In this step, successive subcultiva

In this step, successive subcultivation under selective enrichment
conditions was used in order to establish the structurally
stable microbial consortium with high cellulose degrading capability.
A number of microbial communities capable of filter paper
degradation with different degradation rates were obtained from
subcultivation of seed cultures from high-temperature sugarcane
bagasse compost under aerobic static conditions. After several
subcultivations, the most active microbial community, designated
MC3F, was capable of extensive filter paper degradation (>50%)
within 7 d at 50◦C. Based on DGGE patterns, the microbial consortium’s
community structure of MC3F tended to stabilize after
successive subcultivations for more than 20 generations (typical
incubation time of 7 d for each batch cycle). In order to assess the
structural stability of the microbial consortium during subcultivation,
the 16S rDNA PCR products amplified from MC3F collected
from different generations were analyzed by denaturing gradient
gel electrophoresis to compare the community DGGE profiles
[6,25]. In overall, similar DGGE patterns among six generations
(between subcultivations 32 and 42) were observed, indicating
structural stability of the composite microbes co-existing in the
consortium, which comprised mainly of approx. 8 major composite
members (Fig. 1). MC3F could be subcultivated for more than 90
generations with high structural and functional stabilities, i.e. >50%
filter paper degradation after the 7-d incubation period in every
generations with no alteration in DGGE patterns (data not shown).
The result thus suggested that MC3F was stable in terms of microbial
community structure and its cellulolytic activity. The microbial
community was tolerant to freezing at -80 ◦C in PCS medium containing
20% glycerol for at least 1 year with no change in microbial
composition as shown by DGGE patterns of the revived community.
This illustrates the high stability of the microbial community
and allows long-term storage of the seed culture for further experimental
studies and application.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในขั้นตอนนี้ subcultivation ต่อเนื่องภายใต้การตกแต่งที่เลือกใช้เพื่อสร้างสภาวะโครงสร้างconsortium จุลินทรีย์เสถียรภาพกับความสามารถในการย่อยสลายเซลลูโลสสูงจำนวนของจุลินทรีย์ชุมชนสามารถของกระดาษกรองย่อยสลายย่อยสลายแตกต่างราคาที่ได้รับจากsubcultivation วัฒนธรรมเมล็ดจากอ้อยอุณหภูมิสูงปุ๋ยหมักอ้อยคงสภาพแอโรบิก หลังจากหลายsubcultivations จุลินทรีย์ชุมชนมากที่สุด กำหนดMC3F มีความสามารถในการลดกระดาษกรองครอบ (> 50%)ภายใน 7 วันที่ 50◦C อิงจาก