วารสารเอเชียแปซิฟิกของการป้องกันโรคมะเร็ง, ฉบับที่ 13, 2012 3485
Cochinchina มะระสารสกัดจากเมล็ดเจือจาง G2 / M จับกุมและ Apoptosis ใน MDA-MB-231 เซลล์
0
25.0
50.0
75.0
100.0 การวินิจฉัยใหม่โดยไม่ต้องรักษาการวินิจฉัยใหม่กับการรักษาความคงทนหรือเกิดซ้ำให้อภัยไม่มียาเคมีบำบัดรังสีรักษาchemoradiation พร้อมกัน10.3 0 12.8 25.0 30.0 20.3 6.3 10.1 51.7 75.0 51.1 30.0 31.3 54.2 46.8 56.3 25.0 27.6 33.1 31.3 30.0 23.7 38.0 31.3 รูปที่ 1 Proliferative ยับยั้งผลของ ECMS มนุษยมะเร็งเต้านม MDA-MB-231 เซลล์ เซลล์อยู่รอดถูกประเมินโดยการวิเคราะห์ MTT ที่ความยาวคลื่น 570 นาโนเมตร (A) บ่มเพาะกับ ECMS ที่ความเข้มข้นแตกต่างกันสำหรับ48 ชั่วโมง (ข) การบริหารกับ ECMS เวลา 24 ชั่วโมง, 48 ชั่วโมงและ 72 ชม. อัตราการยับยั้งที่ได้รับการแสดงเป็นอัตราส่วนแสงความหนาแน่นของการรักษาเพื่อควบคุม ค่าแต่ละวิธี± SD ในสามทดลองที่เป็นอิสระ * p <0.05 เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม # p <0.01 เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมรูปที่2 ECMS ชักนำให้เกิด Apoptosis มนุษย์เต้านมมะเร็งMDA-MB-231 เซลล์ สัณฐานทั่วไป apoptotic พบว่าในภาคตะวันออกเฉียงเหนือ-MB-231 รับการรักษาด้วยเซลล์ ECMS (0.1, 0.2 และ 0.4 mg / ml) เป็นเวลา 48 ชั่วโมง (A) เซลล์ย้อมด้วยสี Hoechst 33342 ถูกถ่ายภาพด้วยกล้องจุลทรรศน์เรืองแสง (200). ย่อและนิวเคลียสแยกส่วนที่มีคราบสดใสได้รับการพิจารณาเป็นเซลล์ apoptotic (ข) ในกระบวนการตายของเซลล์ที่ได้มาวิเคราะห์โดยการไหลภูมิคุ้มกันกับAnnexin V-FITC และการย้อมสี PI ในช่วงต้นของเซลล์ที่เกิด apoptosis (Annexin-V +) แสดงในมุมขวาด้านล่างด้านและเซลล์apoptotic ปลาย (+ Annexin V และ PI +) ได้รับการแสดงในด้านขวาบน เซลล์ที่ตายแล้วมีการแสดงในด้านซ้ายบน (PI +) เปอร์เซ็นต์ของเซลล์ apoptotic ถูกระบุโดย Annexin-V + เซลล์แสดงให้เห็นว่าหมายถึง± SD จากสามทดลองที่เป็นอิสระ * p <0.05 เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม # p <0.01 เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมรูปที่3 ผลของความก้าวหน้าใน ECMS เซลล์วงจรของมนุษย์มะเร็งเต้านมMDA-MB-231 เซลล์ หลังจากได้รับการรักษาด้วย ECMS ในขนาด 0.1, 0.2 และ 0.4 มก. / มล. เป็นเวลา 48 ชั่วโมง, MDA- MB-231 เซลล์การวิเคราะห์การกระจายโดยรอบโฟ แต่ละค่าแสดงให้เห็นถึงวิธีการ± SD ในสามทดลองที่เป็นอิสระ (n = 3) * p <0.05 เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม # p <0.01 เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมหมายถึง± SD) ความแตกต่างถูกนำมาวิเคราะห์โดยหนึ่งในวิธีการวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) และของ Tukey Studentized ช่วงทดสอบ ความแตกต่างที่ได้รับการพิจารณาอย่างมีนัยสำคัญที่ p <0.05. ผลการศึกษาผลของ ECMS ใน MDA-MB-231 เซลล์งอก MDA-MB-231 อัตราการรอดตายของเซลล์ได้รับการวิเคราะห์จากวิธีMTT