- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
2.3. Extracts of P. edulis leavesTh
2.3. Extracts of P. edulis leaves
The aqueous extract was prepared by boiling 1 g of sample and
25 mL of water at 100 °C. This extract was used to the analysis of
total phenolic, antioxidant potential, and phenolic compound identification
by HPLC-PDA and MS/MS. Aqueous extracts for animal experiment
were prepared according to the results of IC50 of DDPH assay and just
before giving to animals.
2.4. Total phenolic content
The total phenolic content of the P. edulis aqueous extract was determined
according to Folin–Ciocalteu's method (Swain & Hillis, 1959),
with some modifications. In a vial, 50 μL of extract, 800 μL distilled
water and 25 μL (0.25 N) Folin–Ciocalteu's reagent were mixed and incubated
at room temperature for 3 min. Then, 100 μL sodium carbonate
solution (1 N) was added and further incubated for 2 h at room temperature.
The absorbance was read at 725 nm in a microplate reader
Synergy HT, Biotek (Winooski, USA); with Gen5™ 2.0 data analysis software
spectrophotometer. Gallic acid was used in a standard curve and
the results were expressed in terms of gallic acid equivalent (GAE g−1
).
2.5. Determination of antioxidant potential in P. edulis leaf
aqueous extract
The readings of absorbance and fluorescence were done in a
microplate reader Synergy HT, Biotek (Winooski, USA); with Gen5™
2.0 data analysis software spectrophotometer.
2.5.1. DPPH free radical scavenging activity
The free radical scavenging activity of the extracts was determined
based on the DPPH method (Braca et al., 2001). The extract (33 μL) was
added in 1.3 mL DPPH solution diluted in methanol (0.024 mg mL−1
),
shaking and incubated for 30 min in dark, and absorbance was measured
at 515 nm. The percentage scavenging radical was calculated
from [(A0−A1)/A0]×100, where A0 is the absorbance of the control,
and A1 is the absorbance of the extract.
2.5.2. FRAP assay (ferric reducing antioxidant power)
The ferric reducing ability of tissues was determined by FRAP method
(Benzie & Strain, 1996), with adaptations. In the dark, FRAP reagent
was made with 300 mmol L−1 acetate buffer (pH 3.6), 10 mmol TPTZ
in a 40 mmol L−1 HCl solution and 20 mmol L−1 FeCl3. Sample or standard
solutions, ultrapure water and FRAP reagent were mixed and kept
in a water bath for 30 min at 37 °C. After cooling to room temperature,
samples and standard were read at 595 nm. The Trolox standard curve
was made (10–800 μmol TE). Results were expressed in μmol Trolox
equivalent (TE) mL−1
.
2.5.3. TEAC (Trolox equivalent antioxidant capacity) assay
Tissues' TEAC levels were determined based on the reports from
Rufino et al. (2010) with modifications. The ABTS solution was prepared
by mixing 5 mL of 7.0 mmol ABTS and 88 μL of 145 mmol potassium
persulfate solution, which was left to react for 12–16 h, at room temperature
in the dark. Ethanol (99.5%) was added to the solution until absorbance
reached 0.700±0.05 at 734 nm. Trolox (10–800 μmol TE) was
used as reference antioxidant. The ABTS solution was added to the
sample or standard solutions and reacted for 6 min before reading
at 734 nm, room temperature. Results expressed in μmol Trolox equivalent
(TE) mL−1
.
2.5.4. ORAC assay (hydrophilic oxygen radical absorbance capacity)
In the dark, 20 μL of sample (prepared as described above), 120 μL of
fluorescein in phosphate buffer — PB (pH 7.4), and 60 μL of AAPH were
added in black microplates. The microplate reader was adjusted as previously
described (fluorescent filters, excitation wavelength, 485 nm;
emission wavelength, 520 nm) (Prior et al., 2003). ORAC values were
expressed in μmol Trolox equivalent (TE) per mL serum by using the
standard curves (2.5–50.0 μM TE) (Davalos, Gomez-Cordoves, &
Bartolome, 2004; Prior et al., 2003)
The aqueous extract was prepared by boiling 1 g of sample and
25 mL of water at 100 °C. This extract was used to the analysis of
total phenolic, antioxidant potential, and phenolic compound identification
by HPLC-PDA and MS/MS. Aqueous extracts for animal experiment
were prepared according to the results of IC50 of DDPH assay and just
before giving to animals.
2.4. Total phenolic content
The total phenolic content of the P. edulis aqueous extract was determined
according to Folin–Ciocalteu's method (Swain & Hillis, 1959),
with some modifications. In a vial, 50 μL of extract, 800 μL distilled
water and 25 μL (0.25 N) Folin–Ciocalteu's reagent were mixed and incubated
at room temperature for 3 min. Then, 100 μL sodium carbonate
solution (1 N) was added and further incubated for 2 h at room temperature.
The absorbance was read at 725 nm in a microplate reader
Synergy HT, Biotek (Winooski, USA); with Gen5™ 2.0 data analysis software
spectrophotometer. Gallic acid was used in a standard curve and
the results were expressed in terms of gallic acid equivalent (GAE g−1
).
