4. Instruments and conditionsHPLC/D

4. Instruments and conditions
HPLC/DAD and HPLC/ESI-MS (ion trap) studies were performed
using an Agilent 1100 (Santa Clara, CA, USA) series instrument,
made from an autosampler, a binary solvent pump, with a
diode–array detector (DAD) and a mass spectrometer detector
(MSD) Trap SL equipped with an electrospray ionisation (ESI) interface
operating in negative ionisation (NI) mode. The separation
was achieved on a Synergi Polar–RP C18 (4.6 mm 150 mm,
4 lm) analytical column from Phenomenex (Chesire, UK). The column
was preceded by a Polar RP security guard cartridge
(4 mm 3 mm ID). The mobile phase for HPLC/DAD and HPLC/
ESI-MS analyses was aqueous-formic acid (99.9–0.1%) (A) and acetonitrile
(B) working in the gradient mode at a flow rate of
0.6 ml min1
. The solvent composition varied as follows: 0–
7 min, 20% B; 7–15 min, 20–90% B; 15–18 min, 90% B; 18–
25 min, 90–20% B. The column temperature was set at 11 C and
the injection volume was 10 ll.
HPLC/DAD analysis was performed monitoring four different
wavelengths: 232 for loganic acid, swertiamarin and amarogentin;
246 nm for sweroside; 258 nm for isogentisin and 275 nm for
gentiopicroside.
In HPLC/ESI-MS, the column outlet was connected to the electrospray
sample inlet. The electrospray (ESI) source operated in
negative ionisation (NI) mode. Optimisation of the HPLC/ESI-MS
conditions was carried out by flow injection analysis (FIA) of the
analytes (10 ll of a 50 lg ml1 individual standard solutions).
The optimum ESI interface conditions were as follows: vaporizer
A.M. Mustafa et al. / Food Chemistry 174 (2015) 426–433 427
temperature, 325 C; nebulizer gas (nitrogen) pressure, 50 psi; drying
gas (nitrogen) flow rate, 11 ml min1
; temperature, 350 C; and
capillary voltage, 3500 V. Mass scan range was set in the range of
m/z 100–1000. Extract ion chromatograms (EIC) from total ion
chromatograms (TIC) were used for the analysis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

4. เครื่องกำหนด และเงื่อนไขทำ HPLC/พ่อ และศึกษา HPLC/ESI-MS (ตรวจจับไอออน)ใช้เครื่องมือชุด Agilent 1100 (ซานตาคลารา CA, USA)ทำจากการ autosampler ปั๊มเป็นตัวทำละลายฐาน มีการไดโอดเรย์จับ (พ่อ) และจับโดยรวมสเปกโตรมิเตอร์(เครื่องมือ) กับดักพร้อมอินเทอร์เฟซ ionisation (ESI) วิธีพ่นละอองไฟฟ้า SLทำงานในโหมด ionisation ลบ (NI) แยกสำเร็จในการ Synergi ขั้วโลก – RP C18 (4.6 มม. 150 มม.4 lm) คอลัมน์วิเคราะห์จาก Phenomenex (Chesire, UK) คอลัมน์ถูกนำหน้า ด้วยตลับหมึก RP โพลาร์ยามรักษาความปลอดภัย(4 มม. 3 มม.หมายเลข) เฟสเคลื่อนที่สำหรับ HPLC/พ่อ และ HPLC /วิเคราะห์ ESI MS มีกรด formic อควี (99.9 – 0.1%) (A) และ acetonitrile(ข) ทำงานในโหมดการไล่ระดับสีที่อัตราการไหลของmin1 0.6 ml. องค์ประกอบของตัวทำละลายที่แตกต่างกันดังนี้: 0-7 นาที 20% B ต่ำสุด 7-15, 20-90% B 15 – 18 นาที 90% B 18 –25 นาที 90-20% เกิด ตั้งอุณหภูมิคอลัมน์ที่ 11 C และปริมาณฉีดได้ 10 จะวิเคราะห์ HPLC/พ่อ ได้ดำเนินการตรวจสอบสี่แตกต่างกันความยาวคลื่น: 232 กรด loganic, swertiamarin และ amarogentin246 nm สำหรับ sweroside 258 nm isogentisin และ 275 nm สำหรับgentiopicrosideใน HPLC/ESI-MS ร้านคอลัมน์ถูกเชื่อมต่อกับวิธีพ่นละอองไฟฟ้าทางเข้าของตัวอย่าง ต้นวิธีพ่นละอองไฟฟ้า (ESI) ที่ดำเนินการในโหมด ionisation ลบ (NI) เพิ่มประสิทธิภาพของ HPLC/ESI-MSเงื่อนไขถูกดำเนินการ โดยวิเคราะห์การฉีดกระแส (FIA) ของการanalytes (10 จะเป็น 50 lg ml1 แต่ละมาตรฐานโซลูชั่น)เงื่อนไขติดต่อ ESI เหมาะสมมีดังนี้: vaporizerน. Mustafa et al. / เคมีอาหาร 174 (2015) 426-433 427อุณหภูมิ 325 C ฝอยละอองก๊าซไนโตรเจนความดัน 50 psi การอบแห้งอัตราการไหลก๊าซไนโตรเจน min1 11 ml; อุณหภูมิ 350 C และแรงดันของเส้นเลือดฝอย 3500 V. มวลการสแกนช่วงถูกกำหนดในช่วงของm/z 100 – 1000 แยกไอออน chromatograms (EIC) จากไอออนทั้งหมดchromatograms (รับผลิตกระป๋อง) ใช้สำหรับการวิเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