ที่ 570 นาโนเมตร หลังจากบ่มเพาะกับ ECMS (0.05, 0.1, 0.2, 0.4 และ 0.6 mg / ml) เป็นเวลา 48 ชั่วโมงอัตราการยับยั้งของเซลล์เพิ่มขึ้นจาก4.5 ± 1.5% ถึง 54.3 ± 5.1% (รูปที่ 1A) เมื่อได้รับการรักษาด้วย ECMS (0.1, 0.2, 0.4 mg / ml) เป็นเวลา 24 ชั่วโมง, 48 ชั่วโมงและ 72 ชั่วโมงอัตราการยับยั้งที่ถูกยกระดับจาก2.4 ± 9.4% ถึง 55.3 ± 5.4%, 5.6 ± 11.9% เป็น67.6 ± 0.9% และ 13.8 ± 2.4% ถึง 70.2 ± 0.6% ตามลำดับ(รูปที่ 1B) ยับยั้งความเข้มข้น 50% (IC50) 65 g / ml ที่ 72 ชั่วโมง ผลการศึกษาพบว่า ECMS อย่างมากลดลงการขยายตัวของภาคตะวันออกเฉียงเหนือ-MB-231 เซลล์ในลักษณะ dose- และเวลาขึ้นอยู่กับ (p <0.01). ECMS เหนี่ยวนำให้เกิดการตายของ MDA-MB-231 เซลล์เปลี่ยนแปลงรูปร่างในนิวเคลียสที่เป็นตัวแทนของการตายเป็นโทรศัพท์มือถือการประเมินโดยการย้อมสีกับดีเอ็นเอเยื่อดูดซึมผูกพันย้อม Hoechst 33258 MDA-MB-231 เซลล์ได้รับการรักษาที่แตกต่างกันกับความเข้มข้นของECMS (0, 0.1, 0.2, 0.4 mg / ml) สำหรับ48 ชั่วโมงและได้รับการวิเคราะห์โดยการย้อมสี Hoechst 33258 ในฐานะที่เป็นแสดงให้เห็นในรูปที่ 2A, เซลล์ปกติแสดงปกติและนิวเคลียสที่มีรูปทรงกลมที่มีสีฟ้าซีดในขณะที่apoptotic เซลล์มีลักษณะโดยการรวมตัวและการกระจายตัวของนิวเคลียสที่มีการเรืองแสงที่สว่างสดใส ไหลวิเคราะห์ภูมิคุ้มกันได้ถูกใช้ในปริมาณ apoptotic MDA-MB-231 เซลล์หลังการรักษาด้วย ECMS (0, 0.1, 0.2, 0.4 mg / ml) เป็นเวลา 48 ชั่วโมง สัดส่วนของเซลล์ apoptotic เพิ่มขึ้นจาก 2.5 ± 3.1% ถึง 33.0 ± 0.8% (รูปที่2B) ผลการศึกษาพบว่า ECMS เหนี่ยวนำให้เกิดการตายของเซลล์ในMDA-MB-231 เซลล์ในลักษณะปริมาณขึ้นอยู่กับ(p <0.01). ผลของการ ECMS ใน MDA-MB-231 วงจรมือถือหลังจากที่การบริหารงานที่มีECMS (0.1, 0.2 และ 0.4 มก. / มล.) สำหรับ 48 ชั่วโมง, MDA-MB-231 วงจรมือถือได้รับการตรวจพบโดยcytometry ไหล เมื่อเทียบกับการควบคุม G2 / M ขั้นตอนของMDA-MB-231 เซลล์ได้รับการยกระดับจาก 11.7 ± 2.1% ถึง31.9 ± 4.4% ในขณะที่ผู้ที่มี G0 / G1 S และขั้นตอนที่ถูกลดลง(รูปที่ 3) ผลการวิจัยพบว่า ECMS บล็อกวงจรมือถือที่ G2 / M ขั้นตอนใน MDA-MB-231 เซลล์ในลักษณะปริมาณขึ้นอยู่กับ. ผลของ ECMS ในการแสดงออกของ Bcl-2 โปรตีนครอบครัวเพื่อเพิ่มเติมอย่างละเอียดในกลไกที่เป็นไปได้ภายใต้ECMS ที่เกิดขึ้น การตายของเซลล์เราได้ทดสอบผลกระทบของECMS ในการแสดงออกของโปรตีน Bcl-2, แบ็กซ์และcaspase-3 การวิเคราะห์ซับเวสเทิร์เปิดเผยว่าการแสดงออกของ Bcl-2 อย่างเห็นได้ชัดลดลงในขณะที่การแสดงออกของแบ็กซ์เพิ่มขึ้นเล็กน้อย(รูปที่ 4A) ระดับโปรตีน caspase-3 สะดุดตาเพิ่มขึ้นเมื่อเทียบกับการควบคุมGAPDH (รูปที่ 4B) เหล่านี้ผลการศึกษาพบว่า ECMS ขึ้นการควบคุมของแบ็กซ์ / Bcl-2 อัตราส่วนและการแสดงออกcaspase-3 ในลักษณะปริมาณขึ้นอยู่กับการได้. ECMS ลดลง B1 Cyclin และการแสดงออก Cdk1 เพื่อศึกษาเซลล์กลไกวงจรการจับกุมที่เกิดจาก ECMS เราทดสอบ ผลกระทบของการ ECMS
การแปล กรุณารอสักครู่..