2.10. Effect of inhibitors and surfactant agents on amylase activity
The impact of enzyme inhibitors on the enzyme activity was
studied using 5 mM (DTAB), 5 mM (DTNB), 5 mM p-hydroxymercuribenzoate,
10 mM (PMSF), b-mercaptoethanol and EDTA. In
addition, the effects of chemicals on the amylase enzyme activity
were studied using 2 M H2O2 as an oxidising agent, as well as 5%
Triton X-100, 5% Tween-80 and 10% SDS as ionic and non-ionic surfactant
agents (Ponnusamy, Zinjarde, Bhargava, Rajamohanan, &
Kumar, 2012). Purified enzyme (500 lL) was pre-incubated with
500 lL of the above additives at 70 C for 1 h in a water bath. Subsequently,
500 lL of the reaction mixture (i.e., 500 lL of enzyme
+ 500 lL of additives) was added to 500 lL of 0.1% soluble
starch in 100 mM sodium acetate buffer (pH 5.0) as described earlier.
The control was generated by substituting the purified enzyme
with the same volume of enzyme that had been heated in a boiling
water bath for 30 min (Chethan, Sree Rama, & Malleshi, 2008). As
mentioned above, the addition of purified enzyme instead of buffer to generate the control was used because, based on our preliminary
study, the results were more accurate. The activity of the enzyme
in the absence of additives was considered to represent 100%
activity
2.10. ผลของ inhibitors และ surfactant ตัวแทนกิจกรรม amylaseผลกระทบของเอนไซม์ inhibitors กิจกรรมเอนไซม์ศึกษาการใช้ 5 มม. (DTAB), 5 mM (DTNB), 5 mM p-hydroxymercuribenzoate10 มม. (PMSF), บี mercaptoethanol และ EDTA ในนอกจากนี้ ผลกระทบของสารเคมีในกิจกรรมเอนไซม์ amylaseได้ศึกษาการใช้ 2 M H2O2 เป็นตัว oxidising agent และ 5%ไตรตั้น X 100, 5% Tween 80 และ 10% SDS เป็น ionic และไม่ ionic surfactantตัวแทน (Ponnusamy, Zinjarde, Bhargava, Rajamohanan, &Kumar, 2012) เอนไซม์บริสุทธิ์ (500 จะ) ถูก incubated ล่วงหน้าด้วย500 จะสารข้างต้นที่ 70 C สำหรับ h 1 ในห้องน้ำ ในเวลาต่อมา500 จะผสมปฏิกิริยา (เช่น 500 จะของเอนไซม์+ 500 จะสาร) ถูกเพิ่ม 500 จะละลายน้ำได้ 0.1%แป้งในบัฟเฟอร์ acetate โซเดียม 100 มม. (pH 5.0) อธิบายไว้ก่อนหน้านี้สร้างตัวควบคุม โดยการแทนที่เอนไซม์บริสุทธิ์มีไดรฟ์ข้อมูลเดียวกันของเอนไซม์ที่มีความร้อนในการต้มอาบน้ำใน 30 นาที (Chethan สรีพระราม & Malleshi, 2008) เป็นดังกล่าวข้างต้น การเพิ่มของเอนไซม์บริสุทธิ์แทนบัฟเฟอร์เพื่อสร้างตัวควบคุมถูกใช้เนื่องจาก ตามเบื้องต้นของเราศึกษา ผลได้ถูกต้องมากขึ้น กิจกรรมของเอนไซม์ของสารที่พิจารณาถึง 100%กิจกรรม
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.10. Effect of inhibitors and surfactant agents on amylase activity
The impact of enzyme inhibitors on the enzyme activity was
studied using 5 mM (DTAB), 5 mM (DTNB), 5 mM p-hydroxymercuribenzoate,
10 mM (PMSF), b-mercaptoethanol and EDTA. In
addition, the effects of chemicals on the amylase enzyme activity
were studied using 2 M H2O2 as an oxidising agent, as well as 5%
Triton X-100, 5% Tween-80 and 10% SDS as ionic and non-ionic surfactant
agents (Ponnusamy, Zinjarde, Bhargava, Rajamohanan, &
Kumar, 2012). Purified enzyme (500 lL) was pre-incubated with
500 lL of the above additives at 70 C for 1 h in a water bath. Subsequently,
500 lL of the reaction mixture (i.e., 500 lL of enzyme
+ 500 lL of additives) was added to 500 lL of 0.1% soluble
starch in 100 mM sodium acetate buffer (pH 5.0) as described earlier.
The control was generated by substituting the purified enzyme
with the same volume of enzyme that had been heated in a boiling
water bath for 30 min (Chethan, Sree Rama, & Malleshi, 2008). As
mentioned above, the addition of purified enzyme instead of buffer to generate the control was used because, based on our preliminary
study, the results were more accurate. The activity of the enzyme
in the absence of additives was considered to represent 100%
activity
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.10 . ผลของการใช้กิจกรรมและตัวแทนจากผลกระทบของตัวยับยั้งเอนไซม์
เรียนโดยใช้กิจกรรมเอนไซม์ 5 มม. ( DTAB ) , 5 มม. ( dtnb ) p-hydroxymercuribenzoate 5 มม.
10 มม. ( PMSF และ EDTA ) , b-mercaptoethanol . ใน
นอกจากนี้ผลของสารเคมีต่อกิจกรรมของเอนไซม์อะไมเลส
ศึกษาโดยใช้ 2 เมตรแบตเตอรี่เป็น oxidising เจ้าหน้าที่รวมทั้ง 5 %
Triton X-100 ,tween-80 5% และ 10% SDS เป็นแคลเซียมไอออนและสารลดแรงตึงผิว
ตัวแทน ( ponnusamy zinjarde bhargava rajamohanan , , , ,
& Kumar , 2012 ) เอนไซม์บริสุทธิ์ ( 500 จะ ) คือก่อนแยก
500 จะปรุงแต่งข้างต้นที่ 70 C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ในการอาบน้ำ ต่อมา
500 จะได้จากปฏิกิริยาของส่วนผสม ( เช่น 500 จะเอนไซม์
500 จะสาร ) คือเพิ่ม 500 จะ 0.1% ละลาย
แป้งใน 100 mM โซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ pH 5.0 ) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้
การควบคุมที่ถูกสร้างขึ้นโดยใช้เอนไซม์
กับปริมาณเดียวกันของเอนไซม์ที่ถูกให้ความร้อนในการต้ม
น้ำที่อาบ 30 นาที ( chethan ซรีพระราม& malleshi , 2551 ) โดย
ดังกล่าวข้างต้นโดยเอนไซม์แทนบัฟเฟอร์เพื่อสร้างการควบคุมที่ใช้เพราะตาม
เบื้องต้นของเราการศึกษา , ผลลัพธ์ที่ถูกต้องมากขึ้น กิจกรรมของเอนไซม์
ในกรณีที่ไม่มีสารถือว่าเป็นตัวแทนของกิจกรรม 100 %
การแปล กรุณารอสักครู่..