2. Materials and methods
2.1. Meat sample preparation
Sixty bone-in thick cut pork Longissimus thoracis et lumborum (LTL)
chops were purchased from a retail storage the day of initial packaging,
with a post-mortem age of 3–14 days. The bones were removed at the
laboratory with a flame-sterilized knife before being placed into a
vacuum-package (B470T, Cryovac Sealed Air Corporation, Duncan,
SC); oxygen transmission rate of 3–6 cm3
/m2
, 24 h, 1 atm, at 4.4 °C and
0% relative humidity, and a water vapor transmission rate of 0.5–0.6 g at
37.7 °C (100% relative humidity, 100 in2
, 24 h). Three pork chops were
placed into each vacuum-package. Before sealing, a pair of empty
autoclaved 3 × 22 mm flat-bottom glass test tubes, with a 3 × 6 mm
flea magnetic stir bar in each tube, were placed into an autoclaved
0.95 × 2.54 × 10.16 cm Teflon stand (Fig. 1). These glass tube and
Teflon stands were placed aseptically into the vacuum-package with
the meat. The tubes were placed upright in the package approximately
7.6 cm away from the pork chops. The vacuum-packages were then
vacuum-sealed (975–980 mm Hg vacuum) with a Multivac C350
(Kansas City, MO). After sealing, the vacuum-packages were stored in
a 4 °C cooler for up to 60 days. Over time, the exudate from the meat
collected in the sterile tubes in the package.
2.2. Dissolved oxygen and carbon dioxide concentration measurements
Two vacuum-packages were randomly selected on days 0, 5, 15, 30,
45, and 60 for dissolved gas concentration measurements. The vacuumpackages
were placed into a biosafety cabinet and allowed to temper to
20-22 °C for 10 min. After 10 min, the packages were placed onto a stir
plate (Dataplate Digital Hotplate/Stirrer Series 730, Thermolyne Corporation,
Dubuque, IA), set to an stirring rate of 300 rpm and allowed to
mix for 1 min. The outside of the package near the glass tubes was
wiped with ethanol and allowed to evaporate before sterilized scissors
were used to cut a cross aseptically into the top of one glass tube.
After opening the package, a probe designed to measure dissolved
oxygen in a liquid system (Hach LDO101 probe; Hach HQ30d meter,
Ames, IA) was slipped inside one of the glass tubes until halfway
submerged. The dissolved oxygen concentration was measured four
times before the measurements were averaged for an average dissolved
oxygen concentration. The dissolved oxygen probe was calibrated
before use according to the manufacturer's directions for a 100% oxygen
concentration.
Dissolved carbon dioxide was measured using an electrode designed
to determine dissolved CO2 in liquid systems (Thermo Scientific OrionCarbon Dioxide Electrode 9502BNWP and Thermo Scientific Orion Star
A214 pH/ISE benchtop meter; Beverly, MA). The electrode was calibrated
to 100 and 1000 mg/L using a 0.1 M NaHCO3 (Thermo Scientific Orion
Application Standard 950206, Beverly, MA) calibration standard with
Carbon dioxide buffer added (Thermo Scientific Orion Application
Solution 950210, Beverly, MA), according to the manufacturer's directions.
After finishing the dissolved O2 measurement, the other glass tube
was used for dissolved CO2 measurements. Another cross was cut aseptically
into the package on top of the glass tube and the Carbon Dioxide
Buffer solution was added in a 10% concentration to the amount of
purge inside the glass tube. The buffer was needed to convert all bicarbonate
and carbonate into CO2 inside the purge. After allowing the buffer to
mix for 1 min, the electrode was submerged halfway down into the
purge. The dissolved CO2 concentrations were measured after the millivolt
readings stabilized, and then five measurements were recorded.
The measurements were averaged together to obtain an average measurement
for dissolved CO2 per package.
