After transfection 72 hours, the co

After transfection 72 hours, the conditioned media were collected and the remaining cells were scraped and washed twice by phosphatebuffered saline, then lysed on ice for 30 minutes in 300 µL RIPA lysis buffer (50 mM Tris pH 7.4, 150 mM NaCl, 1% Triton X-100, 1% sodium deoxycholat, 0.1% SDS), containing protease inhibitor cocktail (Roche Applied Science, Mannheim, Germany).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หลังจาก transfection 72 ชั่วโมง สื่อเครื่องปรับอากาศถูกเก็บรวบรวม และเซลล์ที่เหลือถูกขูด และล้าง ด้วยน้ำเกลือ phosphatebuffered สองครั้ง แล้ว lysed บนน้ำแข็ง 30 นาทีใน 300 µL ริป้าราคา lysis บัฟเฟอร์ (50 มม.ทริสเรทติ้ง pH 7.4, 150 มม. NaCl, 1 ไตรตั้น X 100%, 1% โซเดียม deoxycholat, SDS 0.1%), ประกอบด้วยค็อกเทลผลรติเอส (วิทยาศาสตร์ใช้โร มา เยอรมนี)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หลังจาก transfection 72 ชั่วโมงสื่อปรับอากาศถูกเก็บรวบรวมและเซลล์ที่เหลือถูกคัดลอกและล้างครั้งที่สองโดยน้ำเกลือ phosphatebuffered, lysed แล้วบนน้ำแข็งเป็นเวลา 30 นาทีใน 300 ไมโครลิตร RIPA บัฟเฟอร์ lysis (50 mM Tris พีเอช 7.4, 150 มิลลิโซเดียมคลอไรด์, 1% ไทรทัน X-100, 1% deoxycholat โซเดียม 0.1% SDS), ค๊อกเทลที่มีสารยับยั้งเอนไซม์โปรติเอ (Roche วิทยาศาสตร์ประยุกต์ไฮม์, เยอรมนี)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หลังจาก transfection 72 ชั่วโมง , เป็นสื่อในการเก็บรวบรวมและเซลล์ที่เหลือมีถลอกและซักสองครั้ง โดย phosphatebuffered น้ำเกลือ แล้ว lysed บนน้ำแข็งเป็นเวลา 30 นาทีใน 300 µ L RIPA การสลายบัฟเฟอร์ ( 50 มม. โดย pH 7.4 150 mM NaCl , 1% Triton X-100 1% โซเดียม deoxycholat 0.1 % SDS ) ซึ่งประกอบด้วย โปรตีเ นฮิบิเตอร์ค็อกเทล ( โรชวิทยาศาสตร์ประยุกต์ Mannheim , เยอรมัน )