2.6. Analysis of ABG and I3C2.6.1.

2.6. Analysis of ABG and I3C

2.6.1. Extraction

For the extraction of ABG and I3C a slightly modified procedure from Ciska et al. was used (Ciska & Pathak, 2004). Approximately 20 g of cabbage and 2 g of NaCl were homogenised in an Ultra-Turrax homogeniser (IKA-T-25 basic). The homogenised sample was extracted with acetone (3 × 20 mL). The excess acetone was removed in vacuo to 10 mL of final volume. The concentrate was extracted with ethyl acetate (3 × 20 mL, instead of two times from the Ciska et al. procedure). The combined organic layers were dried over anhydrous Na2SO4 and the solvent was removed. The residue was dissolved in acetonitrile, filtered (PTFE filter, Chromafil 1.0/0.2 μM) and made up to a final volume of exactly 5 mL. The extracts were stored at −80 °C until analysis.

2.6.2. HPLC-MS analysis

Quantification was carried out with Agilent 1100 Series HPLC/DAD System with Nucleodur 100–5-C18 ec column (250 mm × 4 mm with a guard column) from Macherey–Nagel. An injection volume of 5 μL and flow rate of 0.4 mL/min was used and the column temperature was maintained at 20 °C. The mobile phase consisted of 0.05% TFA in water as eluent A and 100% acetonitrile as eluent B. The gradient elution started with 20% of eluent B for the first 20 min, increasing to 30% eluent B till 25 min and further increasing to 99% eluent B until 27 min and then decreased to 20% eluent B at 32 min. Compounds were detected and quantified by UV absorption at 280 nm. Quantification was achieved by individual calibration curves (external) from the standard compounds mixture containing ABG and I3C (limit of detection 0.002 mg/mL).

2.6.3. HPLC–ESI-MSn analysis

MS conditions were as follows. Nebuliser pressure was 40 psi and the nitrogen flow rate was 8 L/min at a drying temperature of 350 °C. Mass scans were performed from m/z 50 to 2000 in positive ionisation mode. The detection conditions were as follows: capillary voltage, 5000 V; skimmer voltage, −40.0 V; capillary exit, −113.9 V; Oct1DC, −12.00 V; Oct2DC, 1.70 V; trap drive level, 48.3; OctRF, 150.0 Vpp; lens 1, −5.0 V; lens 2, −60.0 V.

2.6.4. Synthesis of ABG

The synthesis was carried out according to Zielinska, Frias, Penas, Valeverde, & Zielinski (2012). Briefly, 880 mg of ascorbic acid (5.0 mmol) were dissolved in 40 mL of Mcllvaine buffer (pH 4). To this 740 mg of I3C (5.0 mmol) were added. The reaction mixture was stirred at room temperature under nitrogen for 1 h in the dark, filtered, washed three times with 20 mL of ethyl ether and extracted four times with 25 mL of ethyl acetate. The combined ethyl acetate layers were dried over anhydrous Na2SO4. Evaporation of the solvent yielded 793 mg of the final product ABG. 1H NMR (200 MHz, MeOD) δ: 7.61 (d, 1 H), 7.31 (d, 1 H), 7.20 (s, 1 H), 7.06 (t, 1 H), 6.96 (t, 1 H), 4.19–4.00 (m, 3 H), 3.79 (s, 1 H), 3.44–3.18 (m, 2H) ppm.

2.7. Analysis of I3A

2.7.1. Extraction

Cabbage (50 g) was placed into 200 mL of boiling water and stirred for 5 min. The mixture was cooled to room temperature and homogenised with Ultra-Turrax. To this mixture 50 mL of dichloromethane were added and stirred for 5 min at room temperature. The sauerkraut was filtered off from the solution and the organic layer was separated. The aqueous layer was extracted four times with 25 mL dichloromethane. The combined organic layers were dried over anhydrous Na2SO4. The excess solvent was removed under vacuum and re-dissolved with dichloromethane to make up to a total volume of 5 mL and stored at −80 °C until further analysis.

2.7.2. Analysis

The volatile content of cabbage was determined by GC–MS using Agilent 6890 gas chromatograph equipped with a DB-5-MS column (60 m × 0.32 mm × 0.25 μm) and an Agilent 5975 inert mass selective detector. Injection volume was 1 μL and column flow rate was 2 mL/min. The injector was operated in split mode (1:1) with a temperature of 200 °C. The detector temperature was set at 230 °C, the oven temperature program was set as follows: 50 °C, held for 2 min and increased at 6 °C/min to 200 °C, held 1 min then increased to 260 °C at 15 °C/min with a final hold for 1 min. The mass spectrometer was operated in electron ionisation mode (70 eV), and data were acquired in full-scan mode over the range m/z 27–400. I3A was identified by reference to the NIST library (NIST/EPA/NIH Mass Spectral Library Version 2.0d, National Institute of Standards and Technology, Gaithersburg, MD) and confirmed by comparing the retention time and mass spectrum of the analytical standard, I3A.

2.8. Statistical analysis

Statistical analysis was carried out by SPSS 15.0 (one way ANOVA; Bonferroni p < 0.05).

