A large strain collection comprisin

A large strain collection comprising antagonistic bacteria was screened for novel detergent proteases. Several strains displayed protease activity on agar plates containing skim milk but were inactive in liquid media. Encapsulation of cells in alginate beads induced protease production. Stenotrophomonas maltophilia emerged as best performer under washing conditions. For identification of wash-active proteases, four extracellular serine proteases called StmPr1, StmPr2, StmPr3 and StmPr4 were cloned. StmPr2 and StmPr4 were sufficiently overexpressed in E. coli. Expression of StmPr1 and StmPr3 resulted in unprocessed, insoluble protein. Truncation of most of the C-terminal domain which has been identified by enzyme modeling succeeded in expression of soluble, active StmPr1 but failed in case of StmPr3.

From laundry application tests StmPr2 turned out to be a highly wash-active protease at 45 °C. Specific activity of StmPr2 determined with suc-l-Ala-l-Ala-l-Pro-l-Phe-p-nitroanilide as the substrate was 17 ± 2 U/mg. In addition we determined the kinetic parameters and cleavage preferences of protease StmPr2.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

คอลเลกชันต้องใช้ขนาดใหญ่ที่ประกอบด้วยต่อต้านแบคทีเรียถูกฉายในผงซักฟอก proteases นวนิยาย หลายสายพันธุ์แสดงกิจกรรมรติเอสบนแผ่น agar ประกอบด้วย skim นม แต่ก็ไม่ได้ใช้งานในสื่อของเหลว Encapsulation ของเซลล์ในเม็ดแอลจิเนตเกิดผลิตรติเอส Stenotrophomonas maltophilia เกิดเป็นส่วนนักแสดงภายใต้เงื่อนไขการซักผ้า สำหรับรหัสของการใช้งานล้าง proteases, proteases แถ extracellular สี่ที่เรียกว่า StmPr1, StmPr2, StmPr3 และ StmPr4 ถูกโคลน StmPr2 และ StmPr4 มีพอ overexpressed ใน E. coli ของ StmPr1 และ StmPr3 ให้โปรตีนไม่ละลายน้ำ ประมวลผล ตัดของโดนัล C ซึ่งมีการระบุโมเดลเอนไซม์สำเร็จในนิพจน์ของ StmPr1 ละลายน้ำ การใช้งาน แต่ล้มเหลวในกรณี StmPr3จากแอพลิเคชันซัก ทดสอบ StmPr2 กลายเป็นสูงล้างใช้งานรติเอสที่ 45 องศาเซลเซียส กิจกรรมของ StmPr2 ที่ถูกกำหนด ด้วย suc-l-Ala-l-Ala-l-Pro-l-Phe-p-nitroanilide เป็นพื้นผิว 17 ± 2 U/mg นอกจากนี้ เรากำหนดพารามิเตอร์เดิม ๆ และกำหนดลักษณะปริรติเอส StmPr2

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

คอลเลกชันขนาดใหญ่ที่ประกอบไปด้วยสายพันธุ์แบคทีเรียได้รับการคัดกรองโปรตีเอสผงซักฟอกนวนิยาย สายพันธุ์หลายแสดงกิจกรรมโปรติเอสบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีนมพร่องมันเนย แต่ก็ไม่ได้ใช้งานในสื่อของเหลว การหุ้มของเซลล์ในเม็ดอัลจิเนตเหนี่ยวนำให้เกิดการผลิตโปรติเอส Stenotrophomonas maltophilia กลายเป็นนักแสดงที่ดีที่สุดภายใต้เงื่อนไขที่ซักผ้า สำหรับบัตรประจำตัวของโปรตีเอสล้างที่ใช้งานสี่โปรตีเอสซีรีนสารที่เรียกว่า StmPr1, StmPr2, StmPr3 และ StmPr4 ถูกโคลน StmPr2 และ StmPr4 ถูก overexpressed เพียงพอใน E. coli การแสดงออกของ StmPr1 และ StmPr3 ที่ยังไม่ได้ส่งผลให้โปรตีนที่ไม่ละลายน้ำ การตัดส่วนใหญ่ของ C-ขั้วโดเมนที่ได้รับการยืนยันจากการสร้างแบบจำลองการทำงานของเอนไซม์ประสบความสำเร็จในการแสดงออกของละลาย StmPr1 ใช้งาน แต่ล้มเหลวในกรณีของ StmPr3. จากการทดสอบแอพพลิเคซักรีด StmPr2 เปิดออกมาเป็นโปรติเอสล้างสูงที่ใช้งานที่ 45 องศาเซลเซียส . กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงของ StmPr2 กำหนดด้วย SUC-L-Ala-L-Ala-L-Pro-L-เพ-P-nitroanilide เป็นสารตั้งต้นที่ 17 ± 2 U / มิลลิกรัม นอกจากนี้เรากำหนดค่าพารามิเตอร์การเคลื่อนไหวและการตั้งค่าความแตกแยกของโปรติเอส StmPr2

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

คอลเลกชันขนาดใหญ่ประกอบด้วยปฏิปักษ์สายพันธุ์แบคทีเรียจากผงซักฟอกเพื่อนวนิยาย หลายสายพันธุ์ที่แสดงกิจกรรมบนจานที่มีอาหารโปรตีนหางนม แต่ถูกใช้งานในสื่อที่เป็นของเหลว encapsulation เซลล์เม็ดต่อเนตการผลิตโปรติเอส stenotrophomonas maltophilia กลายเป็นผลงานที่ดีที่สุดภายใต้การเงื่อนไขสำหรับการล้างใช้งานทาง , สี่ทางและเซรีนเรียก stmpr1 stmpr2 stmpr3 , และ , stmpr4 ถูกโคลน และ stmpr2 stmpr4 มีเพียงพอกับ E . coli และการแสดงออกของ stmpr1 stmpr3 ส่งผลให้ไม่ผ่าน โปรตีนละลายน้ำ ตัดสั้นที่สุดของซึ่งโดเมนซึ่งได้รับการระบุโดยการประสบความสำเร็จในการแสดงออกของเอนไซม์ soluble ,งาน stmpr1 แต่ล้มเหลวในกรณีของ stmpr3

จากการทดสอบโปรแกรมซักรีด stmpr2 กลับกลายเป็นสูงซัก 45 องศา ที่ใช้โปรกิจกรรมจำเพาะของ stmpr2 มุ่งมั่นกับ suc-l-ala-l-ala-l-pro-l-phe-p-nitroanilide เป็นฐานรอง 17 ± 2 U / mg นอกจากนี้เรามุ่งมั่นที่การตั้งค่าและค่าพารามิเตอร์จลน์ของโปรติเอส stmpr2 .