A gene that codes for a novel intra

A gene that codes for a novel intracellular poly-3-hydroxybutyrate (PHB) depolymerase has now been identified in the genome of Bacillus thuringiensis subsp. israelensis ATCC 35646. This gene, previously annotated as a hypothetical 3-oxoadipate enol-lactonase (PcaD) gene and now designated phaZ, encodes a protein that shows no significant similarity with any known PHB depolymerase. Purified His-tagged PhaZ could efficiently degrade trypsin-activated native PHB granules as well as artificial amorphous PHB granules and release 3-hydroxybutyrate monomer as a hydrolytic product, but it could not hydrolyze denatured semicrystalline PHB. In contrast, purified His-tagged PcaD of Pseudomonas putida was unable to degrade trypsin-activated native PHB granules and artificial amorphous PHB granules. The B. thuringiensis PhaZ was inactive against p-nitrophenylpalmitate, tributyrin, and triolein. Sonication supernatants of the wild-type B. thuringiensis cells exhibited a PHB-hydrolyzing activity in vitro, whereas those prepared from a phaZ mutant lost this activity. The phaZ mutant showed a higher PHB content than the wild type at late stationary phase of growth in a nutrient-rich medium, indicating that this PhaZ can function as a PHB depolymerase in vivo. PhaZ contains a lipase box-like sequence (G-W-S102-M-G) but lacks a signal peptide. A purified His-tagged S102A variant had lost the PHB-hydrolyzing activity. Taken together, these results indicate that B. thuringiensis harbors a new type of intracellular PHB depolymerase.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตอนนี้พบที่ depolymerase รหัสสำหรับการนวนิยาย intracellular โพลี-3-hydroxybutyrate (PHB) ในจีโน Bacillus thuringiensis israelensis subsp. ATCC 35646 ยีนนี้ ก่อนหน้านี้ ประกอบ เป็นยีนสมมุติ 3-oxoadipate enol-lactonase (PcaD) และตอน นี้ phaZ กำหนด เข้ารหัสโปรตีนที่แสดงความคล้ายคลึงกันไม่สำคัญกับ PHB ใด ๆ รู้จัก depolymerase PhaZ แท็กของพระองค์บริสุทธิ์อาจมีประสิทธิภาพลดลงเรียกปซิดั้งเดิม PHB เม็ดเป็นเม็ด PHB ไร้เทียม และปล่อยน้ำยา 3-hydroxybutyrate เป็นผลิตภัณฑ์ความคงทน แต่มันอาจไม่ hydrolyze PHB semicrystalline ลแปลง ตรงกันข้าม PcaD แท็กของพระองค์บริสุทธิ์ของ Pseudomonas putida ไม่สามารถลดทอนเรียกปซิดั้งเดิม PHB เม็ดและเม็ด PHB สัณฐานประดิษฐ์ B. thuringiensis PhaZ ไม่ได้ใช้งาน กับ p nitrophenylpalmitate, tributyrin, triolein Supernatants sonication ของป่าชนิด B. thuringiensis เซลล์แสดง PHB hydrolyzing กิจกรรมการในหลอดทดลอง ในขณะที่จัดทำขึ้นจาก phaZ mutant หายไปกิจกรรมนี้ กลายพันธุ์ phaZ พบ PHB สูงเนื้อหามากกว่าป่าชนิดที่ปลายนิ่งระยะของการเจริญเติบโตในสื่อที่อุดมด้วยสาร ระบุว่า PhaZ นี้สามารถทำงาน ตาม PHB depolymerase ในร่างกาย PhaZ ประกอบด้วยลำดับเหมือนกล่องเอนไซม์ไลเปส (G-W-S102-M-G) แต่ขาดสัญญาณเปปไทด์ A S102A แท็กของพระองค์บริสุทธิ์แปรไปกิจกรรม PHB hydrolyzing นำมารวมกัน ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่า B. thuringiensis เต็มรูปแบบใหม่ของ intracellular PHB depolymerase

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ยีนที่รหัสสำหรับนวนิยายเซลล์ Poly-3-ไฮดรอกซี (PHB) depolymerase ขณะนี้ได้รับการระบุในจีโนมของเชื้อ Bacillus thuringiensis subsp israelensis ATCC 35646. ยีนนี้ข้อเขียนก่อนหน้านี้เป็นเพียงสมมติฐาน 3 oxoadipate enol-lactonase (PcaD) ยีนและตอนนี้กำหนด phaZ, encodes โปรตีนที่แสดงให้เห็นว่าไม่มีความคล้ายคลึงกันอย่างมีนัยสำคัญใด ๆ depolymerase PHB รู้จักกัน บริสุทธิ์ของเขาที่ติดแท็ก PhaZ ได้อย่างมีประสิทธิภาพสามารถลด trypsin เปิดใช้เม็ด PHB พื้นเมืองเช่นเดียวกับเทียมเม็ด PHB สัณฐานและปล่อยโมโนเมอร์ 3 ไฮดรอกซีเป็นผลิตภัณฑ์ย่อยสลาย แต่ก็ไม่สามารถย่อยสลาย PHB กึ่งผลึกเอทิลแอลกอฮอล์ ในทางตรงกันข้ามบริสุทธิ์ของเขาที่ติดแท็ก PcaD ของ Pseudomonas putida ก็ไม่สามารถที่จะทำให้เสื่อมเสีย trypsin เปิดใช้เม็ด PHB พื้นเมืองและเทียมเม็ด PHB สัณฐาน บี thuringiensis PhaZ เป็นงานกับ P-nitrophenylpalmitate, tributyrin และ triolein supernatants sonication ของป่าชนิดเซลล์ thuringiensis บีแสดงกิจกรรม PHB-hydrolyzing ในหลอดทดลองในขณะที่ผู้ที่เตรียมจากมนุษย์กลายพันธุ์ phaZ หายไปกิจกรรมนี้ phaZ กลายพันธุ์พบว่ามีเนื้อหา PHB สูงกว่าป่าประเภทที่ปลายเฟสของการเติบโตในสื่อที่อุดมด้วยสารอาหารที่ระบุว่า PhaZ นี้สามารถทำงานเป็น PHB depolymerase ในร่างกาย PhaZ มีเอนไซม์ไลเปสกล่องเหมือนลำดับ (GW-S102-MG) แต่ขาดเปปไทด์สัญญาณ บริสุทธิ์ของเขาที่ติดแท็ก S102A ตัวแปรได้สูญเสียกิจกรรม PHB-hydrolyzing ที่ร่วมกันผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่า B. thuringiensis สถิตเป็นชนิดใหม่ของ depolymerase PHB ภายในเซลล์