2. Methods2.1. Microorganism and gr

2. Methods
2.1. Microorganism and growth conditions
The strain of S. ruberrimus H110 was isolated by Razavi et al.
(2006) and is available at the Laboratoire des Sciences du Génie
Chimique (Nancy, France). The inoculum (150 mL) was prepared
in a 1 L baffled Erlenmeyer flask containing a medium composed
of: glucose, 10 g L1; peptone, 5 g L1; yeast extract, 3 g L1; malt
extract, 3 g L1. The culture was incubated at 27 C, 210 rpm for
60 h (until the end of the logarithmic growth phase) and then
transferred to the bioreactor.
Controlled batch cultures were performed in a 3 L bioreactor
(Applikon, ADI 1030, Holland) containing 1.5 L of culture medium.
Temperature, pH and dissolved oxygen pressure were maintained
at 23 C, 6.0 and 50%, respectively. The culture medium was composed
of: pure glycerol or raw glycerol, 33.5 g L1; (NH4)2SO4,
20 g L1; peptone, 0.5 g L1; yeast extract, 1 g L1; Na2
HPO4,
2 g L1; MgSO47H2O, 1.5 g L1 and KH2PO4, 4 g L1. Two samples
of raw glycerol (named 1 and 2), obtained from the transesterification
of rapeseed oil, were evaluated as sources of carbon and
fatty acids. The concentration of the carbon source was
determined on the basis of previous experiments. A minimum
1:10 (v/v) dilution of the raw glycerol, which corresponded to a
glycerol concentration of 67 g L1, was required to provide satisfactory
conditions for oxygen dissolution and homogenization,
and the 1:20 (v/v) dilution (33.5 g L1 glycerol) provided better
yield of carotenoids production (data not shown). Pure glycerol
was used as a control, without the addition of fatty acids (item
3.2) or with the addition of individual fatty acids (palmitic,
stearic, oleic and linoleic acids, item 3.4) at the concentration of
2.0 g L1, based on previous experiments that identified this concentration
as the best for the production of total carotenoids
(among 1.0 g L1, 2.0 g L1 and 5.0 g L1, data not shown). The
raw glycerol was kindly provided by Novance (Compiègne,
France) and the pure glycerol by VWR (Fontenay sous Bois,
France).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วิธีการ
2.1 จุลินทรีย์และเงื่อนไขการเจริญเติบโตของสายพันธุ์ของเอส ruberrimus H110 ถูกแยกออกโดย Razavi et al. (2006) และสามารถใช้ได้ที่ Laboratoire des Sciences du มารCHIMIQUE (แนนซี่, ฝรั่งเศส) เชื้อ (150 มิลลิลิตร) ถูกจัดทำขึ้นใน1 ลิตรขวดงงงัน Erlenmeyer ที่มีขนาดกลางประกอบด้วยของ: กลูโคส 10 กรัม L 1; เปปโตน, 5 กรัม L 1; สารสกัดจากยีสต์, 3 กรัม L 1; มอลต์สกัดจาก 3 กรัม L 1 วัฒนธรรมที่ได้รับการบ่มที่ 27 องศาเซลเซียส, 210 รอบต่อนาทีสำหรับ60 ชั่วโมง (จนกว่าจะสิ้นสุดของระยะการเจริญเติบโตลอการิทึม) และจากนั้นโอนไปยังเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพ. ควบคุมวัฒนธรรมชุดได้ดำเนินการในเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพ 3 L (Applikon, ADI 1030, ฮอลแลนด์) ที่มี 1.5 ลิตรของกลางวัฒนธรรม. อุณหภูมิ, pH และความดันออกซิเจนที่ละลายน้ำได้รับการดูแลที่23 องศาเซลเซียส, 6.0 และ 50% ตามลำดับ สื่อวัฒนธรรมประกอบการ: กลีเซอรีนบริสุทธิ์หรือกลีเซอรอลดิบ 33.5 กรัม L 1; (NH4) 2SO4, 20 กรัม L 1; เปปโตน, 0.5 กรัม L 1; สารสกัดจากยีสต์ 1 กรัม L 1; Na2 HPO4, 2 กรัม L 1; MgSO4? 7H2O 1.5 กรัม L 1 และ KH2PO4, 4 กรัม L 1 สองตัวอย่างของกลีเซอรอลดิบ (ชื่อที่ 1 และ 2) ที่ได้รับจาก transesterification น้ำมันเรพซีดถูกประเมินว่าเป็นแหล่งที่มาของคาร์บอนไดออกไซด์และกรดไขมัน ความเข้มข้นของแหล่งคาร์บอนที่ถูกกำหนดบนพื้นฐานของการทดลองก่อนหน้านี้ อย่างน้อย01:10 (v / v) การลดสัดส่วนของกลีเซอรอลดิบซึ่งสอดคล้องกับความเข้มข้นของกลีเซอรีน67 กรัม L 1 ถูกต้องให้พอใจเงื่อนไขสำหรับการละลายออกซิเจนและทำให้เป็นเนื้อเดียวกันและ01:20 (ปริมาตร / ปริมาตร ) เจือจาง (33.5 กรัม L 1 กลีเซอรีน) ที่ดีกว่าอัตราผลตอบแทนของการผลิตนอยด์(ไม่ได้แสดงข้อมูล) กลีเซอรีนบริสุทธิ์ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมโดยไม่มีการเพิ่มของกรดไขมัน (รายการ 3.2) หรือมีการเพิ่มของกรดไขมันของแต่ละบุคคล (ปาล์มิติ, สเตียริกกรดโอเลอิกและไลโนเลอิกรายการ 3.4) ที่มีความเข้มข้นของ2.0 กรัม L 1 ตาม เกี่ยวกับการทดลองก่อนหน้านี้ที่ระบุความเข้มข้นนี้เป็นที่ดีที่สุดสำหรับการผลิตของcarotenoids รวม(ใน 1.0 กรัม L? 1, 2.0 กรัม L 1 และ 5.0 กรัม L? 1, ไม่ได้แสดงข้อมูล) กลีเซอรอลดิบได้ให้ความกรุณาโดย Novance (Compiègne, ฝรั่งเศส) และกลีเซอรีนบริสุทธิ์โดย VWR (Fontenay sous Bois, ฝรั่งเศส)