1. J Cell Biol. 2014 Nov 3. pii: jc

1. J Cell Biol. 2014 Nov 3. pii: jcb.201407071. [Epub ahead of print]

A fluorescent tagging approach in Drosophila reveals late endosomal trafficking
of Notch and Sanpodo.

Couturier L(1), Trylinski M(2), Mazouni K(1), Darnet L(1), Schweisguth F(3).

Author information:
(1)Developmental and Stem Cell Biology Department, Institut Pasteur, 75015 Paris,
France Centre National de la Recherche Scientifique, URA2578, 75015 Paris,
France.
(2)Developmental and Stem Cell Biology Department, Institut Pasteur, 75015 Paris,
France Centre National de la Recherche Scientifique, URA2578, 75015 Paris, France
Master Biosciences, École Normale Supérieure de Lyon, 75015 Paris, France.
(3)Developmental and Stem Cell Biology Department, Institut Pasteur, 75015 Paris,
France Centre National de la Recherche Scientifique, URA2578, 75015 Paris, France
[e-mail].

Signaling and endocytosis are highly integrated processes that regulate cell
fate. In the Drosophila melanogaster sensory bristle lineages, Numb inhibits the
recycling of Notch and its trafficking partner Sanpodo (Spdo) to regulate cell
fate after asymmetric cell division. In this paper, we have used a dual
GFP/Cherry tagging approach to study the distribution and endosomal sorting of
Notch and Spdo in living pupae. The specific properties of GFP, i.e., quenching
at low pH, and Cherry, i.e., slow maturation time, revealed distinct pools of
Notch and Spdo: cargoes exhibiting high GFP/low Cherry fluorescence intensities
localized mostly at the plasma membrane and early/sorting endosomes, whereas low
GFP/high Cherry cargoes accumulated in late acidic endosomes. These properties
were used to show that Spdo is sorted toward late endosomes in a Numb-dependent
manner. This dual-tagging approach should be generally applicable to study the
trafficking dynamics of membrane proteins in living cells and tissues.

© 2014 Couturier et al.

PMID: 25365996 [PubMed - as supplied by publisher]

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

1. J เซลล์ Biol. 2014 3 nov pii: jcb.201407071 [Epub ก่อนพิมพ์]วิธีการระบุป้ายเรืองแสงในแมลงพบปลาย endosomal ค้าบากและ SanpodoCouturier L(1), Trylinski M(2), Mazouni K(1), Darnet L(1), Schweisguth F(3)รายละเอียดผู้เขียน: (1)พัฒนา และเกิดเซลล์ชีววิทยาแผนก สถาบันปาสเตอร์ 75015 ปารีสฝรั่งเศสศูนย์แห่งชาติ de la Recherche Scientifique, URA2578, 75015 ปารีสฝรั่งเศส(2)พัฒนา และเกิดเซลล์ชีววิทยาแผนก สถาบันปาสเตอร์ 75015 ปารีสฝรั่งเศสศูนย์แห่งชาติ de la Recherche Scientifique, URA2578, 75015 ปารีส ฝรั่งเศสหลักเวลาออก École Normale Supérieure de Lyon, 75015 ปารีส ฝรั่งเศส(3)พัฒนา และเกิดเซลล์ชีววิทยาแผนก สถาบันปาสเตอร์ 75015 ปารีสฝรั่งเศสศูนย์แห่งชาติ de la Recherche Scientifique, URA2578, 75015 ปารีส ฝรั่งเศส[e-mail] endocytosis ใจกระบวนการบูรณาการสูงที่ควบคุมเซลล์ชะตากรรม ในแมลงวันทองพองขนทางประสาทสัมผัสเชื้อชาติ Numb ยับยั้งการ รีไซเคิลของรอยและคู่ค้าของ Sanpodo (Spdo) การควบคุมเซลล์ชะตากรรมหลังจากแบ่งเซลล์ asymmetric ในเอกสารนี้ เราใช้คู่กับGFP/เชอร์รี่ ติดป้ายวิธีการศึกษาการกระจายและการเรียงลำดับ endosomalบากและ Spdo ในชีวิต pupae คุณสมบัติเฉพาะของ GFP เช่น ชุบที่ค่า pH ต่ำ และเชอร์รี่ เช่น พ่อแม่เวลาช้า สระทั้งหมดของการเปิดเผยบากและ Spdo: cargoes อย่างมีระดับสูง/ต่ำ GFP fluorescence เชอร์รี่ปลดปล่อยก๊าซภาษาท้องถิ่นส่วนใหญ่ในพลาสมาเมมเบรนและเรียงลำดับ ต้น/endosomes ในขณะที่ต่ำ Cargoes เชอร์รี่ GFP/สูง สะสมในสายเปรี้ยว endosomes คุณสมบัติเหล่านี้ใช้เพื่อแสดงว่า Spdo เรียงลำดับไปทาง endosomes สายใน Numb ขึ้นอยู่กับลักษณะการ วิธีการติดป้ายแบบนี้ควรใช้โดยทั่วไปการเรียนการเมมเบรนโปรตีนในเนื้อเยื่อและเซลล์ชีวิตค้ามนุษย์แปลง© 2014 couturier et alPMID: 25365996 [PubMed - จัดให้ผู้เผยแพร่]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