2.5. Determination of antioxidant potential in P. edulis leaf
aqueous extract
The readings of absorbance and fluorescence were done in a
microplate reader Synergy HT, Biotek (Winooski, USA); with Gen5™
2.0 data analysis software spectrophotometer.
2.5.1. DPPH free radical scavenging activity
The free radical scavenging activity of the extracts was determined
based on the DPPH method (Braca et al., 2001). The extract (33 μL) was
added in 1.3 mL DPPH solution diluted in methanol (0.024 mg mL−1
),
shaking and incubated for 30 min in dark, and absorbance was measured
at 515 nm. The percentage scavenging radical was calculated
from [(A0−A1)/A0]×100, where A0 is the absorbance of the control,
and A1 is the absorbance of the extract.
2.5.2. FRAP assay (ferric reducing antioxidant power)
The ferric reducing ability of tissues was determined by FRAP method
(Benzie & Strain, 1996), with adaptations. In the dark, FRAP reagent
was made with 300 mmol L−1 acetate buffer (pH 3.6), 10 mmol TPTZ
in a 40 mmol L−1 HCl solution and 20 mmol L−1 FeCl3. Sample or standard
solutions, ultrapure water and FRAP reagent were mixed and kept
in a water bath for 30 min at 37 °C. After cooling to room temperature,
samples and standard were read at 595 nm. The Trolox standard curve
was made (10–800 μmol TE). Results were expressed in μmol Trolox
equivalent (TE) mL−1
.
2.5.3. TEAC (Trolox equivalent antioxidant capacity) assay
Tissues' TEAC levels were determined based on the reports from
Rufino et al. (2010) with modifications. The ABTS solution was prepared
by mixing 5 mL of 7.0 mmol ABTS and 88 μL of 145 mmol potassium
persulfate solution, which was left to react for 12–16 h, at room temperature
in the dark. Ethanol (99.5%) was added to the solution until absorbance
reached 0.700±0.05 at 734 nm. Trolox (10–800 μmol TE) was
used as reference antioxidant. The ABTS solution was added to the
sample or standard solutions and reacted for 6 min before reading
at 734 nm, room temperature. Results expressed in μmol Trolox equivalent
(TE) mL−1
.
2.5.4. ORAC assay (hydrophilic oxygen radical absorbance capacity)
In the dark, 20 μL of sample (prepared as described above), 120 μL of
fluorescein in phosphate buffer — PB (pH 7.4), and 60 μL of AAPH were
added in black microplates. The microplate reader was adjusted as previously
described (fluorescent filters, excitation wavelength, 485 nm;
emission wavelength, 520 nm) (Prior et al., 2003). ORAC values were
expressed in μmol Trolox equivalent (TE) per mL serum by using the
standard curves (2.5–50.0 μM TE) (Davalos, Gomez-Cordoves, &
Bartolome, 2004; Prior et al., 2003)
0/5000
2.3. Extracts of P. edulis leavesThe aqueous extract was prepared by boiling 1 g of sample and25 mL of water at 100 °C. This extract was used to the analysis oftotal phenolic, antioxidant potential, and phenolic compound identificationby HPLC-PDA and MS/MS. Aqueous extracts for animal experimentwere prepared according to the results of IC50 of DDPH assay and justbefore giving to animals.2.4. Total phenolic contentThe total phenolic content of the P. edulis aqueous extract was determinedaccording to Folin–Ciocalteu's method (Swain & Hillis, 1959),with some modifications. In a vial, 50 μL of extract, 800 μL distilledwater and 25 μL (0.25 N) Folin–Ciocalteu's reagent were mixed and incubatedat room temperature for 3 min. Then, 100 μL sodium carbonatesolution (1 N) was added and further incubated for 2 h at room temperature.The absorbance was read at 725 nm in a microplate readerSynergy HT, Biotek (Winooski, USA); with Gen5™ 2.0 data analysis softwarespectrophotometer. Gallic acid was used in a standard curve andthe results were expressed in terms of gallic acid equivalent (GAE g−1).2.5. Determination of antioxidant potential in P. edulis leafaqueous extractThe readings of absorbance and fluorescence were done in amicroplate reader Synergy HT, Biotek (Winooski, USA); with Gen5™2.0 data analysis software spectrophotometer.2.5.1. DPPH free radical scavenging activityThe free radical scavenging activity of the extracts was determinedbased on the DPPH method (Braca et al., 2001). The extract (33 μL) wasadded in 1.3 mL DPPH solution diluted in methanol (0.024 mg mL−1),shaking and incubated for 30 min in dark, and absorbance was measuredat 515 nm. The percentage scavenging radical was calculatedfrom [(A0−A1)/A0]×100, where A0 is the absorbance of the control,and A1 is the absorbance of the extract.2.5.2. FRAP assay (ferric reducing antioxidant power)The ferric reducing ability of tissues was determined by FRAP method(Benzie & Strain, 1996), with adaptations. In the dark, FRAP reagentwas made with 300 mmol L−1 acetate buffer (pH 3.6), 10 mmol TPTZin a 40 mmol L−1 HCl solution and 20 mmol L−1 FeCl3. Sample or standardsolutions, ultrapure water and FRAP reagent were mixed and keptin a water bath for 30 min at 37 °C. After cooling to room temperature,samples and standard were read at 595 nm. The Trolox standard curvewas made (10–800 μmol TE). Results were expressed in μmol Troloxequivalent (TE) mL−1.2.5.3. TEAC (Trolox equivalent antioxidant capacity) assayTissues' TEAC levels were determined based on the reports fromRufino et al. (2010) with modifications. The ABTS solution was preparedby mixing 5 mL of 7.0 mmol ABTS and 88 μL of 145 mmol potassiumpersulfate solution, which was left to react for 12–16 h, at room temperaturein the dark. Ethanol (99.5%) was added to the solution until absorbance
reached 0.700±0.05 at 734 nm. Trolox (10–800 μmol TE) was
used as reference antioxidant. The ABTS solution was added to the
sample or standard solutions and reacted for 6 min before reading
at 734 nm, room temperature. Results expressed in μmol Trolox equivalent
(TE) mL−1
.