2. วัสดุและวิธีการ2.1 เตรียมตัวอย่างเนื้อหกในกระดูกหนาตัดหมู Longissimus thoracis et lumborum (LTL)ชิ้นซื้อเก็บขายปลีกบรรจุภัณฑ์เริ่มต้น วันอายุพ้นลง 3 – 14 วัน กระดูกถูกเอาออกในการห้องปฏิบัติการกับมีด sterilized เปลวไฟก่อนที่จะถูกวางลงในตัวสุญญากาศแพคเกจ (B470T, Cryovac ปิดผนึกอากาศ บริษัท ดันแคนSC); อัตราการส่งออกซิเจนของ cm3 3 – 6/m2, 24 ชม 1 atm ที่ 4.4 ° C และความชื้นสัมพัทธ์ 0% และอัตราการส่งไอน้ำ 0.5 – 0.6 g ที่37.7 องศาเซลเซียส (ความชื้นสัมพัทธ์ 100%, 100 in2, 24 ชม) สามหมูสับได้อยู่ในแต่ละแพคเกจสูญญากาศ ก่อนที่จะยาแนวรอยต่อ คู่ของว่างautoclaved 3 × 22 มม.ล่างแบนทดสอบหลอดแก้ว มีแบบ 3 × 6 มม.แถบแม่เหล็กผัดนัดในแต่ละหลอด ถูกวางในการ autoclaved0.95 × 2.54 × 10.16 ซม.เทฟลอนยืน (Fig. 1) นี่แก้วหลอด และยืนเทฟลอนถูกวาง aseptically ในสุญญากาศแพคเกจด้วยเนื้อ หลอดถูกวางตรงในแพคเกจประมาณ7.6 ซม.จากหมูสับ แพคเกจดูดได้แล้วvacuum-sealed (975 – 980 mm Hg สุญญากาศ) กับ Multivac C350(แคนซัสซิตี้ ด) หลังจากยาแนวรอยต่อ แพคเกจสูญญากาศถูกเก็บไว้ใน4 ° C เย็นถึง 60 วัน ช่วงเวลา exudate จากเนื้อเก็บในหลอดใส่ในแพคเกจ2.2 การละลายออกซิเจนและคาร์บอนไดออกไซด์เข้มข้นวัดสุญญากาศแพคเกจที่สองถูกสุ่มเลือกในวันที่ 0, 5, 15, 3045 และ 60 สำหรับวัดความเข้มข้นของก๊าซที่ละลาย Vacuumpackagesอยู่ในการ biosafety ตู้ และสามารถ temper จะ20-22 ° C สำหรับ 10 นาที หลังจาก 10 นาที แพคเกจถูกวางลงบนคนแผ่น (Dataplate ดิจิตอลแห่ง/ช้อนคนชุด 730 คะแนน บริษัท Thermolyneดู IA), ตั้งค่าอัตราการ stirring 300 rpm และอนุญาตให้ผสมใน 1 นาที ด้านนอกของบรรจุภัณฑ์ใกล้หลอดแก้วได้เช็ด ด้วยเอทานอล และสามารถระเหยก่อน sterilized กรรไกรถูกใช้ในการตัดการขน aseptically ลงบนหลอดแก้วหนึ่งหลังจากเปิดแพ็คเกจ โพรบที่ออกแบบมาเพื่อวัดส่วนยุบออกซิเจนในระบบของเหลว (โพรบ Hach LDO101 Hach HQ30d เมตรเอมส์ IA) เล็ดรอดภายในหลอดแก้วจนอยู่ตรงกลางอย่างใดอย่างหนึ่งน้ำท่วม ความเข้มข้นของออกซิเจนละลายที่วัด 4ส่วนยุบครั้งก่อนวัดได้ averaged ค่าเฉลี่ยความเข้มข้นของออกซิเจน โพรบออกซิเจนละลายถูกปรับเทียบก่อนใช้ตามคำแนะนำของผู้ผลิตสำหรับออกซิเจน 100%ความเข้มข้นก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ละลายถูกวัดการใช้ไฟฟ้าการออกแบบกำหนด