4. เครื่องมือและเงื่อนไข
HPLC / DAD และ HPLC / ESI-MS (กับดักไอออน)
การศึกษาได้ดำเนินการโดยใช้Agilent 1100 (Santa Clara, CA, USA)
เครื่องมือที่ใช้ในชุดทำจากเครื่องฉีดตัวอย่างอัตโนมัติ, เครื่องสูบน้ำเป็นตัวทำละลายไบนารีกับ
diode- เครื่องตรวจจับอาร์เรย์ (DAD) และเครื่องตรวจจับสเปกโตรมิเตอร์มวล
(เอ็มเอส) กับดัก SL พร้อมกับ Ionisation electrospray (ESI)
อินเตอร์เฟซการดำเนินงานในIonisation ลบ (NI) โหมด แยกก็ประสบความสำเร็จใน C18 Synergi Polar-RP (4.6 มิลลิเมตร 150 มิลลิเมตร, 4 LM) คอลัมน์วิเคราะห์จาก Phenomenex (Chesire สหราชอาณาจักร) คอลัมน์ถูกนำหน้าด้วยตลับหมึกยามรักษาความปลอดภัยขั้วโลก RP (4 มมมม ID 3) เฟสเคลื่อนที่สำหรับ HPLC / DAD และ HPLC / ESI-MS วิเคราะห์เป็นกรดฟอร์มิ-น้ำ (99.9-0.1%) (A) และ acetonitrile (B) การทำงานในโหมดการไล่ระดับสีที่อัตราการไหล0.6 มิลลิลิตร min1 องค์ประกอบตัวทำละลายที่แตกต่างกันดังต่อไปนี้: 0- 7 นาที, 20% B; 7-15 นาที, 20-90% B; 15-18 นาที, 90% B; 18- 25 นาที, 90-20% B. อุณหภูมิคอลัมน์ตั้งอยู่ที่ 11 องศาเซลเซียสและปริมาณการฉีด10 LL. HPLC / การวิเคราะห์ DAD ได้ดำเนินการตรวจสอบที่แตกต่างกันสี่ความยาวคลื่น: 232 กรด loganic swertiamarin และ amarogentin; 246 นาโนเมตรสำหรับ sweroside; 258 นาโนเมตรสำหรับ isogentisin และ 275 นาโนเมตรสำหรับgentiopicroside. ใน HPLC / ESI-MS, ร้านคอลัมน์เชื่อมต่อกับ electrospray เข้าตัวอย่าง electrospray (ESI) แหล่งที่มาดำเนินการในIonisation ลบ (NI) โหมด การเพิ่มประสิทธิภาพของ HPLC / ESI-MS เงื่อนไขได้ดำเนินการโดยการวิเคราะห์การไหลของการฉีด (FIA) ของ. วิเคราะห์ (10 LL ของแอลจี 50 ML1 แต่ละโซลูชั่นมาตรฐาน) เงื่อนไขที่เหมาะสมอินเตอร์เฟซ ESI มีดังนี้ไอAM มุสตาฟาอัลเอต / อาหารเคมี 174 (2015) 426-433 427 อุณหภูมิ 325 C; ก๊าซ nebulizer (ไนโตรเจน) ความดัน 50 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว; การอบแห้งก๊าซ (ไนโตรเจน) อัตราการไหล 11 มล. min1; อุณหภูมิ 350 C; และแรงดันของเส้นเลือดฝอย, 3500 โวลต์มวลช่วงสแกนที่ตั้งอยู่ในช่วงของม. / z 100-1000 สารสกัดจากไอออนโครมาโต (EIC) จากไอออนรวมchromatograms (TIC) ถูกนำมาใช้ในการวิเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

