Extraction and quantification of ja

Extraction and quantification of jasmonic acid and MJ were carried out as described previously (Kondo et al., 2005, 2007). The deuterium-labelledjasmonic acid {[2 H2]jasmonic acid; (6)-[9,10-2 H2]jasmonic acid} was prepared from adipic acid through the catalytic semi-deuteriogenation of methyl (6)-9,10- dehydrojasmonate. The deuterium-labelled MJ {[2 H2]MJ; methyl (6)-[9,10-2 H2]jasmonic acid} used for the internal standard was prepared as described in Kondo et al. (2000). Freeze-dried mesocarp samples (;1 g, three replications) were homogenized with 1 lg of [2 H2]jasmonic acid or [2 H2]MJ of the internal standard in 50 ml of diethyl ether containing 11.3 lMbutylatedhydroxytoluene as an antioxidant, 20 ml of saturated NaCl solution, and 1 ml of 1 M citric acid. Homogenates were centrifuged and dried. Extracts were dissolved in chloroform/diisopropylethylamine, 1:1 (v/v), and derivatized for 60 min at 50 C with pentafluorobenzyl bromide (PFB). Analysis of PFB-jasmonates was conducted using GC-mass spectroscopy selected ion monitoring [QP 5000; Shimadzu, Kyoto, Japan; 25 m30.25 mm i.d. column (CP-Sil 5CB; Chromopack, Middelburg, The Netherlands]; column temperature step gradient, 60 C for 2 min, 60–270 C at 1 C min1 , and 270 C for 35 min; linear He flow, 50.2 cm s1 : electron potential, 70 eV.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สกัดและนับของกรดจัสโมนิกและ MJ ได้ดำเนินออกตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (คอนโดร้อยเอ็ด al., 2005, 2007) กรดดิวเทอเรียม-labelledjasmonic { [2 H2] กรดจัสโมนิก (6) - [9,10-2 H2] กรดจัสโมนิก} ที่เตรียมจากกรด adipic ผ่านกึ่ง-deuteriogenation ตัวเร่งปฏิกิริยาของ methyl (6) -9,10-dehydrojasmonate MJ deuterium มัน { [2 H2] MJ; methyl (6) - [9,10-2 H2] กรดจัสโมนิก} ใช้สำหรับมาตรฐานภายในเตรียมไว้ตามที่อธิบายไว้ในคอนโดและ al. (2000) ตัวอย่างกรอบ mesocarp ( g 1 ระยะที่ 3) ได้ homogenized เป็นกลุ่มกับ lg 1 [2 H2] จัสโมนิกกรดหรือ [2 H2] MJ มาตรฐานภายใน 50 ml ของอีเทอร์ diethyl ประกอบด้วย 11.3 lMbutylatedhydroxytoluene เป็นสารต้านอนุมูลอิสระ 20 ml ของ NaCl อิ่มตัว และ 1 มิลลิลิตรของกรดซิตริก 1 เมตร Homogenates ถูก centrifuged และแห้ง สารสกัดที่ละลายใน คลอโรฟอร์ม/diisopropylethylamine, 1:1 (v/v), และ derivatized ใน 60 นาทีที่ 50 C กับ pentafluorobenzyl โบรไมด์ (PFB) วิเคราะห์ PFB jasmonates ได้ดำเนินการใช้ GC มวลกไอออนเลือกตรวจสอบ [QP 5000 Shimadzu เกียวโต ญี่ปุ่น 25 m30.25 มม.ประชาชนคอลัมน์ (CP-ภาษาศาสตร์ 5CB Chromopack, Middelburg เนเธอร์แลนด์]; คอลัมน์อุณหภูมิขั้นตอนไล่ระดับสี 60 C 2 นาที 60-270 C ที่ 1 C min1 และ 270 C สำหรับ 35 นาที เชิงเขาไหล s1 50.2 ซม.: อิเล็กตรอนที่มีศักยภาพ 70 eV