2.5.4. ORAC assay (hydrophilic oxygen radical absorbance capacity)
In the dark, 20 μL of sample (prepared as described above), 120 μL of
fluorescein in phosphate buffer — PB (pH 7.4), and 60 μL of AAPH were
added in black microplates. The microplate reader was adjusted as previously
described (fluorescent filters, excitation wavelength, 485 nm;
emission wavelength, 520 nm) (Prior et al., 2003). ORAC values were
expressed in μmol Trolox equivalent (TE) per mL serum by using the
standard curves (2.5–50.0 μM TE) (Davalos, Gomez-Cordoves, &
Bartolome, 2004; Prior et al., 2003)
reached 0.700±0.05 at 734 nm. Trolox (10–800 μmol TE) was
used as reference antioxidant. The ABTS solution was added to the
sample or standard solutions and reacted for 6 min before reading
at 734 nm, room temperature. Results expressed in μmol Trolox equivalent
(TE) mL−1
.
2.5.4. ORAC assay (hydrophilic oxygen radical absorbance capacity)
In the dark, 20 μL of sample (prepared as described above), 120 μL of
fluorescein in phosphate buffer — PB (pH 7.4), and 60 μL of AAPH were
added in black microplates. The microplate reader was adjusted as previously
described (fluorescent filters, excitation wavelength, 485 nm;
emission wavelength, 520 nm) (Prior et al., 2003). ORAC values were
expressed in μmol Trolox equivalent (TE) per mL serum by using the
standard curves (2.5–50.0 μM TE) (Davalos, Gomez-Cordoves, &
Bartolome, 2004; Prior et al., 2003)
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.3 สารสกัดจากใบ edulis
พีสารสกัดน้ำถูกจัดทำขึ้นโดยการต้ม1 กรัมของกลุ่มตัวอย่างและ
25 มิลลิลิตรของน้ำที่ 100 องศาเซลเซียส สารสกัดนี้ถูกใช้ในการวิเคราะห์ของฟีนอลรวมสารต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพและบัตรประจำตัวสารประกอบฟีนอลโดยวิธีHPLC-PDA และ MS / MS สารสกัดด้วยน้ำสำหรับสัตว์ทดลองที่ถูกจัดทำขึ้นตามผลการทดสอบของ IC50 DDPH และเพียงแค่ก่อนที่จะให้สัตว์. 2.4 รวมเนื้อหาฟีนอลปริมาณฟีนอลทั้งหมดของ edulis พีสารสกัดถูกกำหนดตามวิธีFolin-Ciocalteu ของ (ลูกทุ่งและ Hillis 1959) มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง ในขวด 50 ไมโครลิตรของสารสกัดจาก 800 ไมโครลิตรกลั่นน้ำและ25 ไมโครลิตร (0.25 N) สาร Folin-Ciocalteu ของถูกผสมและบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา3 นาที จากนั้น 100 ไมโครลิตรโซเดียมคาร์บอเนตการแก้ปัญหา(1 N) ถูกบันทึกและบ่มต่อไปเป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง. การดูดกลืนแสงได้อ่านที่ 725 นาโนเมตรอ่าน microplate Synergy HT, Biotek (นุสหรัฐอเมริกา); กับ Gen5 ™ 2.0 การวิเคราะห์ข้อมูลซอฟต์แวร์spectrophotometer กรดฝรั่งเศสที่ใช้ในโค้งมาตรฐานและผลที่ถูกแสดงในรูปของกรดเทียบเท่าฝรั่งเศส (GAE กรัม-1). 2.5 การตรวจหาสารต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพในใบ edulis พีน้ำสกัดอ่านของการดูดกลืนแสงและเรืองแสงได้ทำในผู้อ่านmicroplate Synergy HT, Biotek (นุสหรัฐอเมริกา); กับ Gen5 ™ 2.0 ข้อมูล spectrophotometer ซอฟต์แวร์การวิเคราะห์. 