CO2 ที่ละลายในของเหลว (9502BNWP เทอร์โมวิทยาศาสตร์ OrionCarbon ไดออกไซด์อิเล็กโทรดและเทอร์โมวิทยาศาสตร์กลุ่มดาวนายพรานดาวA214 อิ เสะ/pH benchtop เมตร เบเวอร์ลี่ MA) อิเล็กโทรดถูกปรับเทียบ100 และ 1000 mg/L โดยใช้ 0.1 M NaHCO3 (เทอร์โมวิทยาศาสตร์กลุ่มดาวนายพรานแอพลิเคชันมาตรฐาน 950206 เบเวอร์ลี่ MA) ปรับเทียบมาตรฐานด้วยก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์บัฟเฟอร์เพิ่ม (เทอร์โมวิทยาศาสตร์โอไรออนแอพลิเคชันโซลูชั่น 950210 เบเวอร์ลี่ MA), ตามคำแนะนำของผู้ผลิตหลังจากเสร็จสิ้นการวัด O2 ละลาย หลอดแก้วอื่น ๆใช้สำหรับวัด CO2 ละลาย ขนที่อื่นถูกตัด asepticallyเป็นแพคเกจบนหลอดแก้วและก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์แก้ปัญหาบัฟเฟอร์เพิ่มในความเข้มข้น 10% จำนวนล้างภายในหลอดแก้ว ต้องการบัฟเฟอร์ไบคาร์บอเนตทุกแปลงและคาร์บอเนตเป็น CO2 ภายในจะล้างข้อมูล หลังจากให้บัฟเฟอร์การส่วนผสมสำหรับ 1 นาที อิเล็กโทรดถูกน้ำท่วมอยู่ตรงกลางลงไปล้มล้าง มีวัดความเข้มข้นของ CO2 ละลายหลัง millivoltอ่านเสถียร และจากนั้น บันทึกประเมิน 5วัดได้ averaged กันเพื่อขอรับการประเมินค่าเฉลี่ยสำหรับ CO2 ละลายต่อแพ็คเกจ
การแปล กรุณารอสักครู่..
2. วัสดุและวิธีการ
2.1 ตัวอย่างเนื้อสัตว์ที่เตรียมหกสิบกระดูกหมูตัดหนา longissimus thoracis et lumborum (LTL) สับที่ซื้อมาจากร้านค้าปลีกการจัดเก็บบรรจุภัณฑ์วันที่เริ่มต้นด้วยอายุชันสูตรศพของ 3-14 วัน กระดูกที่ถูกถอดออกในห้องปฏิบัติการด้วยมีดไฟฆ่าเชื้อก่อนที่จะถูกวางลงในสูญญากาศแพคเกจ(B470T, Cryovac ปิดผนึกอากาศคอร์ปอเรชั่นดันแคน, SC); อัตราการส่งผ่านออกซิเจน 3-6 cm3 / m2, 24 ชั่วโมง, 1 บรรยากาศที่ 4.4 องศาเซลเซียสและ0% ความชื้นสัมพัทธ์และอัตราการส่งผ่านของไอน้ำ 0.5-0.6 กรัมที่37.7 ° C (100% ความชื้นสัมพัทธ์ 100 in2 24 ชั่วโมง) สามหมูสับที่ถูกวางไว้ในแต่ละแพคเกจสูญญากาศ ก่อนที่จะปิดผนึกคู่ของว่างเบา 3 × 22 มมแบนด้านล่างหลอดทดลองแก้วมี 3 × 6 มมหมัดแถบแม่เหล็กคนในแต่ละหลอดถูกวางไว้ให้เป็นเบา0.95 × 2.54 × 10.16 ซม. เทฟลอนยืน (รูปที่ 1. ) หลอดแก้วเหล่านี้และเทฟลอนยืนอยู่ปลอดเชื้อเป็นแพคเกจสูญญากาศที่มีเนื้อ หลอดถูกวางไว้ตรงในแพคเกจประมาณ7.6 ซม. ห่างจากหมูสับ สูญญากาศแพคเกจจากนั้นก็สูญญากาศปิดผนึก (975-980 มิลลิเมตรปรอทสูญญากาศ) กับ Multivac C350 (แคนซัสซิตี) หลังจากที่ปิดผนึกสูญญากาศแพคเกจที่ถูกเก็บไว้ใน4 ° C เย็นได้นานถึง 60 วัน เมื่อเวลาผ่านไปสารหลั่งจากเนื้อรวบรวมไว้ในหลอดฆ่าเชื้อในแพคเกจ. 