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การสกัดและการหาปริมาณของกรด jasmonic MJ และได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (คอนโดะ et al., 2005, 2007) กรดไฮโดรเจน-labelledjasmonic {[2 H2] กรด jasmonic; (6) - [9,10-2 H2] กรด jasmonic} ถูกจัดทำขึ้นจากกรด adipic ผ่านตัวเร่งปฏิกิริยากึ่ง deuteriogenation ของเมธิล (6) -9,10- dehydrojasmonate MJ ไฮโดรเจนที่มีข้อความ {[2 H2] MJ; เมธิล (6) - [9,10-2 H2] กรด jasmonic} ใช้สำหรับมาตรฐานภายในถูกจัดทำขึ้นตามที่อธิบายไว้ในคอนโดะ et al, (2000) แห้งตัวอย่างเนื้อ (1 กรัมสามซ้ำ) กำลังหดหาย 1 ของแอลจี [2 H2] กรด jasmonic หรือ [2 H2] MJ มาตรฐานภายใน 50 มิลลิลิตรอีเทอร์ที่มี 11.3 lMbutylatedhydroxytoluene เป็นสารต้านอนุมูลอิสระ, 20 มล. วิธีการแก้ปัญหาของอิ่มตัวโซเดียมคลอไรด์และ 1 มิลลิลิตร 1 M กรดซิตริก homogenates ถูกปั่นและแห้ง สารสกัดถูกละลายในคลอโรฟอร์ม / diisopropylethylamine, 1: 1 (v / v) และ derivati​​zed 60 นาทีที่ 50 องศาและมีโบรไมด์ pentafluorobenzyl (PFB) การวิเคราะห์ PFB-jasmonates ได้รับการดำเนินการโดยใช้สเปคโทร GC-การตรวจสอบมวลไอออนเลือก [QP 5000; Shimadzu เกียวโตประเทศญี่ปุ่น 25 มม m30.25 คอลัมน์รหัส (CP-Sil 5CB; Chromopack, มิดเดลเบิร์ก, เนเธอร์แลนด์] ขั้นตอนการไล่ระดับสีอุณหภูมิคอลัมน์ 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2 นาที, 60-270 C ที่ 1 C min1 และ 270 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 35 นาที; เชิงเส้นเขา การไหล 50.2 ซม s1: ศักยภาพอิเล็กตรอน 70 eV

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสกัดและปริมาณของกรดและ jasmonic MJ ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( Kondo et al . , 2005 , 2007 ) ที่เสรีไทย labelledjasmonic กรด { [ 1 H2 ] จังหวัดเอซอน ( 6 ) - [ 9,10-2 H2 ] จังหวัดเอซอน } เตรียมจากกรด adipic ผ่านการกึ่ง deuteriogenation เมทิล ( 6 ) - 9,10 - dehydrojasmonate . ส่วนดิวทีเรียม labelled MJ { [ 1 H2 ] MJ ; เมทิล ( 6 ) - [ 910-2 H2 ] จังหวัดเอซอน } ใช้มาตรฐานภายในเตรียมตามที่อธิบายไว้ในคอนโด et al . ( 2000 ) ตรึงแห้งตัวอย่างมีโซคาร์ป ( 1 กรัม มี 3 ซ้ำ ) บดกับ 1 LG [ 2 H2 ] จังหวัดเอซอนหรือ [ 1 H2 ] MJ ของมาตรฐานภายใน 50 มล. ของอีเทอร์ที่ 11.3 lmbutylatedhydroxytoluene เป็นสารต้านอนุมูลอิสระ 20 มิลลิลิตร สารละลายเกลืออิ่มตัว และ 1 มิลลิลิตรของกรดซิตริก 1 M .homogenates เป็นระดับและแห้ง สารสกัดละลายในคลอโรฟอร์ม / diisopropylethylamine , 1 : 1 ( v / v ) และ derivatized 60 นาทีที่ 50 องศาเซลเซียส pentafluorobenzyl โบรไมด์ ( pfb ) การวิเคราะห์ pfb jasmonates จำนวน GC มวล SPECTROSCOPY การเลือกไอออน [ qp 5000 ; Shimadzu , เกียวโต , ญี่ปุ่น m30.25 ระบุคอลัมน์ 25 มม. ( CP ซิล 5cb ; chromopack Middelburg , เนเธอร์แลนด์ , ] ;คอลัมน์อุณหภูมิขั้นไล่ระดับ 60 C 2 นาที 60 – 270 C ที่ 1 C min1 และ 270 C 35 นาที ; เส้นเขาไหล 50.2 ซม. S1 : ศักยภาพ , 70 EV อิเล็กตรอน