกับ 26 มิลลิกำมะถัน
กรดถูกใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่ ปริมาณการฉีดเป็น 10 ไมโครลิตรและ
columneluate wasmonitored โดย Lachrom RI ตรวจจับ 1 mL ของการหมัก
liquidwas ปั่นเป็นเวลา 10 นาทีที่ 17,000 กรัมสำหรับ 5 นาที (Biofuge Pico
centrifuge, Heraeus เครื่องดนตรี, เนาเยอรมนี) 10 ไมโครลิตรของสารละลาย
ที่ใช้และฉีดเข้าไปใน HPLC.
ความเข้มข้นของเซลล์ได้รับการพิจารณา bymeasuring แสง
ความหนาแน่นที่ 600 นาโนเมตร (Spectrophotometer U-2000, ฮิตาชิ, โตเกียวประเทศญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การหาปริมาณวิตามินและสารวิตามิน B12 ถูกตรวจพบโดยการทดสอบทางด้านจุลชีววิทยาและอธิบายแก้ไขโดย denter ( 1994 ) andhplcmethodwas รายงาน และ บิ ิงก่อนหน้านี้ ( gauch et al . , 1992 ) ทั้งหมดของการแยกทางโครมาโตกราฟีทดลองที่อุณหภูมิห้อง . การไหลของ 0.5ml ต่อมินอลกับ 0.1% กรด ( ) ( เมอร์ค ดาร์มชตัท , เยอรมนี ) และอัลตร้าน้ำบริสุทธิ์กับ 0.1% กรด ( B ) ซึ่งเป็น degassed โดยอาบน้ำด้วย ( sonorex TK 52 , อาบน้ำ , น้ำ bandelin อัลตราโซนิกอิเล็กทรอนิกส์ , เบอร์ลิน , เยอรมัน ) , ถูกใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่และการไล่ระดับสีใช้โปรแกรมดังต่อไปนี้ : 0 – 2 นาที 20 % เป็น 2 – 3 นาที20 - 25 % เป็น 3 – 11 25 นาที– 35% ; 11 – 19 นาที 35 – 20% ; 20 – 22 นาที100 ทั้ง 100 % ; 22 – 26 นาที 100 – 20% ; 26 – 36 นาที 20 % A . ฉีดปริมาณ 100 μ L และคอลัมน์ eluatewas ตรวจสอบไดโอดอาร์เรย์เครื่องตรวจจับ ( น้ำ ) ที่ 361 nm .มีการตรวจพบสาร throughhplc ( น้ำ e2695 เรา ) กับคอลัมน์กรดอินทรีย์ ( 850 bp-oa H + 300 ∗ 7.8 มิลลิเมตร ใช้เบนสัน ,ประกายไฟ , USA ) เป็นเฟสของแข็ง ทั้งหมดของการแยกทางโครมาโตกราฟีทดลองที่อุณหภูมิ 60 องศา กระแส 0.6 มิลลิลิตรต่อนาทีกับกรดซัลฟูริก 26 มม.กรดที่ใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่ . ปริมาณการฉีดได้ 10 μ L และcolumneluate การวัดโดยเครื่องรี lachrom . 1ml ของการหมักliquidwas ไฟฟ้า 10 นาทีที่ 17 , 000 G สำหรับ 5 นาที ( biofuge พิโคcentrifuge , Heraeus เครื่องมือ Hanau , เยอรมนี ) 10 μ l น่านใช้ฉีดเข้าไปใน HPLC .ความเข้มข้นของสารละลาย โดยเซลล์แสงความหนาแน่นที่ 600 nm ( Spectrophotometer u-2000 , ฮิตาชิ , โตเกียว , ญี่ปุ่น )