DGGE ลาย consortium จุลินทรีย์ของโครงสร้างชุมชนของแนวโน้มที่จะ คงที่ประมาณ MC3Fsubcultivations ต่อเนื่องมากกว่า 20 รุ่น (ปกติกกไข่เวลาของ 7 d สำหรับวงจรแต่ละชุด) เพื่อประเมินผลการโครงสร้างมั่นคงของ consortium จุลินทรีย์ระหว่าง subcultivationขยายผลิตภัณฑ์ PCR 16S rDNA จาก MC3F ที่รวบรวมจากรุ่นต่าง ๆ มาวิเคราะห์ โดย denaturing ไล่ระดับสีอิเจเพื่อเปรียบเทียบโพรไฟล์ DGGE ชุมชน[6,25] . โดยรวม ลวดลายคล้าย DGGE ในหมู่คนรุ่นหก(ระหว่าง subcultivations ที่ 32 และที่ 42) ถูกตั้งข้อสังเกต บ่งชี้โครงสร้างเสถียรภาพของจุลินทรีย์ประกอบร่วมที่มีอยู่ในตัวกิจการร่วมค้า ซึ่งส่วนใหญ่ประกอบด้วยส่วนประกอบหลักประมาณ 8สมาชิก (1 รูป) MC3F อาจจะ subcultivated กว่า 90รุ่น มีโครงสร้าง และการทำงานความเสถียรสูง เช่น > 50%ลดกระดาษกรองหลังจากระยะฟักตัว 7-d ในทุกรุ่นกับไม่เปลี่ยนแปลงในรูปแบบ DGGE (ไม่ได้แสดงข้อมูล)นอกจากนี้ผลจึงแนะนำว่า MC3F เป็นมั่นคงในแง่ของจุลินทรีย์โครงสร้างชุมชนและกิจกรรมของ cellulolytic การจุลินทรีย์ชุมชนคือทนต่อการแช่แข็งที่-80 ◦C ในพีซีที่ประกอบด้วยขนาดกลางกลีเซอรอล 20% อย่างน้อย 1 ปีมีการเปลี่ยนแปลงไม่มีจุลินทรีย์องค์ประกอบดังที่แสดงรูปแบบ DGGE ของชุมชนฟื้นขึ้นมานี้แสดงให้เห็นถึงความมั่นคงสูงของชุมชนจุลินทรีย์และช่วยให้จัดเก็บระยะยาวของเมล็ดสำหรับการทดลองการศึกษาและการประยุกต์ใช้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในขั้นตอนนี้ subcultivation ต่อเนื่องภายใต้การเพิ่มปริมาณการคัดเลือก
เงื่อนไขถูกนำมาใช้เพื่อสร้างโครงสร้าง
สมาคมจุลินทรีย์ที่มั่นคงกับความสามารถในการเซลลูโลสสูงย่อยสลาย.
จำนวนของชุมชนจุลินทรีย์ที่มีความสามารถของตัวกรองกระดาษ
ย่อยสลายที่มีอัตราการย่อยสลายที่แตกต่างกันได้รับจาก
subcultivation ของวัฒนธรรมจากเมล็ดสูง อุณหภูมิอ้อย
ปุ๋ยหมักชานอ้อยภายใต้เงื่อนไขที่คงแอโรบิก หลังจากหลาย
subcultivations ชุมชนจุลินทรีย์ใช้งานมากที่สุดที่กำหนด
MC3F เป็นความสามารถในการย่อยสลายที่กว้างขวางกระดาษกรอง (> 50%)
ภายใน 7 วันที่50◦C ขึ้นอยู่กับรูปแบบ DGGE, สมาคมจุลินทรีย์ของ
โครงสร้างของชุมชน MC3F มีแนวโน้มที่จะมีเสถียรภาพหลังจาก
subcultivations ต่อเนื่องมานานกว่า 20 คนรุ่น (ทั่วไป
เวลาบ่ม 7 วันสำหรับรอบชุดแต่ละคน) เพื่อประเมิน
ความมั่นคงของโครงสร้างของสมาคมจุลินทรีย์ในช่วง subcultivation,
ผลิตภัณฑ์ 16S rDNA PCR ขยายจาก MC3F เก็บรวบรวม
จากรุ่นที่แตกต่างนำมาวิเคราะห์โดย denaturing ลาด
ข่าวคราวเพื่อเปรียบเทียบโปรไฟล์ชุมชน DGGE
[6,25] ในภาพรวมรูปแบบที่คล้ายกันในหมู่ DGGE หกรุ่น
(ระหว่าง subcultivations 32 และ 42) ถูกตั้งข้อสังเกตแสดงให้เห็น
เสถียรภาพของโครงสร้างของจุลินทรีย์คอมโพสิตอยู่ร่วมใน
กิจการร่วมค้าซึ่งส่วนใหญ่ประกอบด้วยประมาณ 8 คอมโพสิตที่สำคัญ
สมาชิก (รูปที่ 1). MC3F อาจจะ subcultivated มากกว่า 90
คนรุ่นที่มีเสถียรภาพโครงสร้างและการทำงานสูงเช่น> 50%
การย่อยสลายกระดาษกรองหลังจากที่ระยะฟักตัว 7-D ในทุก
ชั่วอายุคนกับการเปลี่ยนแปลงที่ไม่มีในรูปแบบ DGGE (ไม่ได้แสดงข้อมูล).
