Cells were fed with 14 ml of fresh

Cells were fed with 14 ml of fresh media every 2 days. Cells were split when confluent by trypsin EDTA solution, before trypsination cells in flask were washed twice with 10 ml of PBS. Washed cell layers were topped with 3 ml of trypsin/EDTA solution and the flask was placed into incubator (37°C, 5% CO2) for3 minutes toallow cell detachment. After that, trypsin/EDTAsolutionwas inactivated with 7 ml of media and cell suspension was homogenised by pipetting several times up and down. Cells were counted manually using a Neubauer-type hematotocytometer, acalibrated counting chamber with identically duplicate counting areas. A cover glass placed over the chamber provides a depth of 0.1 mm.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซลล์ถูกเลี้ยงกับ ml 14 สื่อสดทุก ๆ วัน 2 เซลล์ได้แบ่งเมื่อ confluent จากทริปซิน EDTA โซลูชัน ก่อนที่เซลล์ trypsination หนาวถูกล้างสองครั้งกับ 10 ml ของ PBS เซลล์หินชั้นถูกราด 3 ml ของทริปซิ น/EDTA และหนาวมีอยู่ใน incubator (37° C, 5% CO2) for3 นาที toallow เซลล์ปลด หลังจากนั้น ทริปซิ น/EDTAsolutionwas ยกเลิกกับ ml 7 สื่อ และระงับเซลล์ถูก homogenised โดย pipetting หลายครั้งขึ้นและลง เซลล์นับได้ด้วยตนเองใช้เป็นชนิด Neubauer hematotocytometer, acalibrated นับหอกับพื้นที่นับซ้ำเหมือนกัน ฝาแก้วที่วางอยู่เหนือห้องมีความลึก 0.1 มม.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เซลล์ที่ถูกเลี้ยงด้วย 14 มล. ของสื่อใหม่ทุก 2 วัน เซลล์ที่ถูกแยกออกเมื่อไหลมารวมกันโดยวิธีการแก้ปัญหา trypsin EDTA ก่อน trypsination เซลล์ในขวดถูกล้างครั้งที่สองมี 10 มิลลิลิตรพีบีเอส ล้างชั้นเซลล์ถูกราดด้วย 3 มิลลิลิตร trypsin / แก้ปัญหา EDTA และขวดถูกวางอยู่ในตู้อบ (37 ° C, CO2 5%) นาที for3 toallow ออกมือถือ หลังจากนั้น trypsin / EDTAsolutionwas ยกเลิก 7 มล. ของสื่อและเซลล์แขวนลอยถูก homogenised โดยปิเปตหลายครั้งขึ้นและลง เซลล์ที่ถูกนับด้วยตนเองโดยใช้ hematotocytometer Neubauer ชนิด acalibrated นับห้องเหมือนกันกับการนับซ้ำพื้นที่ ฝาครอบแก้ววางอยู่เหนือห้องมีความลึก 0.1 มม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เซลล์ได้รับ 14 ml ของสื่อใหม่ทุก 2 วัน เซลล์มีการแบ่งโดยรูปสารละลาย EDTA เมื่อกระจู๋กระจี๋ ก่อนที่ trypsination เซลล์ในขวดถูกซักครั้งกับ 10 ml ของ PBS ล้างเซลล์ชั้นถูกราดด้วย 3 มล. ของเอนไซม์ / EDTA โซลูชั่นและขวดเหล้าวางอยู่ในตู้อบ ( 37 ° C คาร์บอนไดออกไซด์ 5 เปอร์เซ็นต์ ) for3 นาที toallow เซลล์ไม่สนใจ . หลังจากนั้นทริป 7 ml / edtasolutionwas ซึ่งใช้สื่อและเซลล์แขวนลอยอยู่ homogenised โดย pipetting หลายครั้ง ขึ้นและลง เซลล์ก็นับด้วยตนเองโดยใช้แบบ hematotocytometer นูเบาเออร์ , หอด้วยเหมือนกัน acalibrated นับซ้ำนับพื้นที่ ฝาครอบกระจกวางไว้มากกว่าห้องที่ให้ความลึกของ 0.1 มิลลิเมตร