Protein EstimationProtein content o

Protein Estimation
Protein content of papain was determined by the method of Bradford (1976), using
ovalbumin as the standard protein except where otherwise stated. Protein concentration
during chromatography was followed by reading the absorbance at 275nm on Jenway
6405 spectrophotometer.
Preparation of Tiger Nut Protein Homogenate
Fractionation of ground tiger nut sample was carried out as described by Bautista et al.,
(1990).
Kinetics Studies of Papain
Km and Vmax of papain were determined from Lineweaver -Burk plots of initial velocity
data at different concentration of casein (0.1-1.0gml).
64(2014) XX-XX
MITTEILUNGEN KLOSTERNEUBURG
www.mitt-klosterneuburg.com
6 Month Year
Optimum temperature
The optimum temperature was determined by incubating reaction mixture at different
temperature, ranging from 35oC - 110oC for 30min using SSY-H stainless steel
Thermostatic water Bath by method of Chu chi Ming et al.,(2002).
Optimum pH
Papain activity of partially purified enzyme was measured in the range of pH3.5 to 9.0
using the following buffer, 0.05M Tris HCl buffer 7.5 9.0, Sodium acetate buffer pH 3.5
to 5.5, and Phosphate buffer pH 6.0 to 7.5 by method of Chu chi Ming et al.,2002
Effect of substrate concentration
The effect of substrate concentration on papain activity was determined.
Hydrolysis of Tiger nut protein homogenate
The hydrolysis was carried out by a modification of methods of Calderon de la Barca et
al., (2000); and that of Nelson et al, (2001). This was carried out as in the assay section
but casein was replaced with different concentrations of Tiger nut protein homogenate
(0.1 – 1.0gml). The reaction mixture was also incubated at different period of time (10 –
120mins). This experiment was also carried out in the presence of different
concentrations of O- phthaldialdehyde (OPA). Proteins hydrolysis was monitored at
different incubation time of 0, 10, 30, 60 and 120mins at 37°C and pH 7.5 at 340nm
using Jenway 6405 UV/Visible spectrophotometer model.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Protein EstimationProtein content of papain was determined by the method of Bradford (1976), usingovalbumin as the standard protein except where otherwise stated. Protein concentrationduring chromatography was followed by reading the absorbance at 275nm on Jenway6405 spectrophotometer.Preparation of Tiger Nut Protein HomogenateFractionation of ground tiger nut sample was carried out as described by Bautista et al.,(1990).Kinetics Studies of PapainKm and Vmax of papain were determined from Lineweaver -Burk plots of initial velocitydata at different concentration of casein (0.1-1.0gml).64(2014) XX-XXMITTEILUNGEN KLOSTERNEUBURGwww.mitt-klosterneuburg.com6 Month YearOptimum temperatureThe optimum temperature was determined by incubating reaction mixture at differenttemperature, ranging from 35oC - 110oC for 30min using SSY-H stainless steelThermostatic water Bath by method of Chu chi Ming et al.,(2002).Optimum pHPapain activity of partially purified enzyme was measured in the range of pH3.5 to 9.0using the following buffer, 0.05M Tris HCl buffer 7.5 9.0, Sodium acetate buffer pH 3.5to 5.5, and Phosphate buffer pH 6.0 to 7.5 by method of Chu chi Ming et al.,2002Effect of substrate concentrationThe effect of substrate concentration on papain activity was determined.Hydrolysis of Tiger nut protein homogenateThe hydrolysis was carried out by a modification of methods of Calderon de la Barca etal., (2000); และที่ของเนลสัน et al, (2001) นี้ได้ดำเนินการในส่วนที่ต้องการทดสอบแต่เคซีนถูกแทนที่ ด้วยความเข้มข้นแตกต่างกันของเสือถั่วโปรตีน homogenate(0.1 – 1.0gml) ส่วนผสมของปฏิกิริยายังมี incubated ที่แตกต่างกันระยะเวลา (10-120mins) การทดลองนี้ยังดำเนินการในที่ต่าง ๆความเข้มข้นของ O-phthaldialdehyde (OPA) ย่อยสลายโปรตีนถูกตรวจสอบติดตามเวลาบ่มต่างกัน 0, 10, 30, 60 และ 120mins ที่ 37° C และ pH 7.5 ที่ 340nmใช้รุ่นสเปค Jenway 6405 UV/มอง เห็นได้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โปรตีนประมาณค่า
ปริมาณโปรตีนของปาเปนถูกกำหนดโดยวิธีการของแบรดฟอนี้ (1976) โดยใช้
ovalbumin เป็นโปรตีนมาตรฐานยกเว้นในกรณีที่ระบุไว้เป็นอย่างอื่น โปรตีนเข้มข้น
ระหว่างโครมาโตตามมาด้วยการอ่านการดูดกลืนแสงที่ 275nm บน Jenway
6405 spectrophotometer.
