Three phase partitioning (TPP) uses

Three phase partitioning (TPP) uses t-butanol and ammonium sulfate to precipitate enzymes and proteins from aqueous solutions. The method is useful both upstream with crude samples and downstream where a scaleable simple step is needed. About 25 enzymes and proteins have been isolated by various laboratories using TPP-t-butanol. The relation of t-butanol used in TPP, with n-butanol used as an extraction agent from Morton's work, is reviewed. Some t-butanol appears bound to TPP-precipitated proteins which are actually protein-t-butanol coprecipitates. They float above denser aqueous salts because bound t-butanol increases their buoyancy, similar to the behavior of many lipoproteins. On redissolving TPP-precipitated enzymes, total and specific activities usually are regained and sometimes increased. Sulfate ion-in large concentrations-likely exerts itself through its kosmotropic action as in conventional salting out. t-Butanol likewise appears to be a kosmotrope and crowding agent at room temperature or above, whereas C1 and C2 cosolvents (e.g., ethanol) do not so behave except at near or below zero temperatures. However, kosmotropy is not the entire origin of TPP, nor probably of conventional salting out. Electrostatic forces, capacity to force protein conformation tightening and protein hydration shifts, also contribute. Electrostatic forces, and the tendency for salt ions to bind and tighten protein molecule conformation, are indicated by the sharp pH dependency of both conventional salting out and TPP, around pH regions where proteins undergo conformation changes. Sulfate anion is densely-perhaps extraordinarily-hydrated, adding much to its effective size, and therefore it has a tendency to crowd or exclude proteins, when sulfate concentrations are in the 0.5 to 3 M range.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สามเฟสแบ่งพาร์ติชัน (TPP) ใช้บิวทานอ t และแอมโมเนียซัลเฟต precipitate เอนไซม์และโปรตีนจากโซลูชั่นอควี วิธีมีประโยชน์ขั้นต้นน้ำกับตัวอย่างน้ำมัน และปลายน้ำขั้นตอนง่ายปรับขนาดเป็นสิ่งจำเป็น เอนไซม์และโปรตีนประมาณ 25 ได้รับแยกต่างหาก โดยห้องปฏิบัติการต่าง ๆ ใช้ TPP-t-บิวทานอ เป็นทบทวนความสัมพันธ์ของ t-บิวทานอที่ใช้ใน TPP เอ็นบิวทานอที่ใช้เป็นตัวแทนที่แยกจากการทำงานของมอร์ตัน บางทีบิวทานอแล้วผูกให้โปรตีนตกตะกอน TPP ที่จริงโปรตีน-t-บิวทานอ coprecipitates พวกเขาลอยอยู่เหนือเกลือ denser อควีเนื่องจาก t-บิวทานอผูกเพิ่มการพยุง คล้ายกับพฤติกรรมของ lipoproteins หลาย ใน redissolving TPP ตกตะกอนเอนไซม์ รวมเฉพาะกิจกรรม และมักจะเป็นจาก และบางครั้งเพิ่มขึ้น ซัลเฟตไอออนในขนาดใหญ่มีแนวโน้มความเข้มข้น exerts เองผ่านการดำเนินการของ kosmotropic ในมารีซอลทิงธรรมดาออก t-บิวทานอทำนองเดียวกันปรากฏ kosmotrope และแทนกครั้ง ที่อุณหภูมิห้อง หรือเหนือ กว่า ในขณะที่ cosolvents C1 และ C2 (เช่น เอทานอล) ไม่ให้ทำงานยกเว้นที่ใกล้ หรือ ใต้อุณหภูมิเป็นศูนย์ อย่างไรก็ตาม kosmotropy ได้จุดเริ่มต้นทั้งหมด ของ TPP หรืออาจจะ ของมารีซอลทิงธรรมดาออก งานกองกำลัง กำลังแรงขัน conformation ของโปรตีนและโปรตีนกะไล่น้ำ มีส่วนร่วมยัง กองไฟฟ้าสถิต และแนวโน้มสำหรับประจุเกลือ การผูกกระชับโปรตีนโมเลกุล conformation ระบุ โดยอ้างอิงค่า pH คมทั้งมารีซอลทิงธรรมดาออกและ TPP รอบภูมิภาค pH ที่โปรตีนรับเปลี่ยนแปลง conformation Anion