Indole Test IntroductionBacteria th

Indole Test
Introduction
Bacteria that produce the enzyme tryptophanase can convert the amino acid tryptophan to by-products that include indole. This test is among a suite of tests (Indole, Methyl-Red, Vogues-Proskauer, and Citrate) that are used to differentiate among the Gram-Negative bacilli in the family Enterobacteriaceae.
When indole is combined with Kovac's Reagent (which contains hydrochloric acid and dimethylaminobenzaldehyde in amyl alcohol) the solution turns from yellow to cherry red. Because amyl alcohol is not water soluble, the red coloration will form in an oily layer at the top of the broth.
Results
+ = Positive (Cherry red coloration in oil layer on top of broth) Bacteria that test positive for cleaving indole from tryptophan include: Aeromonas hydrophila, Aeromonas punctata, Bacillus alvei, Edwardsiella sp., Escherichia coli, Flavobacterium sp., Haemophilus influenzae, Klebsiella oxytoca, Proteus sp. (not P. mirabilis and P. penneri), Plesiomonas shigelloides, Pasteurella multocida, Pasteurella pneumotropica, Enterococcus faecalis, and Vibrio sp
- = Negative (No red color in oil layer on top of broth). Bacteria which give negative results for the indole test include: Actinobacillus spp., Aeromonas salmonicida, Alcaligenes sp., most Bacillus sp., Bordetella sp., Enterobacter sp., Lactobacillus spp., most Haemophilus sp., most Klebsiella sp., Neisseria sp., Pasteurella haemolytica, Pasteurella ureae, Proteus mirabilis, P. penneri, Pseudomonas sp., Salmonella sp., Serratia sp., Yersinia sp.