ผลที่ได้จึงชี้ให้เห็นว่า MC3F มีเสถียรภาพในแง่ของจุลินทรีย์
โครงสร้างชุมชนและกิจกรรมของเซลลูโลส จุลินทรีย์
ชุมชนใจกว้างที่จะแช่แข็งที่ -80 ◦Cในพีซีขนาดกลางที่มี
กลีเซอรีน 20% เป็นเวลาอย่างน้อย 1 ปีและมีการเปลี่ยนแปลงในจุลินทรีย์ที่ไม่มี
องค์ประกอบที่แสดงโดยรูปแบบของชุมชน DGGE ฟื้นขึ้นมา.
นี้แสดงให้เห็นถึงความมั่นคงสูงของชุมชนจุลินทรีย์
และ ช่วยให้การจัดเก็บระยะยาวของวัฒนธรรมเมล็ดพันธุ์สำหรับการทดลองต่อ
การศึกษาและการประยุกต์ใช้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในขั้นตอนนี้ subcultivation ต่อเนื่องภายใต้การเลือกเงื่อนไขที่ใช้ในการสร้างโครงสร้างกลุ่มจุลินทรีย์ที่มีความสามารถสูงมีเสถียรภาพเซลลูโลสสลาย .หมายเลขของชุมชนที่สามารถกรองจุลินทรีย์การย่อยสลายด้วยอัตราการย่อยสลายต่าง ๆ ที่ได้รับจากsubcultivation พันธุ์อ้อยจากอุณหภูมิสูงวัฒนธรรมชานอ้อยหมักภายใต้สภาวะคงที่แอโรบิค หลังจากที่หลาย ๆsubcultivations , ชุมชนจุลินทรีย์ที่ใช้งานมากที่สุด เขตmc3f , ความสามารถในการย่อยสลายละเอียดกรองกระดาษ ( > 50 % )ภายใน 7 D 50 ◦ C ตามรูปแบบการทดลอง , กลุ่มจุลินทรีย์ของโครงสร้างชุมชนของ mc3f มีแนวโน้มทรงตัว หลังจากsubcultivations ต่อเนื่องมากกว่า 20 รุ่น ( โดยทั่วไประยะเวลา 7 D สำหรับแต่ละชุดวงจร ) เพื่อที่จะประเมินเสถียรภาพของโครงสร้างของกลุ่มจุลินทรีย์ใน subcultivation ,ช่วง 16S rDNA ) ผลิตภัณฑ์จากการเพิ่ม mc3f รวบรวมจากรุ่นที่แตกต่างกันโดยใช้ี่ไล่ระดับgel electrophoresis เปรียบเทียบการทดลองโปรไฟล์ของชุมชน[ 6,25 ] โดยรวม รูปแบบการทดลองที่คล้ายกันของหกรุ่น( ระหว่าง subcultivations 32 และ 42 ) พบว่าเสถียรภาพของโครงสร้างคอมโพสิตจุลินทรีย์ที่มีอยู่ในบริษัทConsortium ซึ่งประกอบด้วยส่วนใหญ่ของประมาณ 8 หลัก คอมโพสิตสมาชิก ( รูปที่ 1 ) mc3f สามารถ subcultivated มากกว่า 90รุ่นที่มีโครงสร้างและการทำงานที่มีต่อ > 50% )กรองกระดาษลายหลัง 7-d ฟักตัวในทุกรุ่นที่ไม่มีการเปลี่ยนแปลงในรูปแบบการทดลอง ( ข้อมูลไม่แสดง )ผลจึงแนะนำว่า mc3f คงที่ในแง่ของจุลินทรีย์โครงสร้างชุมชน และกิจกรรมทดลองของ จุลินทรีย์ชุมชนใจกว้างเพื่อแช่แข็งที่ - 80 องศาเซลเซียสในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มี◦พีซี20 % กลีเซอรอลอย่างน้อย 1 ปี โดยไม่มีการเปลี่ยนแปลงของจุลินทรีย์องค์ประกอบดังที่แสดงโดยการทดลองรูปแบบของการฟื้นฟูชุมชนนี้แสดงให้เห็นถึงเสถียรภาพสูงของชุมชนจุลินทรีย์และช่วยให้การจัดเก็บข้อมูลระยะยาวของการเพาะเมล็ดไปทดลองการศึกษาและการประยุกต์ใช้