Different concentrations of IPTG (1

Different concentrations of IPTG (100 mM, 400 mM, and 1000 mM) were tested for protein induction, and protein expressions were compared using SDS-PAGE (Fig. S1). IPTG induced the
expression of both AKR and SDR at all concentrations tested,yielded target proteins with ~95% purity for AKR (Lane E2; Fig. 2a) and 98% for SDR (Lane E2; Fig. 2b). Subsequent elution fractions gave higher purities, albeit with lower protein concentrations (Lanes E3eE5; Fig. 2). Enzyme activities were measured before and after dialysis against the storage buffer (phosphate buffer), and no remarkable difference was observed, indicating that neither enzyme are affected by 0.5 M of NaCl and imidazole, contained in the elution buffer. The purification parameters of AKR and SDR are listed in Table 2. The purification method generated approximately
11-fold purification for AKR with a 38% yield, and 9-fold purification for SDR with a 31% yield.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทดสอบความเข้มข้นแตกต่างกันของ IPTG (100 มม. 400 มม. และ 1000 มิลลิเมตร) สำหรับเหนี่ยวนำโปรตีน และโปรตีนนิพจน์ถูกเปรียบเทียบโดยใช้ SDS-หน้า (ฟิก S1) IPTG ที่เกิดจากการนิพจน์ของ AKR และ SDR ที่ความเข้มข้นทั้งหมดทดสอบ ผลโปรตีนเป้าหมาย มีความบริสุทธิ์ ~ 95% สำหรับ AKR (เลน E2 Fig. 2a) และ 98% สำหรับ SDR (เลน E2 Fig. 2b) Elution ต่อมาเศษให้ purities สูงกว่า แม้ว่าอยู่กับความเข้มข้นโปรตีนต่ำ (ถนนหนทาง E3eE5 Fig. 2) กิจกรรมของเอนไซม์ถูกวัดก่อน และ หลังหน่วยกับเก็บบัฟเฟอร์ (ฟอสเฟตบัฟเฟอร์), และความแตกต่างโดดเด่นไม่ได้ สังเกต แสดงให้เห็นว่า เอนไซม์ไม่มีผลกระทบ โดย 0.5 M NaCl และอิมิดาโซล อยู่ในบัฟเฟอร์ elution พารามิเตอร์ purification AKR และ SDR แสดงไว้ในตารางที่ 2 Purification วิธีสร้างประมาณpurification 11-fold สำหรับ AKR มีอัตราผลตอบแทน 38% และ purification 9-fold ใน SDR มีผลตอบแทนเป็น 31%

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความเข้มข้นแตกต่างกันของ IPTG (100 มิลลิ 400 มิลลิและ 1,000 มิลลิเมตร) ได้มีการทดสอบสำหรับการเหนี่ยวนำโปรตีนและการแสดงออกของโปรตีนที่ถูกเมื่อเทียบกับการใช้ระบบ SDS-PAGE (รูป. S1) IPTG เหนี่ยวนำให้เกิด
การแสดงออกของทั้ง AKR และ SDR ที่ความเข้มข้นทดสอบทั้งหมดยอมแพ้โปรตีนเป้าหมายที่มีความบริสุทธิ์ 95% ~ สำหรับ AKR (เลน E2. รูปที่ 2a) และ 98% สำหรับ SDR (เลน E2. รูปที่ 2b) เศษส่วนชะภายหลังให้ purities สูงแม้จะมีความเข้มข้นของโปรตีนต่ำ (Lanes E3eE5. รูปที่ 2) กิจกรรมของเอนไซม์วัดก่อนและหลังการล้างไตกับการจัดเก็บบัฟเฟอร์ (ฟอสเฟตบัฟเฟอร์) และไม่มีความแตกต่างที่โดดเด่นเป็นที่สังเกตแสดงให้เห็นว่าเอนไซม์ที่ไม่ได้รับผลกระทบ 0.5 M ของโซเดียมคลอไรด์และ imidazole ที่มีอยู่ในบัฟเฟอร์ elution พารามิเตอร์ไอออนบวกไฟ Puri ของ AKR และ SDR มีการระบุไว้ในตารางที่ 2 วิธีไอออนบวกไฟ Puri สร้างขึ้นประมาณ
11 เท่าไอออนบวกไฟ Puri สำหรับ AKR ที่มีอัตราผลตอบแทนที่ 38% และ 9 เท่าไอออนบวกไฟ Puri สำหรับ SDR ที่มีอัตราผลตอบแทน 31%

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ระดับความเข้มข้นของโปรตีน ( 100 มม. , 400 มิลลิเมตร และ 1 , 000 มิลลิเมตร ) ทดสอบการเหนี่ยวนำโปรตีน และโปรตีนด้วย SDS-PAGE เปรียบเทียบนิพจน์ ( รูปที่ S1 ) โปรตีนกระตุ้น
การแสดงออกของทั้งคู่ และ SDR ที่ akr เข้มข้นทดสอบ พบว่าโปรตีนเป้าหมายด้วย ~ ความบริสุทธิ์ 95% สำหรับ akr ( เลน E2 ; รูปที่ 2A ) และ 98% สำหรับ SDR ( เลน E2 ; รูปที่ 2B ) ต่อมาใช้เศษส่วนให้ความบริสุทธิ์สูงแม้จะมีความเข้มข้นโปรตีนต่ำ ( เลน e3ee5 ; รูปที่ 2 ) กิจกรรมของเอนไซม์ถูกวัดก่อนและหลังฟอกไตกับกระเป๋าบัฟเฟอร์ ( ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ) และไม่พบความแตกต่างที่โดดเด่น แสดงให้เห็นว่าไม่มีเอนไซม์ที่ได้รับผลกระทบโดย 0.5 M โซเดียมคลอไรด์และอิมิดาโซลที่มีอยู่ในสารประกอบบัฟเฟอร์ ที่ Puri จึงบวกและพารามิเตอร์ของ akr SDR อยู่ในรางที่ 2การถ่ายทอดวิธีการสร้างการปุริประมาณ
11 พับพูจึงบวกสำหรับ akr ด้วย 38 เปอร์เซ็นต์ และการถ่ายทอด ปุริ 9-fold สำหรับ SDR กับ 31 เปอร์เซ็นต์ .