Apples from the variety Red Delicious were picked at commercial maturity and used as PPO source. The enzyme was purified from the cortex according to the
method in three steps, i.e. extraction, fractional precipitation by
ammonium sulfate (164 g l?1, 30% saturation) and hydrophobic chromatography with phenyl-Sepharose CL4B Active fractions were pooled, stored at +4 ?C and constituted the enzymatic extract used for subsequent experiments. All chemicals used were the purest available. l-cysteine (free base), d-glucose, d-fructose, ascorbic
acid, sodium fluoride and 4-methylcatechol (4-MC) 36 C. Billaud et al. / Food Chemistry 81 (2003) 35–50 were obtained from Sigma-Aldrich Chemical Co (St.
Louis MO, USA). Chemicals used in the preparation of buffers, purification of apple PPO, acetic acid, ammonium dihydrogen phosphate and o-phosphoric acid were
purchased from Merck-eurolab, Div. Prolabo (Fontenay
S/Bois, France). Acetonitrile was supplied from
Acros organics (New Jersey, USA). Water used was
purified by Analyst HP purification, Purite Select limited
(Oxon, England).
แอปเปิ้ลสีแดงจากความหลากหลายอร่อยถูกหยิบที่ครบกําหนดในเชิงพาณิชย์และใช้เป็นแหล่ง PPO เอนไซม์บริสุทธิ์จากเปลือกให้เป็นไปตาม
วิธีการในสามขั้นตอนการสกัดเช่นฝนเศษส่วนโดย
แอมโมเนียมซัลเฟต (164 GL 1, 30 อิ่มตัว%) และโครมาชอบน้ำกับ phenyl-Sepharose CL4B เศษส่วนที่ใช้งานได้ถูกรวบรวมเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสและประกอบด้วยสารสกัดจากเอนไซม์ที่ใช้ในการทดลองต่อมา สารเคมีทั้งหมดที่ใช้เป็นที่บริสุทธิ์ที่สุดที่มีอยู่ L-cysteine (ฐานฟรี), D-กลูโคสฟรุกโตส D-, วิตามินซี
กรดฟลูออไรโซเดียมและ 4 methylcatechol (4 MC) 36 C. Billaud และคณะ / เคมีอาหาร 81 (2003) 35-50 ที่ได้รับจาก บริษัท Sigma-Aldrich Chemical Co (เซนต์
หลุยส์ MO, USA) สารเคมีที่ใช้ในการจัดทำบัฟเฟอร์, การทำให้บริสุทธิ์ของ PPO แอปเปิ้ล, กรดอะซิติกไดไฮโดรเจนฟอสเฟตแอมโมเนียและกรดฟอสฟ o-ถูก
ซื้อมาจากเมอร์ค-Eurolab, Div Prolabo (Fontenay
S / Bois, ฝรั่งเศส) Acetonitrile ได้รับการจัดหาจาก
สารอินทรีย์ Acros (นิวเจอร์ซีย์สหรัฐอเมริกา) น้ำที่ใช้เป็นที่
บริสุทธิ์โดยนักวิเคราะห์บริสุทธิ์ HP, Purite เลือก จำกัด
(มหาวิยาลัยอังกฤษ)
การแปล กรุณารอสักครู่..
แอปเปิ้ลสีแดงอร่อยถูกเลือกจากหลากหลายที่วุฒิภาวะเชิงพาณิชย์ และใช้เป็นแหล่ง PPO . เอนไซม์บริสุทธิ์จากสมองตาม
วิธี 3 ขั้นตอน ได้แก่ การสกัด การตกตะกอนด้วยแอมโมเนียม ซัลเฟต ( เศษส่วน
164 g L 1 , 30 เปอร์เซ็นต์ความอิ่มตัว ) และ hydrophobic chromatography ) เกี่ยวข้องกับ cl4b ปราดเปรียวเศษส่วนเป็นพู ที่เก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4C และเอนไซม์ที่ใช้ในการทดลองสารสกัดจึงตามมา สารเคมีที่ใช้ทั้งหมดคือ purest . L-Cysteine ( ฐานฟรี ) ดี กูลโคส d-fructose
, , วิตามินซีกรดโซเดียมฟลูออไรด์และ 4-methylcatechol ( 4-mc ) 36 . billaud et al . เคมีอาหาร / 81 ( 2546 ) 35 – 50 ได้จากซิกม่า Aldrich เคมี CO ( St .
หลุยส์โม , USA ) สารเคมีที่ใช้ในการเตรียมเนื้อเยื่อบริสุทธิ์ของแอปเปิ้ล PPO , กรดน้ำส้ม , ไดแอมโมเนียมฟอสเฟตและกรด 2 o-phosphoric
ซื้อจากเมอร์ค eurolab div prolabo ( ฟอนทาเน่
, s / Bois , ฝรั่งเศส ) ไนก็มาจาก
acros Organics อเมริกา ( นิวเจอร์ซีย์ ) น้ำที่ใช้
บริสุทธิ์ โดยนักวิเคราะห์ HP ฟอก purite เลือกจำกัด
( Oxon , อังกฤษ )
การแปล กรุณารอสักครู่..