2. Materials andmethods
2.1. Experiments
Two studies were conducted to evaluate the suitability of GDDY as a
protein source for rainbow trout. The first study consisted of an in vivo
digestibility assessment to determine apparent digestibility coefficients
(ADCs) for protein, lipid and energy and apparent availability coefficients
(AACs) for amino acids and phosphorus. The second study
consisted of a nine-week feeding trial with growth performance, nutrient
retention, feed conversion, diet palatability (determined as relative
feed consumption), and diet digestibility as response variables. Fish in
these studies were handled and treated in accordance with guidelines
approved by the U.S. Fish and Wildlife Service.
2.2. In vivo ingredient digestibility determinations
2.2.1. Study design
Themethods of Cho et al. (1982) and Bureau et al. (1999) were used
with additional modifications described below to estimate ADCs of
GDDY in rainbow trout. A complete reference diet (Table 1) meeting
or exceeding all known nutritional requirements of rainbow trout
(National Research Council, NRC, 2011)with yttrium oxide as indigestible
marker was blended with the test ingredient (GDDY) in a 70:30 ratio
(dry-weight basis). Both the reference and test diet were manufactured
by cooking extrusion.
2.2.2. Fish
Fish (approximately 300 g ± 23 g, mean ± SD initial weight) were
stocked in tanks at 20 fish per 200-L-poly tanks. Water temperature
was maintained at 14 °C in a recirculating system. Lighting was maintained
on a 13:11 h diurnal cycle. Diets were randomly assigned to
three replicate tanks of fish. Fish were fed twice daily to apparent satiation
beginning 14 days prior to the first fecal collection.
2.2.3. Feces collections
Feces fromfish in each replicate tankwere obtained bymanual stripping
(Austreng, 1978). In brief, all fish in each tank were netted, anesthetized
with MS-222 (tricaine methanesulfonate, Western Chemical
Company, Ferndale, Washington, USA), dried and gentle pressure was
applied to the lower abdominal region to express fecal matter into a
plastic weighing pan. Care was taken to exclude urinary excretions
from the collection. Fecal samples for a given tank were freeze-dried,
ground with a mortar and pestle, and stored at −20 °C until chemical
analyses (described below) were performed.
2.2.4. Analytical methods
Drymatter analysis of ingredients, diets and feceswas performed according
to standard methods (AOAC, 1995). Yttrium and phosphorus
were determined in diets and feces by inductively coupled plasma
atomic absorption spectrophotometry following nitric acid digestion
(Anderson, 1996). Crude protein (N × 6.25) was determined in ingredients,
diets and feces by the Dumas method (AOAC, 1995) on a Leco
TruSpecNnitrogen determinator (LECO Corporation, St. Joseph,Michigan,
USA). Total energy was determined by isoperibol bomb calorimetry
(Parr 6300, Parr Instrument Company Inc., Moline, Illinois, USA). Lipid
was determined by petroleum ether extraction using an Ankom XT10
(Ankom Technologies, Macedon, New York, USA). Diet, ingredient and
fecal amino acids were quantified following acid hydrolysis utilizing a
Beckman 7300 amino acid analyzer and post-column derivitization
with ninhydrin (AAA Laboratory, Mercer Island,WA, USA).
2.2.5. Digestibility equations
Apparent digestibility coefficients of each nutrient in the test diet and
GDDYwere calculated according to established equations (Forster, 1999;
Kleiber, 1961):
ADCNdiet ¼ 100
ð%marker in diet % nutrient in fecesÞ
ð%marker in feces % nutrient in dietÞ
Table 1
Composition of digestibility reference diet (% dry-weight) fed to
rainbow trout.
Ingredients %
Wheat floura 28.3
Squid meal 25.0
Soy protein concentrateb 17.1
Fish oilc 13.4
Corn gluten meald 8.3
Soybean meale 4.3
Vitamin premix ARSf 1.0
Chromic oxideg 1.0
Choline chlorideg 0.6
Taurineh 0.5
Stay-C 35i 0.2
Trace mineral premixj 0.1
Yttrium oxideg 0.1
2. วัสดุ andmethods
2.1 การทดลอง
สองการศึกษาได้ดำเนินการในการประเมินความเหมาะสมของ GDDY เป็น
แหล่งโปรตีนสำหรับเรนโบว์เทราท์ การศึกษาครั้งแรกประกอบไปด้วยในร่างกาย
การประเมินการย่อยการกำหนดค่าสัมประสิทธิ์การย่อยได้ชัดเจน
(ADCs) สำหรับโปรตีนไขมันและพลังงานและค่าสัมประสิทธิ์ความพร้อมที่ชัดเจน
(AACS) ให้กรดอะมิโนและฟอสฟอรัส การศึกษาที่สอง
ประกอบด้วยการทดลองให้อาหารเก้าสัปดาห์กับการเจริญเติบโตของสารอาหารที่
เก็บรักษา, การแปลงอาหารอร่อยอาหาร (กำหนดเป็นญาติ
ปริมาณอาหารที่กิน) และการย่อยอาหารเป็นตัวแปรตอบสนอง ปลาใน
การศึกษาเหล่านี้ถูกจัดการและรับการรักษาตามแนวทาง
การอนุมัติจากปลาและสัตว์ป่าบริการสหรัฐอเมริกา.