2.2 ออกซิเจนที่ละลายในน้ำและก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์วัดความเข้มข้นของสองแพคเกจสูญญากาศได้รับการคัดเลือกโดยการสุ่มในวันที่ 0, 5, 15, 30, 45, และ 60 สำหรับการตรวจวัดความเข้มข้นของก๊าซที่ละลายในน้ำ vacuumpackages ถูกวางอยู่ในตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพและได้รับอนุญาตให้อารมณ์ที่จะ20-22 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที หลังจาก 10 นาที, แพคเกจที่ถูกวางไว้บนความปั่นป่วนแผ่น(Dataplate ดิจิตอลร้อน / กวนซีรีส์ 730, Thermolyne คอร์ปอเรชั่นDubuque, IA) กำหนดให้มีอัตราการกวน 300 รอบต่อนาทีของและได้รับอนุญาตให้ผสมเป็นเวลา1 นาที ด้านนอกของแพคเกจที่อยู่ใกล้หลอดแก้วที่ถูกเช็ดด้วยเอทานอลและได้รับอนุญาตที่จะระเหยกรรไกรฆ่าเชื้อก่อนที่จะถูกนำมาใช้ในการตัดข้ามปลอดเชื้อเข้าสู่ด้านบนของหนึ่งในหลอดแก้ว. หลังจากเปิดแพคเกจการสอบสวนที่ออกแบบมาเพื่อวัดละลายออกซิเจนในของเหลวระบบ (Hach LDO101 สอบสวน; Hach HQ30d เมตรเอมส์, ไอโอวา) ได้รับการลดลงภายในหนึ่งหลอดแก้วจนถึงครึ่งหนึ่งจมอยู่ใต้น้ำ ความเข้มข้นของออกซิเจนที่ละลายวัดสี่ครั้งก่อนที่จะได้รับการวัดค่าเฉลี่ยสำหรับค่าเฉลี่ยละลายความเข้มข้นของออกซิเจน หัววัดออกซิเจนที่ละลายในน้ำที่ได้รับการสอบเทียบก่อนการใช้งานตามทิศทางของผู้ผลิตสำหรับออกซิเจน 100% ความเข้มข้น. ละลายก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ถูกวัดโดยใช้อิเล็กโทรดที่ออกแบบมาเพื่อตรวจสอบละลาย CO2 ในระบบของเหลว (เทอร์โมวิทยาศาสตร์ OrionCarbon ไดออกไซด์อิเลคโทร 9502BNWP และเทอร์โมวิทยาศาสตร์ Orion ดาว A214 ค่า pH / ISE benchtop เมตรเบเวอร์ลี, แมสซาชูเซต) ขั้วไฟฟ้าได้รับการสอบเทียบ100 และ 1,000 มิลลิกรัม / ลิตรโดยใช้ 0.1 M NaHCO3 (เทอร์โมวิทยาศาสตร์ Orion การประยุกต์ใช้มาตรฐาน 950206, เบเวอร์ลี่ MA) มาตรฐานการสอบเทียบกับบัฟเฟอร์คาร์บอนไดออกไซด์เพิ่ม(เทอร์โมวิทยาศาสตร์ Orion ประยุกต์ใช้โซลูชั่น950210, เบเวอร์ลี่ MA) ตาม ทิศทางของผู้ผลิต. หลังจากเสร็จสิ้นการละลายวัด