1. J Biol เซลล์ 2014 พฤศจิกายน 3. PII: jcb.201407071 [Epub ก่อนพิมพ์] วิธีการติดแท็กเรืองแสงในแมลงหวี่แสดงให้เห็นว่าการค้ามนุษย์ endosomal ปลายของรอยและ Sanpodo กูตู L (1), Trylinski M (2), Mazouni K (1), Darnet L (1), Schweisguth F (3) . ข้อมูลผู้แต่ง: (1) กรมพัฒนาการชีววิทยาและเซลล์ต้นกำเนิด, สถาบันปาสเตอร์, 75015 ปารีส, ฝรั่งเศสแห่งชาติศูนย์ De La Recherche Scientifique, URA2578, 75015 ปารีส, ฝรั่งเศส(2) ภาควิชาชีววิทยาพัฒนาการและเซลล์ต้นกำเนิด, สถาบันปาสเตอร์, 75015 ปารีส , ฝรั่งเศสแห่งชาติศูนย์ De La Recherche Scientifique, URA2578, 75015 ปารีส, ฝรั่งเศสโทชีววิทยาศาสตร์, École Normale Supérieure de Lyon, 75015 ปารีส, ฝรั่งเศส(3) ภาควิชาชีววิทยาพัฒนาการและเซลล์ต้นกำเนิด, สถาบันปาสเตอร์, 75015 ปารีส, ฝรั่งเศสแห่งชาติศูนย์เดอลา Recherche Scientifique, URA2578, 75015 ปารีส, ฝรั่งเศส[e-mail] สัญญาณและ endocytosis มีกระบวนการที่ควบคุมเซลล์บูรณาการชะตากรรม ในแมลงหวี่ melanogaster lineages ขนประสาทสัมผัสชายับยั้งการรีไซเคิลของรอยและการค้าหุ้นส่วน Sanpodo (Spdo) เพื่อควบคุมเซลล์ชะตากรรมหลังจากการแบ่งเซลล์แบบอสมมาตร ในบทความนี้เราได้ใช้คู่GFP วิธีการติดแท็ก / เชอร์รี่ที่จะศึกษาการกระจายและการเรียงลำดับของ endosomal รอยและ Spdo ในดักแด้อาศัยอยู่ คุณสมบัติเฉพาะของ GFP คือดับที่ pH ต่ำและเชอร์รี่คือเวลาสุกช้าเผยให้เห็นสระว่ายน้ำที่แตกต่างของรอยและ Spdo: สินค้าจัดแสดง GFP สูง / ต่ำเชอร์รี่เข้มการเรืองแสงเฉพาะส่วนใหญ่ที่เมมเบรนพลาสม่าและต้น / endosomes การเรียงลำดับ ในขณะที่ต่ำGFP / สินค้าเชอร์รี่สูงสะสมในช่วงปลายเอ็นโดโซมที่เป็นกรด คุณสมบัติเหล่านี้ถูกนำมาใช้เพื่อแสดงให้เห็นว่า Spdo จะเรียงต่อ endosomes ในช่วงปลายชาขึ้นอยู่กับลักษณะ วิธีที่สองการติดแท็กนี้จะมีผลบังคับใช้โดยทั่วไปในการศึกษาการเปลี่ยนแปลงของการค้ามนุษย์ของโปรตีนเมมเบรนในการดำรงชีวิตเซลล์และเนื้อเยื่อ© 2014 กูตูและคณะPMID: 25365996 [PubMed - ในขณะที่จัดทำโดยสำนักพิมพ์]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

