Three mg of the total RNAwas revers

Three mg of the total RNAwas reverse transcribed to first-strand cDNA using an iScript cDNA synthesis kit (Bio-Rad, Hercules, CA) in a final reaction volume of 20 ml including 1 ml RNase Hþ Moloney murine leukemia virus-derived reverse transcriptase pre-blended
with RNase inhibitor, and 4 ml of 5 reaction mix containing an optimized blend of oligo (dT) and random primers. The reaction was conducted as follows: one cycle at 25 C for 5 min, followed by 42 C for 30 min, and 85 C for 5 min. The first-strand cDNAs were
diluted 10-fold with nuclease-free water and stored at 80 C for further use. locules. All the samples were quick-frozen in liquid nitrogen and
stored at 80 C for RNA isolation. Three bolls each from two
different plants (biological replicates) were used for each
treatment.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สามมิลลิกรัม RNAwas รวมย้อนกลับไปถ่ายยีนแรกสาระโดยใช้ชุดการสังเคราะห์ยีน iScript (Bio-Rad ดาว, CA) ในปริมาณปฏิกิริยาสุดท้ายของ 20 มล. รวม 1 มิลลิลิตร RNase HTH โมโลนีย์โรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวหมาไวรัสมาก่อน transcriptase ย้อนกลับ -blended
กับยับยั้ง RNase และ 4 มล. 5? ปฏิกิริยาผสมที่มีการผสมผสานที่ดีที่สุดของ Oligo (dT) และไพรเมอร์แบบสุ่ม ปฏิกิริยาได้ดำเนินการดังต่อไปนี้หนึ่งรอบที่ 25 C เป็นเวลา 5 นาทีตามด้วย 42 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาทีและ 85 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที? cDNAs แรกสาระถูก
เจือจาง 10 เท่าด้วยน้ำนิฟรีและเก็บไว้ที่? 80? C สำหรับการใช้งานต่อไป locules ตัวอย่างทั้งหมดถูกรวดเร็วแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวและ
เก็บไว้ที่? 80? C ในการแยกอาร์เอ็นเอ สาม Bolls แต่ละจากสอง
พืชที่แตกต่างกัน (ซ้ำทางชีวภาพ) ถูกนำมาใช้สำหรับแต่ละ
การรักษา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 มิลลิกรัมของ rnawas ทั้งหมดกลับถ่ายทอดสาระวิธีแรกใช้ iscript การสังเคราะห์ cDNA Kit ( ไบโอ ราด , Hercules , CA ) ในปริมาตรปฏิกิริยาสุดท้ายของ 20 ml รวมทั้ง 1 ml เลสเมอโลนีย์ ~ H þลูคีเมียไวรัสได้มา reverse transcriptase ยับยั้งก่อนผสม
กับเลส และ 4 ml 5  ที่มีปฏิกิริยาผสม การผสมของโอลิโก ( DT ) และไพรเมอร์แบบสุ่มปฏิกิริยาที่ถูกดำเนินการดังนี้ หนึ่งรอบ 25  องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที ตามด้วย 42  C นาน 30 นาที และ  85 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที กลุ่มสาระการเรียนรู้ cdnas แรก
เจือจาง 10 เท่ากับนิวเคลียสน้ำฟรีและเก็บไว้ที่  80  C สำหรับการใช้งานต่อไป ช่อง . ตัวอย่างทั้งหมดแข็งตัวเร็วในไนโตรเจนเหลวและ
เก็บไว้ที่  80  C เพื่อแยก RNA สาม โบลล์แต่ละจากสอง
พืชที่แตกต่างกัน ( แบบแท้ๆ ) ถูกใช้ในการรักษาแต่ละคน