Samples are prepared in a standard,

Samples are prepared in a standard, non-reducing loading buffer for SDS-PAGE. No reducing agent or boiling are necessary since these would interfere with refolding of the enzyme. A suitable substrate (e.g. gelatin or casein for protease detection) is embedded in the resolving gel during preparation of the acrylamide gel. Following electrophoresis, the SDS is removed from the gel (or zymogram) by incubation in unbuffered Triton X-100, followed by incubation in an appropriate digestion buffer, for an optimized length of time at 37 °C. The zymogram is subsequently stained (commonly with Amido Black or Coomassie Brilliant Blue), and areas of digestion appear as clear bands against a darkly stained background where the substrate has been degraded by the enzyme.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวอย่างจัดเตรียมไว้ในบัฟเฟอร์มาตรฐาน ไม่ลดการโหลดสำหรับ SDS-หน้า ลดตัวแทนหรือการต้มไม่จำเป็น เพราะเหล่านี้จะรบกวน refolding ของเอนไซม์นี้ เหมาะกับพื้นผิว (เช่นเจลาตินหรือเคซีนสำหรับการตรวจหาโปรติเอส) ฝังอยู่ในเจ resolving เตรียมของอะคริลาไมด์เจล ต่ออิ SDS ถูกลบออกจากเจล (หรือ zymogram) โดยในการติดตั้ง Triton X-100 ตาม ด้วยในบัฟเฟอร์การย่อยอาหารที่เหมาะสม สำหรับระยะเวลาที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเหมาะสม ต่อมามีการย้อมสี zymogram (โดยทั่วไป มีสีดำอยู่หรือ Coomassie Blue สดใส), และพื้นที่ย่อยปรากฏเป็นวงชัดเจนกับพื้นหลังมืด ๆ ย้อมที่พื้นผิวมีการสลายตัว โดยเอนไซม์นี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กลุ่มตัวอย่างมีการจัดทำในมาตรฐานที่ไม่ใช่การลดบัฟเฟอร์โหลด SDS-PAGE ไม่มีตัวแทนการลดหรือเดือดเป็นสิ่งจำเป็นเพราะสิ่งเหล่านี้จะยุ่งเกี่ยวกับ refolding ของเอนไซม์ สารตั้งต้นที่เหมาะสม (เช่นเจลาตินหรือเคซีนสำหรับการตรวจสอบโปรติเอส) ถูกฝังอยู่ในเจลการแก้ไขในระหว่างการเตรียมเจลริลาไมด์ ต่อไปนี้ electrophoresis, เอกสารความปลอดภัยจะถูกลบออกจากเจล (หรือ zymogram) โดยการบ่มใน unbuffered Triton X-100 ตามด้วยการบ่มในบัฟเฟอร์การย่อยอาหารที่เหมาะสมสำหรับความยาวที่ดีที่สุดของเวลาที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส zymogram เปื้อนต่อมา (ปกติจะมีสีดำหรือสี Amido Coomassie สีฟ้าสดใส) และพื้นที่ของการย่อยอาหารปรากฏวงดนตรีที่เป็นที่ชัดเจนกับพื้นหลังสีเข้มที่พื้นผิวที่ไ​​ด้รับการสลายตัวโดยเอนไซม์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตัวอย่างที่เตรียมไว้ในมาตรฐานที่ไม่ลดโหลดบัฟเฟอร์สำหรับการศึกษา . ไม่ลด ตัวแทน หรือต้มเป็น refolding ตั้งแต่เหล่านี้จะรบกวนการทำงานของเอนไซม์ พื้นผิวที่เหมาะสม ( เช่น เจลาติน หรือการตรวจหาโปรตีนเคซีน ) ฝังอยู่ในการแก้ปัญหาในระหว่างการเตรียมการของอะคริลาไมด์เจลเจล ดังต่อไปนี้ electrophoresis , SDS จะถูกลบออกจากเจล ( หรือทดลอง ) โดยบ่มใน unbuffered Triton X-100 , ตามด้วยการบ่มในบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับการเพิ่มประสิทธิภาพการย่อยอาหาร , ความยาวของเวลาที่อุณหภูมิ 37 องศา ไอโซไซม์คือต่อมาเปื้อน ( ปกติกับ amido เหล่านี้น่าจะเป็นสีดำหรือสีฟ้าสดใส ) , และพื้นที่ของการย่อยอาหารปรากฏเป็นวงชัดเจน กับพื้นหลังมืด ๆเปื้อนที่พื้นผิวได้ถูกย่อยสลายด้วยเอนไซม์