2.2 ในร่างกายส่วนผสมย่อยหาความ
2.2.1 การออกแบบการศึกษา
Themethods โช et al, (1982) และสำนัก et al, (1999) ถูกนำมาใช้
กับการแก้ไขเพิ่มเติมอธิบายไว้ด้านล่างเพื่อประเมิน ADCs ของ
GDDY ในเรนโบว์เทราท์ อาหารอ้างอิงที่สมบูรณ์ (ตารางที่ 1) การประชุม
หรือเกินความต้องการทางโภชนาการของทุกคนที่รู้จักเรนโบว์เทราท์
(สภาวิจัยแห่งชาติอาร์ซี 2011) กับอิตเทรียมออกไซด์ย่อย
เครื่องหมายถูกผสมกับส่วนผสมที่ทดสอบ (GDDY) ในอัตราส่วน 70:30
(แห้ง พื้นฐานน้ำหนัก) ทั้งอาหารการอ้างอิงและการทดสอบกำลังการผลิต
โดยการปรุงอาหารการอัดขึ้นรูป.
2.2.2 ปลา
ปลา (ประมาณ 300 กรัม± 23 กรัมค่าเฉลี่ย± SD น้ำหนักเริ่มต้น) ได้รับการ
เก็บไว้ในถังที่ 20 ปลาต่อถัง 200-L-Poly อุณหภูมิของน้ำที่
ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 14 ° C ในระบบหมุนเวียน โคมไฟถูกเก็บรักษาไว้
บน 13:11 H วงจรรายวัน อาหารที่ถูกสุ่มให้
สามรถถังซ้ำของปลา ปลาเป็นอาหารวันละสองครั้งเพื่อป้อยอชัดเจน
เริ่มต้น 14 วันก่อนที่จะมีการเก็บอุจจาระครั้งแรก.
2.2.3 คอลเลกชันอุจจาระ
อุจจาระ fromfish ในแต่ละซ้ำ tankwere รับ bymanual ลอก
(Austreng, 1978) ในช่วงสั้น ๆ ปลาทั้งหมดในแต่ละถังตาข่ายอสัญญี
กับ MS-222 (tricaine methanesulfonate เคมีตะวันตก
บริษัท เฟิร์นเดล, Washington, USA) แห้งและความดันอ่อนโยนถูก
นำไปใช้กับพื้นที่ท้องลดลงในการแสดงอุจจาระเป็น
พลาสติกชั่งน้ำหนัก กระทะ การดูแลถูกนำตัวไปยกเว้นขับถ่ายปัสสาวะ
จากคอลเลกชัน อุจจาระถังได้รับการถูกแช่แข็งแห้ง
กับพื้นปูนและสากและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสจนกว่าเคมี
วิเคราะห์ (อธิบายด้านล่าง) ได้ดำเนินการ.
2.2.4 วิธีการวิเคราะห์
Drymatter วิเคราะห์ส่วนผสมอาหารและ feceswas ปฏิบัติตาม
วิธีการมาตรฐาน (AOAC, 1995) อิตเทรียมและฟอสฟอรัส
ได้รับการพิจารณาในอาหารและอุจจาระโดย inductively คู่พลาสมา
อะตอม spectrophotometry ดูดซึมกรดไนตริกต่อไปนี้การย่อยอาหาร
(Anderson, 1996) โปรตีน (N × 6.25) ถูกกำหนดในส่วนผสม
อาหารและอุจจาระโดยวิธีมัส (AOAC, 1995) ใน Leco
determinator TruSpecNnitrogen (LECO คอร์ปอเรชั่นเซนต์โจเซฟ, Michigan,
USA) พลังงานทั้งหมดถูกกำหนดโดย isoperibol calorimetry ระเบิด
(6300 พาร์พาร์ตราสาร บริษัท อิงค์, Moline, อิลลินอยส์, สหรัฐอเมริกา) ไขมัน
ถูกกำหนดโดยสกัดปิโตรเลียมอีเทอร์ใช้ Ankom XT10
(Ankom Technologies, มาซีโดเนีย, New York, USA) อาหารส่วนผสมและ
กรดอะมิโนอุจจาระถูกวัดต่อไปนี้การย่อยสลายกรดใช้
วิเคราะห์กรดอะมิโนเบคค์ 7300 และ derivitization โพสต์คอลัมน์
กับ ninhydrin (AAA ห้องปฏิบัติการ, เกาะเมอร์เซอร์, WA, USA).
2.2.5 สมการการย่อยได้
ค่าสัมประสิทธิ์การย่อยได้ชัดเจนของสารอาหารแต่ละในอาหารการทดสอบและการ
GDDYwere คำนวณตามสมการจัดตั้ง (ฟอสเตอร์ 1999;
Kleiber, 1961):
ADCNdiet ¼ 100
% d เครื่องหมายในอาหาร? % สารอาหารในfecesÞ
Ðเครื่องหมาย% ในอุจจาระ? % สารอาหารในdietÞ
ตารางที่ 1
องค์ประกอบของอาหารอ้างอิงย่อย (% แห้งน้ำหนัก) เลี้ยง
เรนโบว์เทราท์.
ส่วนผสม%
ข้าวสาลี floura 28.3
ปลาหมึกอาหาร 25.0
โปรตีนถั่วเหลือง concentrateb 17.1
ปลา oilc 13.4
ตังข้าวโพด meald 8.3
ถั่วเหลือง meale 4.3
วิตามินพรีมิกซ์ ARSF 1.0
Chromic oxideg 1.0
โคลีน chlorideg 0.6
Taurineh 0.5
Stay-C 35i 0.2
แร่ธาตุ premixj 0.1
อิตเทรียม oxideg 0.1
การแปล กรุณารอสักครู่..
