Two novel β-glucosidase genes desig

Two novel β-glucosidase genes designated as bgl1D and bgl1E, which encode 172- and 151-aa peptides, respectively, were cloned by function-based screening of a metagenomic library from uncultured soil microorganisms. Sequence analyses indicated that Bgl1D and Bgl1E exhibited lower similarities with some putative β-glucosidases. Functional characterization through high-performance liquid chromatography demonstrated that purified recombinant Bgl1D and Bgl1E proteins hydrolyzed d-glucosyl-β-(1–4)-d-glucose to glucose. Using p-nitrophenyl-β-d-glucoside as substrate, Km was 0.54 and 2.11 mM, and kcat/Km was 1489 and 787 mM−1 min−1 for Bgl1D and Bgl1E, respectively. The optimum pH and temperature for Bgl1D was pH 10.0 and 30 °C, while the optimum values for Bgl1E were pH 10.0 and 25 °C. Bgl1D exhibited habitat-specific characteristics, including higher activity in lower temperature and at high concentrations of AlCl3 and LiCl. Bgl1D also displayed remarkable activity across a broad pH range (5.5–10.5), making it a potential candidate for industrial applications.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สองยีนβ-glucosidase นวนิยายเป็น bgl1D และ bgl1E ซึ่งเข้ารหัส 172 และ 151 aa เปปไทด์ ตามลำดับ ถูกโคลน โดยคัดกรองตามฟังก์ชั่นของไลบรารี metagenomic จากจุลินทรีย์ดิน uncultured ลำดับวิเคราะห์ระบุว่า Bgl1D และ Bgl1E จัดแสดงต่ำเหมือนกับบาง putative β-glucosidases ลักษณะการทำงานผ่านสูงละลายน้ำแสดงว่า บริสุทธิ์ recombinant Bgl1D และ Bgl1E โปรตีนไลซ์ d-glucosyl-β-(1–4)-d-glucose กลูโคสในเลือด ใช้ p-nitrophenyl-β-d-glucoside เป็นพื้นผิว กม. 0.54 และ 2.11 มม. และ kcat/Km 1489 และ 787 min−1 mM−1 Bgl1D และ Bgl1E ตามลำดับ ค่า pH ที่เหมาะสมและอุณหภูมิสำหรับ Bgl1D คือ pH 10.0 และ 30 ° C ขณะที่ค่าสูงสุดสำหรับ Bgl1E pH 10.0 และ 25 ° c Bgl1D แสดงลักษณะเฉพาะที่อยู่อาศัย รวมทั้งกิจกรรมที่สูงขึ้น ในอุณหภูมิต่ำ และ ที่ความเข้มข้นสูงของ AlCl3 LiCl Bgl1D-แสดงกิจกรรมที่โดดเด่นในช่วง pH กว้าง (5.5-10.5), ทำให้ผู้สมัครที่มีศักยภาพสำหรับงานอุตสาหกรรม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

นวนิยายสองยีนβ-glucosidase กำหนดให้เป็น bgl1D และ bgl1E ซึ่งเข้ารหัส 172- 151-AA เปปไทด์ตามลำดับถูกโคลนจากการตรวจคัดกรองฟังก์ชั่นที่ใช้ในห้องสมุด Metagenomic จากจุลินทรีย์ในดินที่ไม่มีมารยาท ลำดับวิเคราะห์ชี้ให้เห็นว่า Bgl1D และ Bgl1E แสดงความคล้ายคลึงกันที่ต่ำกว่าด้วยบางสมมุติβ-glucosidases ลักษณะการทำงานผ่านทางที่มีประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography แสดงให้เห็นว่าบริสุทธิ์ recombinant Bgl1D และ Bgl1E โปรตีนไฮโดรไลซ์ D-glucosyl-β- (1-4) -d กลูโคสเป็นน้ำตาลกลูโคส โดยใช้ P-Nitrophenyl-β-D-glucoside เป็นสารตั้งต้นกม 0.54 และ 2.11 มิลลิและ kcat / กิโลเมตรเป็น 1,489 และ 787 MM-1 นาที 1 สำหรับ Bgl1D และ Bgl1E ตามลำดับ ค่าพีเอชและอุณหภูมิที่เหมาะสมสำหรับ Bgl1D เป็นค่า pH 10.0 และ 30 องศาเซลเซียสในขณะที่ค่าที่เหมาะสมสำหรับการ Bgl1E มีค่า pH 10.0 และ 25 ° C Bgl1D แสดงลักษณะที่อยู่อาศัยเฉพาะรวมถึงกิจกรรมที่สูงขึ้นในอุณหภูมิที่ต่ำกว่าและที่ความเข้มข้นสูงของ AlCl3 และ LiCl Bgl1D ยังแสดงกิจกรรมที่โดดเด่นในช่วงค่า pH กว้าง (5.5-10.5) จึงทำให้ผู้สมัครที่มีศักยภาพสำหรับการประยุกต์ใช้ในอุตสาหกรรม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สองนวนิยายยีนบีตา - กลูโคซิเดส และเขต bgl1d bgl1e ซึ่งเข้ารหัส 172 - 151 เปปไทด์ , AA ตามลำดับโคลนโดยการทำงานจากการคัดกรองของห้องสมุดเมตาจีโนมิคจากจุลินทรีย์ในดินไม่มีวัฒนธรรม . ลำดับการวิเคราะห์ พบว่า มีความคล้ายคลึงกันและ bgl1d bgl1e ลดลงด้วยนอกจากนี้บีตา - glucosidases . ลักษณะการทำงานโดยวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง พบว่าโปรตีนไฮโดรไลซ์โปรตีนที่บริสุทธิ์และ bgl1d bgl1e d-glucosyl - บีตา - ( 1 - 4 ) - ดี กูลโคสกลูโคส . การใช้ p-nitrophenyl - บีตา - D-glucoside เป็นสับสเตรท ก.ม. เป็น 0.54 และ 2.11 มม. และ kcat / km คือ 1520 787 มม. และ− 1 นาที− 1 สำหรับ bgl1d และ bgl1e ตามลำดับ pH และอุณหภูมิที่เหมาะสมสำหรับ bgl1d คือพีเอช 10.0 และ 30 ° C ในขณะที่ค่าที่เหมาะสมที่สุดสำหรับ bgl1e pH 10.0 และ 25 องศา bgl1d จัดแสดงที่อยู่อาศัยคุณลักษณะเฉพาะรวมถึงกิจกรรมสูงในอุณหภูมิและความเข้มข้นสูงของ alcl3 และ 20 . . bgl1d ยังปรากฏกิจกรรมที่โดดเด่นในช่วงกว้าง ( pH 5.5 ( 10.5 ) ทำให้ผู้สมัครที่มีศักยภาพสำหรับการประยุกต์ใช้ในอุตสาหกรรม