เตรียมเสืออ่อนนุชโปรตีน homogenate
Fractionation จากพื้นดินตัวอย่างถั่วเสือได้ดำเนินการตามที่อธิบาย Bautista et al.
(1990).
จลนพลศาสตร์การศึกษา Papain
Km และ Vmax ของปาเปนได้รับการพิจารณาจากแปลง Lineweaver -Burk ของความเร็วเริ่มต้น
ข้อมูลที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของเคซีน (0.1-1.0gml).
64 (2014) XX-XX
Mitteilungen Klosterneuburg
www.mitt-klosterneuburg.com
6 เดือนปี
อุณหภูมิที่เหมาะสม
อุณหภูมิที่เหมาะสม ถูกกำหนดโดยการบ่มผสมปฏิกิริยาที่แตกต่างกัน
อุณหภูมิตั้งแต่ 35 องศาเซลเซียส - 110oC สำหรับ 30 นาทีโดยใช้สแตนเลส SSY-H
.. อ่างน้ำอุณหภูมิโดยวิธีการของชูจิหมิง, et al (2002)
ค่า pH ที่เหมาะสม
กิจกรรมปาเปนของเอนไซม์บางส่วนได้รับการวัด ในช่วงของ pH3.5 ไป 9.0
ใช้บัฟเฟอร์ต่อไปนี้ 0.05M Tris HCl บัฟเฟอร์ 7.5 9.0 โซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ค่า pH 3.5
ไป 5.5 และฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH 6.0-7.5 โดยวิธีการของชูจิหมิง, et al., 2002
ผลของการ ความเข้มข้นของสาร
ผลของความเข้มข้นของสารปาเปนกับกิจกรรมที่ถูกกำหนด.
ไฮโดรไลซิโปรตีนถั่วเสือ homogenate
ย่อยสลายได้ดำเนินการโดยการปรับเปลี่ยนวิธีการของ Calderon de la Barca et
al, (2000). และที่ของเนลสัน, et al (2001) นี้ได้รับการดำเนินการเช่นเดียวกับในส่วนของการทดสอบ
แต่เคซีนถูกแทนที่ด้วยความเข้มข้นแตกต่างกันของเสือ homogenate โปรตีนถั่ว
(0.1 - 1.0g มล.) ผสมปฏิกิริยายังถูกบ่มในช่วงเวลาที่แตกต่างกันของเวลา (10 -
120 นาที) การทดลองนี้ยังได้ดำเนินการในการปรากฏตัวของที่แตกต่างกัน
มีความเข้มข้นของ phthaldialdehyde O- (OPA) โปรตีนไฮโดรไลซ์ได้รับการตรวจสอบใน
เวลาที่แตกต่างกันของการบ่ม 0, 10, 30, 60 และ 120 นาทีที่ 37 องศาเซลเซียสและมีค่า pH 7.5 ที่ 340nm
ใช้ Jenway 6405 UV / รุ่น spectrophotometer ที่มองเห็นได้