1 เคเซลล์ วท บ วท . 2010 พฤศจิกายน 3 พี : jcb.201407071 . [ พิมพ์ ] ePub ก่อน

เรืองแสงให้แนวทางในแมลงหวี่ เผยสาย endosomal ค้า
ของรอย sanpodo และ

เสื้อผ้าฉัน ( 1 ) trylinski m ( 2 ) , mazouni K ( 1 ) darnet L ( 1 ) schweisguth F ( 3 ) . ข้อมูลผู้เขียน :


( 1 ) การพัฒนาและสเต็มเซลล์ชีววิทยาแผนก , Institut ปาสเตอร์ ,
75015 ปารีสศูนย์บริการแห่งชาติ de la ใน scientifique ura2578 75015 , , ปารีส , ฝรั่งเศสฝรั่งเศส
.
( 2 ) การพัฒนาและภาควิชาชีววิทยาเซลล์ต้นกำเนิด , 75015 Institut ปาสเตอร์ , ปารีส ,
ฝรั่งเศสศูนย์ de la ใน scientifique ura2578 75015 , ปารีส , ฝรั่งเศส , วิทยาศาสตร์ชีวภาพ
อาจารย์เอกอลธรรมดา sup é rieure de Lyon 75015 ปารีส ฝรั่งเศส .
( 3 ) การพัฒนาและสเต็มเซลล์ชีววิทยาแผนก , Institut ปาสเตอร์ ,75015 ปารีส
ฝรั่งเศสศูนย์ de la ใน scientifique ura2578 75015 ปารีส , ฝรั่งเศส , ,
fschweis @ ปาสเตอร์ . Fr .

การส่งสัญญาณและเอนโดไซโทซิสจะขอรวมกระบวนการที่ควบคุมเซลล์
โชคชะตา ในเขตมิสซังความรู้สึกโกรธเมื่อชายับยั้ง
รีไซเคิลของรอยและการค้าคู่ sanpodo ( spdo ) เพื่อควบคุมโชคชะตาเซลล์
หลังจากการแบ่งเซลล์ .ในบทความนี้เราได้ใช้ GFP / เชอร์รี่แท็กคู่
วิธีการศึกษาการกระจายและการเรียงลำดับของ endosomal
รอย spdo ในการดำรงชีวิตและดักแด้ . คุณสมบัติเฉพาะของ GFP ( quenching
ที่ pH ต่ำ และเชอร์รี่ คือ เวลาสุกช้า เปิดเผยชัดเจน และสระว่ายน้ำของ
รอย spdo : สินค้าจัดแสดงเข้มเรืองแสง GFP / สูงต่ำ
เชอร์รี่ส่วนใหญ่ถิ่นที่เยื่อหุ้มเซลล์และต้น / จัดเรียง endosomes ในขณะที่น้อย
GFP / สูงเชอร์รี่ cargoes สะสมสายเปรี้ยว endosomes . คุณสมบัติ
เหล่านี้ถูกนำมาใช้เพื่อแสดงให้เห็นว่า spdo จะเรียงต่อ endosomes สายในชาขึ้นอยู่กับ
ลักษณะ สองตัวนี้ควรใช้วิธีการทั่วไปเพื่อศึกษาพลวัตของเมมเบรนโปรตีนในค้า

ชีวิตเซลล์และเนื้อเยื่อสงวนลิขสิทธิ์ 2010 เสื้อผ้า et al .

pmid : 25365996 [ PubMed - จัดโดยสำนักพิมพ์ ]