Methods
1. Obtain two TRYPTONE broths from the back shelf.
2. Inoculate one broth using aseptic technique. Leave the other broth uninoculated (this will be a negative control).
3. Incubate at an appropriate temperature (whatever temperature your organism grows well at). Incubate for 24 to 48 hours (do not exceed 48 hours for this test).
4. Obtain your broths from the incubator. Add a dropperfull of Kovac's Reagent to each broth.
5. Allow the broths to sit for 15 minutes (shake gently every few minutes).
6. A red coloration in the top oil layer at any time within 15 minutes indicates a positive result. A negative result can only be concluded if there is no red color formation in the top oil layer after 15 minutes
Point to remember: Indole test can also aid in species differentiation.
Klebsiella species: Klebs‪iella oxytoca is indole positive whereas Klebsiella pneumoniae is indole negative.‬
Citrobacter species: Citrobacter Koseri is indole positive where as Citrobacter freundii is indole negative
Proteus species: Proteus Vulgaris is indole positive whereas Proteus mirabilis is indole negative
RECIPES
The main requirement for a suitable indole test medium is that it contain a sufficient amount of tryptophan. Although many media meet this criterion, tryptone broth is commonly used.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทดสอบอินโดล แนะนำแบคทีเรียที่ผลิต tryptophanase เอนไซม์สามารถแปลงกรดอะมิโนทริปโตเฟนเป็นสินค้าพลอยได้ที่มีอินโดล การทดสอบนี้เป็นชุดของการทดสอบ (อินโดล Methyl Red, Vogues Proskauer และซิเตรต) ที่ใช้เพื่อแยกความแตกต่างระหว่าง bacilli แบคทีเรียแกรมลบในครอบครัว Enterobacteriaceaeเมื่อพร้อมกับรีเอเจนต์ของ Kovac (ซึ่งประกอบด้วยกรดไฮโดรคลอริกและ dimethylaminobenzaldehyde ใน amyl แอลกอฮอล์) อินโดลโซลูชันเปลี่ยนจากสีเหลืองกับเชอร์รี่สีแดง เนื่องจากแอลกอฮอล์ amyl ไม่ละลายน้ำ ย้อมสีแดงจะเป็นชั้นที่มันของซุปผลลัพธ์+ =บวก (เชอร์รี่สีแดงย้อมสีในน้ำมันชั้นบนซุป) แบคทีเรียที่ทดสอบค่าบวกสำหรับ cleaving อินโดลจากทริปโตเฟนรวม: Aeromonas hydrophila, Aeromonas punctata คัด alvei, Edwardsiella sp. Escherichia coli, Flavobacterium sp. Haemophilus influenzae, Klebsiella oxytoca, Proteus sp. (mirabilis ไม่ P. และ P. penneri), Plesiomonas shigelloides, Pasteurella multocida, Pasteurella pneumotropica, Enterococcus faecalis และ sp ต่อ - =ลบ (ไม่มีสีแดงสีในน้ำมันชั้นบนซุป) มีแบคทีเรียที่ให้ผลเชิงลบในการทดสอบอินโดล: Actinobacillus โอ Aeromonas salmonicida, Alcaligenes sp. sp.ส่วนใหญ่คัด Bordetella sp. Enterobacter sp. โอแลคโตบาซิลลัส sp.ส่วนใหญ่ Haemophilus, Klebsiella sp.ที่สุด Neisseria sp. Pasteurella haemolytica, Pasteurella ureae, Proteus mirabilis, P. penneri, Pseudomonas sp. sp.สาย Serratia sp. Yersinia spวิธีการ1. ขอรับสอง TRYPTONE broths จากชั้นหลัง2. ฉีดซุปหนึ่งใช้เทคนิคที่เข้มข้น ปล่อยให้ซุปอื่น ๆ uninoculated (นี้จะควบคุมค่าลบ)3. ฟักที่มีอุณหภูมิที่เหมาะสม (อุณหภูมิสิ่งมีชีวิตของคุณเติบโตดีที่) ฟักใน 24-48 ชั่วโมง (ไม่เกิน 48 ชั่วโมงสำหรับการทดสอบนี้)4. ได้รับการ broths จากการบ่มเพาะวิสาหกิจ เพิ่ม dropperfull ของรีเอเจนต์ของ Kovac ซุปแต่ละ5. อนุญาต broths นั่ง 15 นาที (ปั่นเบา ๆ ทุกไม่กี่นาที)6. การย้อมสีแดงในชั้นบนสุดน้ำมันตลอดเวลาภายใน 15 นาทีแสดงผลบวก ผลลบสามารถสรุปว่า ผู้แต่งสีแดงไม่มีในชั้นบนสุดน้ำมันหลังจาก 15 นาทีจุดจำ: ทดสอบอินโดลยังสามารถช่วยในการสร้างความแตกต่างของสายพันธุ์ได้Klebsiella พันธุ์: Klebs iella oxytoca เป็นอินโดลบวก Klebsiella pneumoniae เป็น อินโดลลบพันธุ์ Citrobacter: Citrobacter Koseri เป็นอินโดลบวกที่เป็น Citrobacter freundii อินโดลลบพันธุ์ Proteus: Proteus Vulgaris เป็นอินโดลบวกในขณะที่ Proteus mirabilis เป็นอินโดลลบสูตรความต้องการหลักสำหรับสื่อทดสอบอินโดลเหมาะได้ว่า มันประกอบด้วยจำนวนทริปโตเฟนเพียงพอ แม้ว่าหลายสื่อตรงกับเกณฑ์นี้ ซุป tryptone ใช้ทั่วไป

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อินโดล ทดสอบเบื้องต้น

แบคทีเรียที่ผลิตเอนไซม์ tryptophanase สามารถแปลงกรดอะมิโนเพื่อผลพลอยได้มีอินโดล . การทดสอบนี้เป็นหนึ่งในชุดของการทดสอบ ( indole , Methyl สีแดง proskauer โวเกส , และซิเตรท ) ที่ใช้เพื่อแยกความแตกต่างระหว่างเชื้อกรัมลบในผิดเพี้ยน
ครอบครัว .เมื่อรวมกับ โควักเป็นโครงสร้างอินโดล ( ซึ่งมีกรดไฮโดรคลอริก และ dimethylaminobenzaldehyde ในเอมิลแอลกอฮอล์ ) สารละลายจะเปลี่ยนจากสีเหลืองเป็นสีแดง . เพราะ เอมิลแอลกอฮอล์จะไม่ละลายในน้ำ , สีแดงจะฟอร์มในชั้นผิวที่ด้านบนของผล