2.5.1 DPPH ฟรีกิจกรรมต้านอนุมูลกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดที่ถูกกำหนดตามวิธีDPPH (ที่ Braca et al., 2001) สารสกัด (33 ไมโครลิตร) ถูกเพิ่มเข้ามาในการแก้ปัญหา1.3 มิลลิลิตร DPPH เจือจางในเมทานอล (0.024 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร-1), สั่นและบ่มเป็นเวลา 30 นาทีในที่มืดและการดูดกลืนแสงวัดที่515 นาโนเมตร ร้อยละไล่รุนแรงที่คำนวณได้จาก [(A0-A1) / A0] × 100 ที่ A0 คือการดูดกลืนแสงของตัวควบคุม, และ A1 คือการดูดกลืนแสงของสารสกัดที่. 2.5.2 ทดสอบ FRAP (ferric ลดอำนาจสารต้านอนุมูลอิสระ) ธาตุเหล็กลดความสามารถของเนื้อเยื่อถูกกำหนดโดยวิธี FRAP (Benzie และสายพันธุ์ 1996) ที่มีการปรับตัว ในที่มืด, น้ำยา FRAP ถูกทำให้มี 300 มิลลิโมล L-1 บัฟเฟอร์อะซิเตท (pH 3.6), 10 มิลลิโมล TPTZ ใน 40 มิลลิโมล L-1 แก้ปัญหา HCl และ 20 มิลลิโมล L-1 FeCl3 ตัวอย่างหรือมาตรฐานการแก้ปัญหาน้ำบริสุทธิ์และสาร FRAP ถูกผสมและเก็บไว้ในอ่างน้ำเป็นเวลา30 นาทีที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส หลังจากที่การระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้องตัวอย่างและมาตรฐานอ่านได้ที่ 595 นาโนเมตร โค้งมาตรฐาน Trolox ถูกสร้างขึ้น (10-800 ไมโครโมล TE) ผลลัพธ์ที่ได้แสดงในไมโครโมล Trolox เทียบเท่า (TE) mL-1. 2.5.3 TEAC (Trolox สารต้านอนุมูลอิสระเทียบเท่า) ทดสอบเนื้อเยื่อระดับTEAC ได้รับการพิจารณาตามรายงานจากRufino et al, (2010) มีการปรับเปลี่ยน วิธีการแก้ปัญหา ABTS ถูกจัดทำขึ้นโดยการผสม5 มิลลิลิตร 7.0 มิลลิโมล ABTS และ 88 ไมโครลิตร 145 มิลลิโมลโพแทสเซียมแก้ปัญหาเพอร์ซัลเฟตซึ่งถูกทิ้งให้ตอบสนองสำหรับ12-16 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้องในที่มืด เอทานอล (99.5%) ถูกบันทึกอยู่ในการแก้ปัญหาการดูดกลืนแสงจนกระทั่งถึง0.700 ± 0.05 ที่ 734 นาโนเมตร Trolox (10-800 ไมโครโมล TE) ถูกนำมาใช้เป็นสารต้านอนุมูลอิสระอ้างอิง วิธีการแก้ปัญหา ABTS ถูกเพิ่มลงในตัวอย่างหรือการแก้ปัญหาที่ได้มาตรฐานและมีปฏิกิริยาตอบสนองเป็นเวลา6 นาทีก่อนที่จะอ่านที่734 นาโนเมตรที่อุณหภูมิห้อง ผลที่แสดงออกใน Trolox เทียบเท่าไมโครโมล(TE) mL-1. 2.5.4 ทดสอบ ORAC (ออกซิเจนน้ำความจุการดูดกลืนแสงที่รุนแรง) ในที่มืด 20 ไมโครลิตรของกลุ่มตัวอย่าง (จัดทำขึ้นตามที่อธิบายไว้ข้างต้น) 120 ไมโครลิตรของfluorescein ในบัฟเฟอร์ฟอสเฟต - PB (pH 7.4) และ 60 ไมโครลิตรของ AAPH ถูกเพิ่มเข้ามาในสีดำmicroplates ผู้อ่าน microplate ปรับเป็นก่อนหน้านี้อธิบาย(กรองเรืองแสงความยาวคลื่นกระตุ้น 485 นาโนเมตร; ความยาวคลื่นปล่อยก๊าซเรือนกระจก 520 นาโนเมตร) (. ก่อน, et al, 2003) ค่า ORAC ถูกแสดงในTrolox เทียบเท่าไมโครโมล (TE) ต่อมิลลิลิตรซีรั่มโดยใช้เส้นโค้งมาตรฐาน(2.5-50.0 ไมครอน TE) (Davalos โกเมซ-Cordoves และBartolome 2004. ก่อน, et al, 2003)
พีสารสกัดน้ำถูกจัดทำขึ้นโดยการต้ม1 กรัมของกลุ่มตัวอย่างและ
25 มิลลิลิตรของน้ำที่ 100 องศาเซลเซียส สารสกัดนี้ถูกใช้ในการวิเคราะห์ของฟีนอลรวมสารต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพและบัตรประจำตัวสารประกอบฟีนอลโดยวิธีHPLC-PDA และ MS / MS สารสกัดด้วยน้ำสำหรับสัตว์ทดลองที่ถูกจัดทำขึ้นตามผลการทดสอบของ IC50 DDPH และเพียงแค่ก่อนที่จะให้สัตว์. 2.4 รวมเนื้อหาฟีนอลปริมาณฟีนอลทั้งหมดของ edulis พีสารสกัดถูกกำหนดตามวิธีFolin-Ciocalteu ของ (ลูกทุ่งและ Hillis 1959) มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง ในขวด 50 ไมโครลิตรของสารสกัดจาก 800 ไมโครลิตรกลั่นน้ำและ25 ไมโครลิตร (0.25 N) สาร Folin-Ciocalteu ของถูกผสมและบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา3 นาที จากนั้น 100 ไมโครลิตรโซเดียมคาร์บอเนตการแก้ปัญหา(1 N) ถูกบันทึกและบ่มต่อไปเป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง. การดูดกลืนแสงได้อ่านที่ 725 นาโนเมตรอ่าน microplate Synergy HT, Biotek (นุสหรัฐอเมริกา); กับ Gen5 ™ 2.0 การวิเคราะห์ข้อมูลซอฟต์แวร์spectrophotometer กรดฝรั่งเศสที่ใช้ในโค้งมาตรฐานและผลที่ถูกแสดงในรูปของกรดเทียบเท่าฝรั่งเศส (GAE กรัม-1). 2.5 การตรวจหาสารต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพในใบ edulis พีน้ำสกัดอ่านของการดูดกลืนแสงและเรืองแสงได้ทำในผู้อ่านmicroplate Synergy HT, Biotek (นุสหรัฐอเมริกา); กับ Gen5 ™ 2.0 ข้อมูล spectrophotometer ซอฟต์แวร์การวิเคราะห์. 2.5.1 DPPH ฟรีกิจกรรมต้านอนุมูลกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดที่ถูกกำหนดตามวิธีDPPH (ที่ Braca et al., 2001) สารสกัด (33 ไมโครลิตร) ถูกเพิ่มเข้ามาในการแก้ปัญหา1.3 มิลลิลิตร DPPH เจือจางในเมทานอล (0.024 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร-1), สั่นและบ่มเป็นเวลา 30 นาทีในที่มืดและการดูดกลืนแสงวัดที่515 นาโนเมตร ร้อยละไล่รุนแรงที่คำนวณได้จาก [(A0-A1) / A0] × 100 ที่ A0 คือการดูดกลืนแสงของตัวควบคุม, และ A1 คือการดูดกลืนแสงของสารสกัดที่. 2.5.2 ทดสอบ FRAP (ferric ลดอำนาจสารต้านอนุมูลอิสระ) ธาตุเหล็กลดความสามารถของเนื้อเยื่อถูกกำหนดโดยวิธี FRAP (Benzie และสายพันธุ์ 1996) ที่มีการปรับตัว ในที่มืด, น้ำยา FRAP ถูกทำให้มี 300 มิลลิโมล L-1 บัฟเฟอร์อะซิเตท (pH 3.6), 10 มิลลิโมล TPTZ ใน 40 มิลลิโมล L-1 แก้ปัญหา HCl และ 20 มิลลิโมล L-1 FeCl3 ตัวอย่างหรือมาตรฐานการแก้ปัญหาน้ำบริสุทธิ์และสาร FRAP ถูกผสมและเก็บไว้ในอ่างน้ำเป็นเวลา30 นาทีที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส หลังจากที่การระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้องตัวอย่างและมาตรฐานอ่านได้ที่ 595 นาโนเมตร โค้งมาตรฐาน Trolox ถูกสร้างขึ้น (10-800 ไมโครโมล TE) ผลลัพธ์ที่ได้แสดงในไมโครโมล Trolox เทียบเท่า (TE) mL-1. 2.5.3 TEAC (Trolox สารต้านอนุมูลอิสระเทียบเท่า) ทดสอบเนื้อเยื่อระดับTEAC ได้รับการพิจารณาตามรายงานจากRufino et al, (2010) มีการปรับเปลี่ยน วิธีการแก้ปัญหา ABTS ถูกจัดทำขึ้นโดยการผสม5 มิลลิลิตร 7.0 มิลลิโมล ABTS และ 88 ไมโครลิตร 145 มิลลิโมลโพแทสเซียมแก้ปัญหาเพอร์ซัลเฟตซึ่งถูกทิ้งให้ตอบสนองสำหรับ12-16 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้องในที่มืด เอทานอล (99.5%) ถูกบันทึกอยู่ในการแก้ปัญหาการดูดกลืนแสงจนกระทั่งถึง0.700 ± 0.05 ที่ 734 นาโนเมตร Trolox (10-800 ไมโครโมล TE) ถูกนำมาใช้เป็นสารต้านอนุมูลอิสระอ้างอิง วิธีการแก้ปัญหา ABTS ถูกเพิ่มลงในตัวอย่างหรือการแก้ปัญหาที่ได้มาตรฐานและมีปฏิกิริยาตอบสนองเป็นเวลา6 นาทีก่อนที่จะอ่านที่734 นาโนเมตรที่อุณหภูมิห้อง ผลที่แสดงออกใน Trolox เทียบเท่าไมโครโมล(TE) mL-1. 2.5.4 ทดสอบ ORAC (ออกซิเจนน้ำความจุการดูดกลืนแสงที่รุนแรง) ในที่มืด 20 ไมโครลิตรของกลุ่มตัวอย่าง (จัดทำขึ้นตามที่อธิบายไว้ข้างต้น) 120 ไมโครลิตรของfluorescein ในบัฟเฟอร์ฟอสเฟต - PB (pH 7.4) และ 60 ไมโครลิตรของ AAPH ถูกเพิ่มเข้ามาในสีดำmicroplates ผู้อ่าน microplate ปรับเป็นก่อนหน้านี้อธิบาย(กรองเรืองแสงความยาวคลื่นกระตุ้น 485 นาโนเมตร; ความยาวคลื่นปล่อยก๊าซเรือนกระจก 520 นาโนเมตร) (. ก่อน, et al, 2003) ค่า ORAC ถูกแสดงในTrolox เทียบเท่าไมโครโมล (TE) ต่อมิลลิลิตรซีรั่มโดยใช้เส้นโค้งมาตรฐาน(2.5-50.0 ไมครอน TE) (Davalos โกเมซ-Cordoves และBartolome 2004. ก่อน, et al, 2003)
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.3 สารสกัดจากใบ สารสกัดน้ำหน้าชินี
เตรียมเดือด 1 กรัมของตัวอย่างและ
25 มิลลิลิตรน้ำที่ 100 องศา สารสกัดนี้ถูกใช้ในการวิเคราะห์
รวมฟีนอลที่มีศักยภาพต้านอนุมูลอิสระและสารประกอบฟีนอลิกโดยตัว
hplc-pda และ MS / คุณน้ำสารสกัดสำหรับ
การทดลองสัตว์เตรียมไปตาม ผลของการทดสอบ ic50 ddph และเพียงก่อนที่จะให้สัตว์
.
24 . ปริมาณฟีนอลรวม
เนื้อหาฟีนอลิกรวมของสารละลายสกัดหน้าชินีตกลงใจ
ตามวิธีของ folin – ciocalteu ( สเวน& Hillis 1959 ) ,
ที่มีการปรับเปลี่ยน ในขวด , 50 μลิตรสารสกัด , 800 μผมกลั่น
น้ำ 25 μ L ( 0.25 N ) folin – ciocalteu สารเคมีผสมบ่ม
ที่อุณหภูมิห้องนาน 3 นาที แล้ว 100 μ L โซเดียม คาร์บอเนต
โซลูชั่น ( 1 ) เพิ่มอีก 2 ชั่วโมงและบ่มที่อุณหภูมิห้อง คืออ่านค่า
อ่าน 725 nm ในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย ( HT , biotek ( Winooski สหรัฐอเมริกา ) ; กับ gen5 ™ 2.0 การวิเคราะห์ข้อมูลซอฟต์แวร์
วัสดุ กรดแกลลิคใช้เส้นโค้งมาตรฐาน
ผลลัพธ์ที่ได้แสดงในแง่ของเพิ่มขึ้นเทียบเท่า ( เก G − 1
)
2.5 การหาปริมาณสารต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพในหน้าน้ำสกัดใบตับเต่า
อ่านค่าการดูดกลืนแสงและการเรืองแสง ทำในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย
อ่าน ( HT , biotek ( Winooski สหรัฐอเมริกา ) ; กับ gen5 ™
2.0 การวิเคราะห์ข้อมูลซอฟต์แวร์ Spectrophotometer .
ดาวน์โหลด . dpph กำจัดอนุมูลอิสระ
กำจัดอนุมูลอิสระของสารสกัดตั้งใจ
ตาม dpph วิธี ( บรากา et al . , 2001 ) สารสกัด ( 33 μ L )
เพิ่มใน 13 ml dpph สารละลายเจือจางในเมทานอล ( 0.024 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร− 1
)
สั่นและบ่มเป็นเวลา 30 นาทีในที่มืด และค่าวัด
ที่ 515 nm . เปอร์เซ็นต์การหัวรุนแรงถูกคำนวณจาก ( A0 A1
[ − ) / A0 ] × 100 ที่ A0 คือการดูดกลืนแสงของการควบคุม
และ A1 คือการดูดกลืนแสงของสารสกัด .
งานวาง . ใช้ Frap ลดสารต้านอนุมูลอิสระพลังเฟอร์ )
ส่วนเฟอร์ลดความสามารถของเนื้อเยื่อถูกกำหนดโดยวิธี Frap
( benzie &สายพันธุ์ , 1996 ) โดยปรับ ในที่มืดใช้ Frap
า 300 มิลลิโมล L − 1 อะซิเตทบัฟเฟอร์ pH 3.6 ) 10 มิลลิโมล tptz
ใน 40 มิลลิโมล L − 1 กรดไฮโดรคลอริกและ 20 mmol l − 1 FeCl3 . ตัวอย่างหรือโซลูชั่นมาตรฐาน
, บริสุทธิ์มากน้ำและสารเคมีที่ถูกผสมและเก็บไว้ Frap
ในอ่างน้ำ 30 นาที ที่อุณหภูมิ 37 องศาหลังจากเย็นเพื่ออุณหภูมิห้อง
ตัวอย่างและมาตรฐานอ่าน 595 นาโนเมตร สารมาตรฐานที่โค้ง
า ( 10 – 800 μโมลเต้ ) ผลลัพธ์ที่ได้แสดงออกในμ mol สาร
เทียบเท่า ( TE ) มล. − 1
.
2.5.3 . Teac ( สารเทียบเท่าสารต้านอนุมูลอิสระในเนื้อเยื่อ )
' Teac ระดับได้รับการพิจารณาตามรายงานจาก
rufino et al . ( 2010 ) ที่มีการปรับเปลี่ยน โดยโซลูชั่นเตรียม
Abbrโดยผสม 5 ml 7.0 mmol Abbr และ 88 μลิตร 145 มิลลิโมลโพแทสเซียม persulfate
สารละลายซึ่งถูกทิ้งให้ตอบสนองต่อ 12 – 16 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิห้อง
ในที่มืด แอลกอฮอล์ ( 99.5% ) คือการเพิ่มโซลูชั่นจนกว่าค่า
ถึง 0.700 ± 0.05 ที่ 734 nm . สาร ( 10 – 800 μโมลเต้ ) คือ
ใช้เป็นสารอ้างอิง โดยโซลูชั่นถูกเพิ่มเข้าไป
Abbrตัวอย่างหรือโซลูชั่นมาตรฐานและตอบโต้ 6 นาทีก่อนอ่าน
ที่คุณ nm , อุณหภูมิห้อง ผลที่แสดงในμ mol สารเทียบเท่า
( TE ) มล. − 1
.
2.5.4 . ORAC assay ( น้ำออกซิเจน Radical Absorbance ความจุ
ในที่มืด , 20 μ l ตัวอย่าง ( เตรียมตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ) , 120 μ l
ี่ในบัฟเฟอร์ - ฟอสเฟต ตะกั่ว ( pH 7.4 ) และ 60 μ l )
aaph เพิ่มใน microplates สีดำในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยอ่านปรับเป็นก่อนหน้านี้
อธิบาย ( หลอดกรองความยาวคลื่นกระตุ้น 485 nm ;
ปล่อยความยาวคลื่น 520 nm ) ( ก่อนที่ et al . , 2003 ) ORAC ค่า
แสดงออกในμ mol สารเทียบเท่า ( TE ) / ml เซรั่มโดยใช้
เส้นโค้งมาตรฐาน ( 2.5 – 50.0 μเอ็ม ) ( davalos โกเมส cordoves &
Bartolom é , 2004 ; ก่อนที่ et al . , 2003 )
เตรียมเดือด 1 กรัมของตัวอย่างและ
25 มิลลิลิตรน้ำที่ 100 องศา สารสกัดนี้ถูกใช้ในการวิเคราะห์
รวมฟีนอลที่มีศักยภาพต้านอนุมูลอิสระและสารประกอบฟีนอลิกโดยตัว
hplc-pda และ MS / คุณน้ำสารสกัดสำหรับ
การทดลองสัตว์เตรียมไปตาม ผลของการทดสอบ ic50 ddph และเพียงก่อนที่จะให้สัตว์
.
24 . ปริมาณฟีนอลรวม
เนื้อหาฟีนอลิกรวมของสารละลายสกัดหน้าชินีตกลงใจ
ตามวิธีของ folin – ciocalteu ( สเวน& Hillis 1959 ) ,
ที่มีการปรับเปลี่ยน ในขวด , 50 μลิตรสารสกัด , 800 μผมกลั่น
น้ำ 25 μ L ( 0.25 N ) folin – ciocalteu สารเคมีผสมบ่ม
ที่อุณหภูมิห้องนาน 3 นาที แล้ว 100 μ L โซเดียม คาร์บอเนต
โซลูชั่น ( 1 ) เพิ่มอีก 2 ชั่วโมงและบ่มที่อุณหภูมิห้อง คืออ่านค่า
อ่าน 725 nm ในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย ( HT , biotek ( Winooski สหรัฐอเมริกา ) ; กับ gen5 ™ 2.0 การวิเคราะห์ข้อมูลซอฟต์แวร์
วัสดุ กรดแกลลิคใช้เส้นโค้งมาตรฐาน
ผลลัพธ์ที่ได้แสดงในแง่ของเพิ่มขึ้นเทียบเท่า ( เก G − 1
)
2.5 การหาปริมาณสารต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพในหน้าน้ำสกัดใบตับเต่า
อ่านค่าการดูดกลืนแสงและการเรืองแสง ทำในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย
อ่าน ( HT , biotek ( Winooski สหรัฐอเมริกา ) ; กับ gen5 ™
2.0 การวิเคราะห์ข้อมูลซอฟต์แวร์ Spectrophotometer .