ซัลเฟตจะหนาแน่นไปบางทีรอง-hydrated เพิ่มขนาด มีประสิทธิภาพมาก และดังนั้นจึง มีแนวโน้มที่จะรุม หรือแยกโปรตีน เมื่อความเข้มข้นของซัลเฟตในช่วง 0.5-3 เมตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แบ่งสามเฟส (TPP) ใช้เสื้อบิวทานอและแอมโมเนียมซัลเฟตที่จะเกิดการตกตะกอนเอนไซม์และโปรตีนจากการแก้ปัญหาน้ำ วิธีที่จะเป็นประโยชน์ทั้งกับกลุ่มตัวอย่างต้นน้ำและปลายน้ำน้ำมันดิบที่ปรับขนาดได้ขั้นตอนง่ายๆเป็นสิ่งจำเป็น ประมาณ 25 เอนไซม์และโปรตีนที่ได้รับการแยกออกโดยห้องปฏิบัติการต่าง ๆ โดยใช้ TPP-เสื้อบิวทานอ ความสัมพันธ์ของเสื้อบิวทานอที่ใช้ใน TPP กับ n-butanol ใช้เป็นตัวแทนสกัดจากการทำงานของมอร์ตัน, มีการทบทวน บางคนเสื้อบิวทานอปรากฏผูกไว้กับโปรตีน TPP-ตกตะกอนที่เป็นจริง coprecipitates โปรตีนเสื้อบิวทานอ พวกเขาลอยอยู่เหนือน้ำเกลือทึบเพราะผูกพันเสื้อบิวทานอเพิ่มการพยุงของพวกเขาคล้ายกับพฤติกรรมของ lipoproteins จำนวนมาก ใน redissolving เอนไซม์ TPP-ตกตะกอนกิจกรรมรวมและเฉพาะเจาะจงมักจะได้รับคืนและเพิ่มบางครั้ง ซัลเฟตไอออนขนาดใหญ่มีแนวโน้มที่ความเข้มข้น-ออกแรงตัวเองผ่านการกระทำที่เป็น kosmotropic ในเกลือธรรมดาออก เสื้อ Butanol เช่นเดียวกันดูเหมือนจะเป็น kosmotrope และตัวแทน crowding ที่อุณหภูมิห้องหรือสูงกว่าในขณะที่ C1 และ C2 cosolvents (เช่นเอทานอล) ไม่ได้เพื่อให้ประพฤติยกเว้นที่อยู่ใกล้หรืออุณหภูมิต่ำกว่าศูนย์ อย่างไรก็ตาม kosmotropy ไม่ได้เป็นจุดเริ่มต้นทั้งหมดของ TPP หรืออาจจะเป็นเกลือของเดิมออก กองกำลังไฟฟ้​​าสถิต, ความสามารถในการบังคับให้โปรตีนกระชับโครงสร้างและการเปลี่ยนแปลงความชุ่มชื้นโปรตีนยังนำ กองกำลังไฟฟ้​​าสถิตและแนวโน้มไอออนเกลือในการผูกและกระชับโครงสร้างโมเลกุลโปรตีนจะถูกระบุโดยพึ่งพาค่า pH คมชัดของทั้งเกลือธรรมดาออกมาและ TPP รอบภูมิภาคท​​ี่มีค่า pH โปรตีนได้รับการเปลี่ยนแปลงโครงสร้าง ไอออนซัลเฟตหนาแน่นเป็นพิเศษอาจจะ-ไฮเดรทเพิ่มมากขนาดที่มีประสิทธิภาพและดังนั้นจึงมีแนวโน้มที่จะฝูงชนหรือไม่รวมโปรตีนเมื่อความเข้มข้นของซัลเฟตอยู่ใน 0.5-3 M ช่วง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สามเฟส ( TPP ) และการใช้ t-butanol แอมโมเนียม ซัลเฟตตกตะกอนโปรตีนและเอนไซม์จากสารละลายน้ำ วิธีการที่เป็นประโยชน์ทั้งต้นและท้ายด้วยตัวอย่างดิบที่ปรับขนาดได้ง่ายขั้นตอนที่จำเป็น 25 เกี่ยวกับเอนไซม์และโปรตีนได้ถูกแยกโดยห้องปฏิบัติการต่าง ๆ โดยใช้ tpp-t-butanol . ความสัมพันธ์ของ t-butanol ใช้ใน TPP ,กับ n-butanol ใช้เป็นตัวแทนสกัดจากมอร์ตันคืองาน คือดู บาง t-butanol ปรากฏผูก TPP ตะกอนโปรตีนซึ่งมีจริง protein-t-butanol coprecipitates . มันลอยเหนือน้ำเกลือเพราะผูก t-butanol หนาแน่นเพิ่มรายได้ของพวกเขา คล้ายกับพฤติกรรมของหลาย lipoproteins . ใน redissolving TPP ตกตะกอนเอนไซม์กิจกรรมทั้งหมดที่เฉพาะเจาะจงมักจะมีคืนและบางครั้งมากขึ้น ซัลเฟตไอออนใน concentrations ขนาดใหญ่มักปรากฏตัวผ่านการกระทำ kosmotropic ของมันเป็นปกติในการออก t-butanol เช่นเดียวกัน ปรากฏเป็น kosmotrope กดดันเจ้าหน้าที่ และอุณหภูมิห้อง ขึ้นไป ส่วน C1 และ C2 ขว - ( เช่นเอทานอล ) ไม่ก็ทำตัว ยกเว้นที่ใกล้หรือด้านล่างศูนย์อุณหภูมิอย่างไรก็ตาม kosmotropy ไม่ใช่จุดเริ่มต้นทั้งหมดของ TPP หรืออาจปกติเกลือออก ไฟฟ้าสถิตหน่วยความจุให้กระชับโครงสร้างของโปรตีน และโปรตีนกะเดรยังสนับสนุน ไฟฟ้าสถิต กองกำลัง และแนวโน้มสำหรับเกลือและไอออนผูกกระชับโครงสร้างโมเลกุลโปรตีน ,จะแสดงโดย คม อ ทั้งปกติ และการพึ่งพาของเกลือออก TPP รอบอ ภูมิภาคที่โปรตีนผ่านโครงสร้างการเปลี่ยนแปลง ซัลเฟตไอออนยิบบางที hydrated เป็นพิเศษเพิ่มมากขนาดของมันที่มีประสิทธิภาพและดังนั้นจึงมีแนวโน้มที่จะฝูงชนหรือแยกโปรตีน เมื่อซัลเฟตความเข้มข้น 0.5 - 3 เมตร ในช่วง