ซุป= บวก ( สีแดงสีในน้ำบนซุป ) แบคทีเรียที่สามารถทดสอบบวกอินโดลจากทริปรวม : hydrophila punctata เชื้อ Bacillus , alvei edwardsiella sp . , Escherichia coli , ฟลาโวแบคทีเรียม sp . , Ha98574 Klebsiella oxytoca , ที่มี , sp . ( ไม่หน้ามิราบิลิส และ พี penneri ) plesiomonas shigelloides pasteurella , ที่ได้รับ ,pasteurella pneumotropica เอ็นเทโรค็อกคัส , ออกซิเจนและ Vibrio sp
- = ลบ ( ไม่มีสีแดงในน้ำด้านบนของน้ำซุป ) แบคทีเรียซึ่งให้ผลลบ สำหรับทดสอบอินโดลรวมถึงหน่วยวัดสแปน spp . salmonicida Alcaligenes sp . เชื้อ Bacillus sp . , มากที่สุด , , bordetella sp . , Enterobacter sp . , Lactobacillus spp . , โฮโมฟิลัสที่สุด . ที่สุด Klebsiella sp . , สามารถ .pasteurella haemolytica pasteurella มก. ที่มี ureae , , , หน้า penneri , Pseudomonas sp . , Salmonella sp . , เซอร์ราเทีย sp . , เยอซิเนีย sp .




วิธี 1 ขอรับสองทริพโทน broths จากหิ้งกลับ .
2 ปลูกฝีหนึ่งซุปโดยใช้เทคนิคปลอดเชื้อ ปล่อยให้น้ำซุปใส่อื่น ๆ ( นี้จะควบคุมเชิงลบ ) .
3บ่มที่อุณหภูมิที่เหมาะสม ( อุณหภูมิที่สิ่งมีชีวิตเติบโตดี ) บ่มเป็นเวลา 24 ถึง 48 ชั่วโมง ( ไม่เกิน 48 ชั่วโมงสำหรับการทดสอบนี้ )
4 รับซุปของคุณจากตู้ฟักไข่ เพิ่ม dropperfull ของ โควักของสารเคมีแต่ละ broth .
5 าให้นั่งเป็นเวลา 15 นาที ( เขย่าเบา ๆทุกไม่กี่นาที )
6สีแดงสีในชั้นน้ำมันสูงสุดที่เวลาใด ๆภายใน 15 นาที พบว่าผลเป็นบวก ผลเป็นลบ สามารถสรุปได้ว่าถ้าไม่มีสีแดงก่อตัวในชั้นน้ำมันด้านบนหลังจาก 15 นาที
จุดจำ : ทดสอบอินโดลสามารถช่วยในชนิดแตกต่าง .
Klebsiella สายพันธุ์ : klebs ‪ iella oxytoca Klebsiella pneumoniae และอินโดลเป็นบวกอินโดล‬
เป็นลบซิโทรแบคเทอร์ชนิด : ซิโทรแบคเทอร์ koseri เป็นบวกอินโดลที่ซิโทรแบคเทอร์ freundii เป็น indole ลบ
ที่มีชนิดที่มี : vulgaris คืออินโดลบวกในขณะที่มก. ที่มีอินโดลลบ

เป็นสูตรความต้องการหลักสำหรับการทดสอบที่เหมาะสมอินโดลปานกลาง มีปริมาณที่เพียงพอของทริป . แม้ว่าหลายสื่อที่ตรงกับเกณฑ์นี้ ทริพโทนน้ำซุปก็ใช้กันทั่วไป