4 . เครื่องมือและเงื่อนไข
HPLC / พ่อและ HPLC / esi-ms ( ไอออนกับดัก ) ศึกษาการ
ใช้ Agilent 1100 ( ซานตาคลารา แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา ) ชุดเครื่องมือ ,
ที่ทําจาก autosampler , ไบนารีเป็นตัวปั๊มกับ
ไดโอด–เรย์ตรวจจับ ( พ่อ ) และแมสสเปกโทรมิเตอร์ตรวจจับ
( เอ็มเอส ) กับดัก SL พร้อมกับ ionisation วิธีพ่นละอองไฟฟ้า ( ESI ) อินเตอร์เฟซ
ปฏิบัติการใน ionisation ลบ ( Ni ) โหมดการแยก
สําเร็จใน synergi ขั้วโลก ( RP c18 ( 4.6 มิลลิเมตร 150 มม.
4 LM ) วิเคราะห์คอลัมน์จาก phenomenex ( chesire , UK ) คอลัมน์
ถูกนำหน้าโดย Polar RP รักษาความปลอดภัยตลับ
( 4 มม. 3 มม. ID ) เฟสเคลื่อนที่สำหรับ HPLC / พ่อและ HPLC /
esi-ms วิเคราะห์สารละลายเป็นกรด ( 99.9 ( 0.1% ) ( ก ) และ ( ข ) ไน
ทำงานในโหมดสีในอัตรา 0.6 ml min1

องค์ประกอบของตัวทำละลายที่แตกต่างกันดังนี้ : 0 )
7 นาที 20 % b ; 7 – 15 นาทีที่ 20 – 90 % B ; 15 – 18 นาที 90 % B ;
18 – 25 นาที 90 – 20 % B . คอลัมน์ อุณหภูมิตั้งไว้ที่ 11 องศาเซลเซียส และปริมาณการฉีด
10 จะ .
การวิเคราะห์ HPLC / พ่อกำลังดำเนินการตรวจสอบ 4 ความยาวคลื่นที่แตกต่างกัน
: 232 สำหรับ loganic กรด และ swertiamarin amarogentin ;
246 nm สำหรับ sweroside ; 258 nm สำหรับ isogentisin และ 275 nm สำหรับ
gentiopicroside .
ใน HPLC / esi-ms คอลัมน์เต้าเสียบได้เชื่อมต่อกับวิธีพ่นละอองไฟฟ้า
ตัวอย่างปากน้ำ โดยวิธีพ่นละอองไฟฟ้า ( ESI ) ที่มาดำเนินการใน
ionisation ลบ ( Ni ) โหมด การเพิ่มประสิทธิภาพของ HPLC / esi-ms
เงื่อนไขกระทำโดยการวิเคราะห์การไหลของหัวฉีด ( FIA )
สาร ( 10 จะเป็น 50 LG ml1 แต่ละมาตรฐานโซลูชั่น ) .
ที่ ESI interface เงื่อนไขดังนี้ vaporizer
น. มุสตาฟา et al . เคมีอาหาร / 174 ( 2015 ) 426 – 433 427
อุณหภูมิ 325 C ; nebulizer ก๊าซ ( ไนโตรเจน ) ความดัน 50 psi ;
ก๊าซแห้ง ( ไนโตรเจน ) อัตราการไหล , 11 ml min1
; อุณหภูมิ 350 C ;
ฝอยและแรงดันไฟฟ้า 3500 โวลต์มวลสแกนช่วงถูกตั้งค่าในช่วง
M / Z 100 - 1000 สารสกัดจากกลิ่นกลิ่น ( EIC ) ไอออนไอออน
รวม ( TIC ) สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ .