LAB that displayed strong antifunga

LAB that displayed strong antifungal activity on MRS agar were
selected for testing against P. commune on cottage cheese. Some
LAB with no antifungal activity were also selected as negative
controls. LAB isolates were grown anaerobically in MRS broth for
48 h at 30 C. After incubation, the optical density of each LAB in
broth was measured and recorded, and 2 ml was centrifuged at
16,873  g (Eppendorf Centrifuge, Model 5418) for 1 min to obtain
the bacterial cell pellet. The spent MRS broth was discarded and
bacterial cells were resuspended with peptone water (0.1% w/v) to
obtain a standard number of cells per ml using the OD600 nm as a
reference. Each LAB suspension was estimated to contain
1 109 CFU/ml and the exact concentration of each LAB suspension
was determined by plating dilutions on MRS agar and incubation.
Twelve grams of commercially obtained cottage cheese which
contained 11.3 g protein, 5.4 g fat and 2.6 g sugar per 100 g (Dairy
Farmers, Queensland, Australia) were weighed out on each petri
dish (9 cm in diameter; Labtek) and inoculated with 0.1 ml of LAB
suspension. The cottage cheese was mixed on the petri dish using a
sterile spreader for at least 1 min to ensure even distribution of
bacterial cells. Controlswere prepared by inoculating cottage cheese
with 0.1 ml of peptone water not containing LAB. The plates were
then incubated at room temperature (~24 C) for 2 days. P. commune
fungal inoculum was prepared according to the method described
earlier and 0.1 ml (1  106 spores/ml) was inoculated onto each
cottage cheese plate (final concentration was ~1  104 spores/g of
cottage cheese), including control plates without LAB, and mixed
again as above to ensure even distribution. Plates were incubated at
room temperature and examined every fewdays for mould growth:
() no mould growth; (þ) small mould spots; (þþ) moderate sized
mould spots or patches; (þþþ) mostly or completely covered by
mould. Each strain was tested at least twice and consistent results
were obtained. The data presented is from the replicate experiment
which showed the least antifungal activity.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีห้องปฏิบัติการที่แสดงกิจกรรมแข็งแรงต้านเชื้อราบน MRS agarเลือกทดสอบกับ P. commune บนเนยแข็งคอทเทจ บางห้องปฏิบัติการไม่มีกิจกรรมต้านเชื้อราถูกเลือกเป็นค่าลบควบคุม ห้องปฏิบัติแยกได้ปลูก anaerobically นางซุปสำหรับh 48 ที่ 30 ซี หลังจากบ่ม ความหนาแน่นออปติคัลของแต่ละห้องปฏิบัติการซุปถูกวัด และบันทึก และ 2 ml ถูก centrifuged ที่16,873 g (เครื่องหมุนเหวี่ยง Eppendorf รุ่น 5418) ใน 1 นาทีจะได้รับเม็ดเซลล์แบคทีเรีย ซุปนางใช้จ่ายถูกยกเลิก และเซลล์แบคทีเรียมี resuspended น้ำ peptone (0.1% w/v) การจำนวนเซลล์ต่อมล.ใช้ nm OD600 เป็นมาตรฐานที่ได้รับการการอ้างอิง แต่ละห้องปฏิบัติการระงับที่ถูกคาดว่าประกอบด้วย1 109 CFU/ml และที่ความเข้มข้นแน่นอนของแต่ละห้องปฏิบัติการระงับถูกกำหนด โดยชุบ dilutions MRS agar และคณะทันตแพทยศาสตร์ชี 12 กรัมของคอทเทจที่ได้รับในเชิงพาณิชย์ซึ่ง11.3 กรัมมีโปรตีน ไขมัน 5.4 g และน้ำตาล 2.6 กรัมต่อ 100 กรัม (นมเกษตรกร รัฐควีนส์แลนด์ ออสเตรเลีย) มีน้ำหนักออกในแต่ละ petriจาน (9 ซม.เส้นผ่านศูนย์กลาง Labtek) และ inoculated กับ 0.1 มล.ของห้องปฏิบัติการระบบกันสะเทือน เนยแข็งคอทเทจถูกผสมในจานเพาะเชื้อที่ใช้เป็นspreader กอซสำหรับให้กระจายแม้แต่น้อย 1 นาทีเซลล์แบคทีเรีย Controlswere โดย inoculating เนยแข็งคอทเทจมี 0.1 มล.น้ำ peptone ที่ไม่ประกอบด้วยห้องปฏิบัติการ แผ่นได้แล้ว incubated ที่อุณหภูมิห้อง (~ 24 C) 2 วัน P. communeมีเตรียม inoculum ของเชื้อราตามวิธีการอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ และ 0.1 มล. (1 106 เพาะเฟิร์น/มล) ถูก inoculated ไปยังแต่ละแผ่นเนยแข็งคอทเทจ (ความเข้มข้นสุดท้ายถูก ~ 1 เพาะเฟิร์น 104 g ของคอทเทจชีส), รวมถึงแผ่น โดยห้องปฏิบัติการ และผสมอีกครั้งกับข้างบนให้กระจายแบบสม่ำเสมอ แผ่นก็ incubated ที่อุณหภูมิห้อง และทุก fewdays การเจริญเติบโตของแม่พิมพ์การตรวจสอบ:()ไม่เจริญเติบโตแม่พิมพ์ (þ) แม่พิมพ์ขนาดเล็กจุด ขนาดปานกลาง (þþ)แม่พิมพ์จุดหรือแพทช์ (þþþ) ส่วนใหญ่ หรือทั้งหมดครอบคลุมแม่พิมพ์ ต้องใช้แต่ละได้ ผลทดสอบที่สอดคล้องกันได้รับการ ข้อมูลที่นำเสนอมาจากการทดลองการ replicateซึ่งแสดงให้เห็นกิจกรรมการต้านเชื้อราอย่างน้อย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

LAB ที่แสดงกิจกรรมต้านเชื้อราที่แข็งแกร่งในอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS
ถูกเลือกสำหรับการทดสอบกับประชาคมพีในชีสกระท่อม บาง
LAB
ที่มีฤทธิ์ต้านเชื้อราไม่ได้รับการคัดเลือกเป็นเชิงลบการควบคุม สายพันธุ์ LAB ปลูกแบบไม่ใช้อากาศในน้ำซุป MRS สำหรับ
48 ชั่วโมงวันที่ 30 องศาเซลเซียส หลังจากการบ่มความหนาแน่นแสงของห้องปฏิบัติการในแต่ละน้ำซุปวัดและบันทึกไว้และ 2 มิลลิลิตรถูกหมุนเหวี่ยงที่ 16,873? g (Eppendorf Centrifuge รุ่น 5418) เป็นเวลา 1 นาทีเพื่อให้ได้เม็ดเซลล์ของแบคทีเรีย น้ำซุป MRS ใช้เวลาทิ้งและเซลล์แบคทีเรียถูกresuspended ด้วยน้ำเปปโตน (0.1% w / v) เพื่อให้ได้มาตรฐานจำนวนของเซลล์ต่อมล. โดยใช้นาโนเมตร OD600 เป็นอ้างอิง ระงับ LAB แต่ละคนเป็นที่คาดกันว่าจะมี1 109 CFU / ml และความเข้มข้นที่แน่นอนของแต่ละระงับ LAB ถูกกำหนดโดยชุบเจือจางใน MRS agar และบ่ม. สิบสองกรัมของชีสกระท่อมที่ได้รับในเชิงพาณิชย์ซึ่งมี 11.3 กรัมโปรตีน 5.4 กรัมไขมัน 2.6 กรัมน้ำตาลต่อ 100 กรัม (นมเกษตรกรควีนส์แลนด์ออสเตรเลีย) ได้รับการชั่งน้ำหนักออกในแต่ละโลจาน (9 ซม. ในเส้นผ่าศูนย์กลาง; Labtek) และเชื้อด้วย 0.1 มิลลิลิตร LAB ระงับ ชีสกระท่อมผสมในจาน Petri ใช้กระจายผ่านการฆ่าเชื้ออย่างน้อย1 นาทีเพื่อให้แน่ใจว่าการกระจายของเซลล์แบคทีเรีย Controlswere จัดทำโดยการฉีดวัคซีนชีสกระท่อม0.1 มิลลิลิตรของน้ำไม่ได้เปปโตนที่มี LAB แผ่นถูกบ่มแล้วที่อุณหภูมิห้อง (~ 24? C) เป็นเวลา 2 วัน พีประชาคมเชื้อเชื้อราถูกจัดทำขึ้นตามวิธีการที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้และ0.1 มล. (1? 106 สปอร์ / มล.) ได้รับเชื้อเข้าสู่แต่ละแผ่นชีสกระท่อม(ความเข้มข้นสุดท้ายคือ ~ 1? 104 สปอร์ / กรัมของชีสกระท่อม) รวมทั้งแผ่นควบคุม โดยไม่ต้อง LAB และผสมอีกครั้งดังกล่าวเพื่อให้กระจาย แผ่นถูกบ่มที่อุณหภูมิห้องและตรวจสอบ fewdays ทุกเจริญเติบโตของเชื้อรา: เจริญเติบโตของเชื้อราไม่มี (?) (TH) แม่พิมพ์จุดเล็ก ๆ น้อย ๆ (þþ) ขนาดปานกลางจุดแม่พิมพ์หรือแพทช์; (þþþ) ส่วนใหญ่หรือได้รับการคุ้มครองอย่างสมบูรณ์โดยแม่พิมพ์ แต่ละสายพันธุ์ได้รับการทดสอบอย่างน้อยสองครั้งและผลที่สอดคล้องกันที่ได้รับ ข้อมูลที่นำเสนอมาจากการทดลองทำซ้ำซึ่งแสดงให้เห็นกิจกรรมต้านเชื้อราน้อย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ปฏิบัติการที่แสดงที่แข็งแกร่งในกิจกรรมนางวุ้นถูกเลือกสำหรับการทดสอบกับหน้า
ชุมชนบนคอทเทจชีส บางแลป ไม่มีเชื้อรา
กิจกรรมยังเลือกการควบคุมลบ

แล็บไอโซเลทโตพน้ำนางสำหรับ
48 H 30  C หลังจากบ่ม , ความหนาแน่นเชิงแสงของแต่ละห้องปฏิบัติการใน
ซุปวัดและบันทึก และเป็นระดับที่ 2 ml
16ที่  G ( เพนดอร์ฟเครื่องหมุนเหวี่ยงแบบโปรแกรม ) 1 นาทีเพื่อขอรับ
เม็ดเซลล์แบคทีเรีย การใช้เวลา MRS broth และเซลล์แบคทีเรียที่ถูกทิ้ง
resuspended กับเปปโตนน้ำ ( 0.1 % w / v )

ขอรับหมายเลขมาตรฐานของเซลล์ต่อมิลลิลิตร ใช้ od600 nm เป็น
อ้างอิง แต่ละ Lab ระงับซึ่งประกอบด้วย
1  109 CFU / ml และความเข้มข้นที่แน่นอนของแต่ละห้องปฏิบัติการการระงับ
ถูกกำหนดโดยวิธีการที่คุณชุบวุ้น และการบ่ม
12 กรัมในเชิงพาณิชย์ได้รับชีสกระท่อมซึ่ง
มีโปรตีน 11.3 กรัม 5.4 กรัม ไขมันและน้ำตาล 2.6 กรัมต่อ 100 กรัม ( นม
เกษตรกร , ควีนส์แลนด์ , ออสเตรเลีย ) มีน้ำหนักในแต่ละจาน Petri
9 ซม. ในเส้นผ่าศูนย์กลาง labtek ) และหัวเชื้อด้วย 0.1 ml ของห้องปฏิบัติการ
ระงับ ชีสกระท่อมผสมในอาหารจาน Petri ใช้
กระจายผ่านอย่างน้อย 1 นาที เพื่อให้กระจายของ
แบคทีเรียเซลล์ controlswere เตรียมชีสกระท่อม
ณ 0.1 มิลลิลิตร ตามลำดับ น้ำไม่มีแล็บ จานถูก
จากนั้นบ่มที่อุณหภูมิห้อง ( ~ 24  C ) เป็นเวลา 2 วัน หน้าชุมชน
เชื้อราเชื้อที่เตรียมไว้ตามวิธีการที่อธิบาย
ก่อนหน้านี้และ 0.1 มิลลิลิตร ( 1  106 สปอร์ / มิลลิลิตร ) เป็นเชื้อลงบนแต่ละ
คอทเทจชีสแผ่น ( ความเข้มข้นสุดท้าย ~ 1  104 สปอร์ / g
ชีสกระท่อม ) , รวมทั้งการควบคุมแผ่นไม่มีห้องทดลอง และผสม
อีกข้างบนให้กระจาย แผ่นอุณหภูมิ
อุณหภูมิห้องและตรวจสอบทุ fewdays เติบโตแม่พิมพ์ :
(  ) ไม่มีราการเจริญเติบโต ; ( þ ) จุดแม่พิมพ์ขนาดเล็ก ขนาดกลาง ( þþ )
จุดแม่พิมพ์หรือแพทช์ ; ( þþþ ) ส่วนใหญ่หรือทั้งหมดครอบคลุมโดย
แม่พิมพ์แต่ละสายพันธุ์ทดสอบอย่างน้อยสองครั้งและ
ผลที่สอดคล้องกันได้ ข้อมูลที่นำเสนอมาจากการทดลองทำซ้ำ
ซึ่งแสดงกิจกรรมอย่างน้อยฆ่า