O2, หลอดแก้วอื่น ๆที่ใช้สำหรับการตรวจวัด CO2 ละลาย ข้ามอีกถูกตัดปลอดเชื้อเป็นแพคเกจที่ด้านบนของหลอดแก้วและก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์แก้ปัญหาบัฟเฟอร์ถูกเพิ่มเข้ามาในความเข้มข้น10% กับปริมาณของการล้างภายในหลอดแก้ว บัฟเฟอร์เป็นสิ่งที่จำเป็นในการแปลงไบคาร์บอเนตทั้งหมดและคาร์บอเนตเข้า CO2 ภายในล้าง หลังจากที่ปล่อยให้บัฟเฟอร์เพื่อผสมเป็นเวลา 1 นาที, อิเล็กโทรดที่ถูกจมอยู่ใต้น้ำครึ่งหนึ่งลงไปล้าง ละลายความเข้มข้นของ CO2 วัดหลังจาก millivolt อ่านมีความเสถียรและจากนั้นห้าวัดบันทึก. การวัดค่าเฉลี่ยได้รับร่วมกันที่จะได้รับการวัดค่าเฉลี่ยสำหรับ CO2 ละลายต่อแพคเกจ
การแปล กรุณารอสักครู่..
2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . ตัวอย่างการเตรียมเนื้อกระดูกหมูที่หั่นหนา
หกสิบโค thoracis et lumborum ( LTL )
สับซื้อมาจากกระเป๋าปลีกวันของบรรจุภัณฑ์เริ่มต้น
ด้วยอายุที่ชันสูตรศพ 3 – 14 วัน กระดูกที่ถูกเอาออกใน
ปฏิบัติการด้วยเปลวไฟฆ่าเชื้อมีดก่อนที่จะถูกวางไว้ใน
แพคเกจสูญญากาศ ( b470t cryovac ปิดผนึกอากาศ , บริษัท ดันแคน ,
) )ออกซิเจนอัตราการส่งของ 3 – 6 cm3
/ m2
, 24 ชั่วโมง , 1 atm 4.4 ° C
0 % ความชื้นและไอน้ำ 0.5 0.6 กรัมและอัตราการส่งที่พบ° C (
100 % ความชื้นสัมพัทธ์ 100 ของเรา
, 24 ชั่วโมง ) สามหมูสับเป็น
อยู่ในแต่ละแพคเกจสูญญากาศ . ก่อนที่จะปิดผนึก , คู่ของสังเคราะห์เปล่า
3 × 22 มม. ด้านล่างแบน แก้ว หลอดทดลอง กับ 3 × 6 mm
หมัดแม่เหล็กกวนบาร์ในแต่ละหลอดถูกวางไว้ให้เป็นสังเคราะห์
0.95 × 2.54 × 10.16 เซนติเมตร Teflon ขาตั้ง ( รูปที่ 1 ) เหล่านี้ท่อแก้วและ
เทฟลอนยืนอยู่ aseptically ในแพคเกจสูญญากาศกับ
เนื้อ ท่ออยู่ตรงในแพคเกจประมาณ
7.6 ซม. ห่างจากหมูสับ . เครื่องดูดฝุ่นสูญญากาศปิดผนึกบรรจุแล้ว
( 975 - 980 mm Hg vacuum ) กับ multivac c350
( แคนซัส ซิตี้ โม ) หลังจากที่ปิดผนึกสูญญากาศบรรจุเก็บไว้ใน
4 ° C เย็นได้ถึง 60 วัน ช่วงเวลา ที่เกิดจากจากเนื้อ
เก็บในหลอดปราศจากเชื้อในแพคเกจ .
2.2 . ปริมาณออกซิเจนละลายน้ำและก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ความเข้มข้น
สองแพคเกจวัดสูญญากาศสุ่มในวันที่ 0 , 5 , 15 , 30 , 45 และ 60 สำหรับละลาย
, วัดความเข้มข้นของก๊าซ การ vacuumpackages
การแปล กรุณารอสักครู่..