Cell cycle analysisOne million P19

Cell cycle analysis
One million P19 cells were harvested, washed
with PBS and fixed by adding 70% cold (–20ºC) ethanol.
Subsequently, cells were centrifuged at 850 g to remove the
ethanol, washed twice with PBS and finally resuspended
in 400 μl PBS. 10 μg/ml RNAse (R5000, Sigma) and
20 μg/ml propidium iodide (P4864, Sigma) were added
for 30 minutes at 37ºC. 20 × 103 events per sample were
analyzed by using a FACScalibur flow cytometer (Becton
Dickenson, San Jose, CA, USA) with 488 nm excitation
and 605 nm emission wavelengths. The percentage of cells
in G1/G0, S and G2/M was determined using Modfit LT
software (Verity Software House, Topsham, ME, USA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิเคราะห์วงจรเซลล์ล้างเซลล์เก็บเกี่ยว P19 หนึ่งล้านด้วย PBS และคงเพิ่ม 70% เย็น (-20ºC) เอทานอลในเวลาต่อมา เซลล์ถูก centrifuged ที่ 850 g เอาการเอทานอล ล้าง ด้วย PBS สองครั้ง และในที่สุด resuspendedใน 400 μl PBS Μg/ml 10 RNAse (R5000 ซิก) และเพิ่ม 20 μg/ml propidium ไอโอไดด์ (P4864 ซิก)30 นาทีที่ 37ºC 20 × 103 เหตุการณ์ต่อตัวอย่างมีวิเคราะห์โดย cytometer เป็นกระแส FACScalibur (BectonDickenson, San Jose, CA, USA) กับ 488 nm ในการกระตุ้นและความยาวคลื่นที่ปล่อยก๊าซ nm 605 เปอร์เซ็นต์ของเซลล์ใน G1/G0, S และ G2/M กำหนดใช้ Modfit LTซอฟต์แวร์ (Verity ซอฟต์แวร์เฮาส์ Topsham, ME สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การวิเคราะห์วงจรมือถือ
หนึ่งล้าน P19 เซลล์เก็บเกี่ยวล้าง
กับพีบีเอสและการแก้ไขโดยการเพิ่ม 70% เย็น (-20ºC) เอทานอล.
ต่อจากนั้นเซลล์ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 850 กรัมจะเอา
เอทานอลล้างครั้งที่สองกับพีบีเอสและ resuspended ที่สุด
ในพีบีเอส 400 ไมโครลิตร . 10 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร RNase (R5000 ซิก) และ
20 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร propidium ไอโอไดด์ (P4864 ซิก) ถูกเพิ่ม
30 นาทีที่37ºC 20 × 103 เหตุการณ์ต่อตัวอย่างได้รับการ
วิเคราะห์โดยใช้การไหล cytometer FACSCalibur (Becton
เด็ตต์, San Jose, CA, USA) ที่มีการกระตุ้น 488 นาโนเมตร
และ 605 นาโนเมตรความยาวคลื่นที่ปล่อยก๊าซเรือนกระจก ร้อยละของเซลล์
ใน G1 / G0, S และ G2 / M ถูกกำหนดโดยใช้ LT Modfit
ซอฟแวร์ (แม่นยำซอฟแวร์เฮ้าส์, Topsham, ME, สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวิเคราะห์วงจร
หนึ่งล้าน p19 เซลล์เก็บล้างด้วย pbs
และคงที่ โดยการเพิ่ม 70% เย็น ( – 20 º C ) เอทานอล
ต่อมาเซลล์มีไฟฟ้าที่ 850 กรัมลบ
เอทานอล ล้างหน้าสองครั้งกับ PBS และในที่สุด resuspended
400 μ L PBS 10 μ g / ml ( r5000 เลส , Sigma ) และ
20 μ g / ml propidium ไอโอไดด์ ( p4864 , Sigma ) มีการเพิ่ม
30 นาทีที่ 37 º 20 C . × 103 ครั้ง ต่อจำนวน
วิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้ facscalibur ไหลใช้โมโน ( เบคตอน
ที่ตั้ง San Jose , CA , USA ) กับคุณ nm กระตุ้นและปล่อยความยาวคลื่น 605 nm
. จำนวนเซลล์ใน G1 / G0
, S และ G2 / M ถูกกำหนดโดยใช้ซอฟต์แวร์มัน
modfit ( หลากหลายซอฟต์แวร์บ้าน topsham , ฉัน , USA )