ดาวน์โหลด . dpph กำจัดอนุมูลอิสระ
กำจัดอนุมูลอิสระของสารสกัดตั้งใจ
ตาม dpph วิธี ( บรากา et al . , 2001 ) สารสกัด ( 33 μ L )
เพิ่มใน 13 ml dpph สารละลายเจือจางในเมทานอล ( 0.024 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร− 1
)
สั่นและบ่มเป็นเวลา 30 นาทีในที่มืด และค่าวัด
ที่ 515 nm . เปอร์เซ็นต์การหัวรุนแรงถูกคำนวณจาก ( A0 A1
[ − ) / A0 ] × 100 ที่ A0 คือการดูดกลืนแสงของการควบคุม
และ A1 คือการดูดกลืนแสงของสารสกัด .
งานวาง . ใช้ Frap ลดสารต้านอนุมูลอิสระพลังเฟอร์ )
ส่วนเฟอร์ลดความสามารถของเนื้อเยื่อถูกกำหนดโดยวิธี Frap
( benzie &สายพันธุ์ , 1996 ) โดยปรับ ในที่มืดใช้ Frap
า 300 มิลลิโมล L − 1 อะซิเตทบัฟเฟอร์ pH 3.6 ) 10 มิลลิโมล tptz
ใน 40 มิลลิโมล L − 1 กรดไฮโดรคลอริกและ 20 mmol l − 1 FeCl3 . ตัวอย่างหรือโซลูชั่นมาตรฐาน
, บริสุทธิ์มากน้ำและสารเคมีที่ถูกผสมและเก็บไว้ Frap
ในอ่างน้ำ 30 นาที ที่อุณหภูมิ 37 องศาหลังจากเย็นเพื่ออุณหภูมิห้อง
ตัวอย่างและมาตรฐานอ่าน 595 นาโนเมตร สารมาตรฐานที่โค้ง
า ( 10 – 800 μโมลเต้ ) ผลลัพธ์ที่ได้แสดงออกในμ mol สาร
เทียบเท่า ( TE ) มล. − 1
.
2.5.3 . Teac ( สารเทียบเท่าสารต้านอนุมูลอิสระในเนื้อเยื่อ )
' Teac ระดับได้รับการพิจารณาตามรายงานจาก
rufino et al . ( 2010 ) ที่มีการปรับเปลี่ยน โดยโซลูชั่นเตรียม
Abbrโดยผสม 5 ml 7.0 mmol Abbr และ 88 μลิตร 145 มิลลิโมลโพแทสเซียม persulfate
สารละลายซึ่งถูกทิ้งให้ตอบสนองต่อ 12 – 16 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิห้อง
ในที่มืด แอลกอฮอล์ ( 99.5% ) คือการเพิ่มโซลูชั่นจนกว่าค่า
ถึง 0.700 ± 0.05 ที่ 734 nm . สาร ( 10 – 800 μโมลเต้ ) คือ
ใช้เป็นสารอ้างอิง โดยโซลูชั่นถูกเพิ่มเข้าไป
Abbrตัวอย่างหรือโซลูชั่นมาตรฐานและตอบโต้ 6 นาทีก่อนอ่าน
ที่คุณ nm , อุณหภูมิห้อง ผลที่แสดงในμ mol สารเทียบเท่า
( TE ) มล. − 1
.
2.5.4 . ORAC assay ( น้ำออกซิเจน Radical Absorbance ความจุ
ในที่มืด , 20 μ l ตัวอย่าง ( เตรียมตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ) , 120 μ l
ี่ในบัฟเฟอร์ - ฟอสเฟต ตะกั่ว ( pH 7.4 ) และ 60 μ l )
aaph เพิ่มใน microplates สีดำในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยอ่านปรับเป็นก่อนหน้านี้
อธิบาย ( หลอดกรองความยาวคลื่นกระตุ้น 485 nm ;
ปล่อยความยาวคลื่น 520 nm ) ( ก่อนที่ et al . , 2003 ) ORAC ค่า
แสดงออกในμ mol สารเทียบเท่า ( TE ) / ml เซรั่มโดยใช้
เส้นโค้งมาตรฐาน ( 2.5 – 50.0 μเอ็ม ) ( davalos โกเมส cordoves &
Bartolom é , 2004 ; ก่อนที่ et al . , 2003 )
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- คุณจะเกษียณเดือนอะไร
- the sun is often the destroyer as well a
- คุณหิวไหม
- MAIN CONTENTION:LANGUAGES THAT ARE NOT O
- it can lead to divergent group norms, pr
- But she is no ordinary painter
- access to video
- เธอไม่มีความหมายอีกต่อไป
- ต้นไม้ 1 ต้นช่วยกันตัด ล้มไว กว่าแยกกันโ
- ส่งงานไม่ทันตามที่คุณครูได้มอบหมายให้
- But she is no ordinary painter
- 4. Tell your students that U.S. Poet Lau
- หล่อนนวดให้ฉันเสมอ
- in particular a study by the Berufsgenos
- Why he to say not good with me
- เวียงบัว
- Do you think "Love across the continent"
- ครบรอบ 2เดือน
- คุณพบใครน่าสนใจบ้าง
- the sun is often the destroyer as well a
- Immune
- ลูกสาวคนโตของฉันชื่อ
- ชีวิต
- Funny woman. Nice