3. Results and discussions
3.1. pH

Fermentation was followed by measuring pH directly in the fermentation pots containing shredded cabbage. The initial pH of the shredded cabbage was 6.0 and it slightly decreased to 5.9 after mixing with salt (Day 0); after 48 h (Day 2) the pH started to decrease to 5.4, followed by a dramatic decrease to 4.2 by Day 5. From Day 7 until Day 56 the pH remained around 4.0 (Fig. 1a). Rapid acidification during fermentation is to be expected due to increasing production of lactic and other organic acids in the first fermentation phase. This is followed by the second phase of fermentation where a final pH-value below 4 is reached. A rapid decrease in pH at the beginning of fermentation is of great importance for sauerkraut quality as it minimises the influence of spoilage bacteria (Viander et al., 2003 and Xiong et al., 2014).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6 การวิเคราะห์ของ ABG และ I3C2.6.1 การสกัดการสกัดของ ABG และ I3C กระบวนการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยจาก Ciska et al. ถูกใช้ (Ciska & Pathak, 2004) ประมาณ 20 กรัมของกะหล่ำปลีและ 2 กรัมของ NaCl มี homogenised ในตัวอัลตร้า Turrax homogeniser (basic IKA-T-25) ตัวอย่าง homogenised ที่สกัด ด้วยอะซิโตน (3 × 20 มล.) อะซีโตนส่วนเกินถูกเอาออกใน vacuo ไป 10 mL ของเล่มสุดท้าย เข้มข้นที่สกัด ด้วยเอทิล acetate (3 × 20 mL แทนสองครั้งจากกระบวนการ Ciska et al.) ชั้นอินทรีย์รวมได้แห้งมากกว่า Na2SO4 ได และตัวทำละลายถูกเอาออก สารตกค้างถูกละลายใน acetonitrile กรอง (กรองไฟเบอร์ Chromafil 1.0/0.2 μM) และทำจนถึงเล่มสุดท้ายของตรง 5 mL บางส่วนถูกเก็บไว้ที่ −80 ° C จนถึงการวิเคราะห์2.6.2 การ HPLC-MS วิเคราะห์นับได้ดำเนิน ด้วยระบบ HPLC/พ่อ ชุด Agilent 1100 Nucleodur ec 100 – 5-C18 คอลัมน์ (250 มม. × 4 มม.กับคอลัมน์ยาม) จาก Macherey – Nagel ใช้ปริมาณการฉีดของ 5 μL และกระแสอัตรา 0.4 mL/min และอุณหภูมิคอลัมน์ถูกรักษาไว้ที่ 20 องศาเซลเซียส เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย 0.05% TFA น้ำเป็น eluent A และ acetonitrile 100% เป็น eluent B. Elution ไล่ระดับเริ่มต้น 20% ของ eluent B 20 นาทีแรก เพิ่มการ eluent 30% B จนถึงนาทีที่ 25 และเพิ่มเติมการ eluent 99% B จนถึงนาทีที่ 27 แล้ว ลดไป 20% eluent B ที่ 32 นาทีสารถูกตรวจพบ และ quantified โดยการดูดซึมรังสียูวีที่ 280 nm นับสำเร็จ โดยโค้งเทียบแต่ละที่ (ภายนอก) จากส่วนผสมของสารมาตรฐาน ABG และ I3C (ข้อจำกัดของการตรวจหารายการ 0.002 mg/mL)2.6.3 การ HPLC – ESI-MSn วิเคราะห์MS เงื่อนไขได้ดังนี้ Nebuliser ดัน 40 psi และอัตราการไหลของไนโตรเจนคือ 8 L/min อบแห้งอุณหภูมิ 350 องศาเซลเซียส สแกนโดยรวมถูกทำจาก m/z 50-2000 ในโหมด ionisation บวก ตรวจสอบเงื่อนไขได้ดังนี้: แรงเส้นเลือดฝอย 5000 V แรงดันแหล่ง −40.0 V ออกจากเส้นเลือดฝอย −113.9 V Oct1DC, −12.00 V Oct2DC, 1.70 V ตรวจจับไดรฟ์ระดับ 48.3 OctRF, 150.0 Vpp เลนส์ 1, −5.0 V เลนส์ 2, −60.0 V2.6.4 การสังเคราะห์ของ ABGสังเคราะห์ได้ดำเนินตาม Zielinska, Frias, Penas, Valeverde และ Zielinski (2012) สั้น ๆ 880 มิลลิกรัมของกรดแอสคอร์บิค (5.0 mmol) ได้ละลายใน 40 mL Mcllvaine บัฟเฟอร์ (pH 4) การมก. I3C นี้ 740 (5.0 mmol) เพิ่มขึ้น ผสมปฏิกิริยาถูกกวนที่อุณหภูมิห้องภายใต้ไนโตรเจนสำหรับ h 1 ในมืด กรอง ล้างสามครั้ง ด้วย 20 mL ของเอทิลอีเทอร์ แล้วแยกสี่เท่ากับ 25 mL ของเอทิล acetate ชั้นรวมเอทิล acetate ได้แห้งมากกว่าได Na2SO4 ระเหยของตัวทำละลายที่หา 793 มิลลิกรัมของ ABG ผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้าย 1H NMR (200 MHz, MeOD) δ: 7.61 (d, 1 H), 7.31 (d, 1 H), 7.20 (s, 1 H), 7.06 (t, 1 H), 6.96 (t, 1 H), 4.19-4.00 (m, 3 H) 3.79 (s, 1 H), ppm 3.44 – 3.18 (m, 2H)2.7 การวิเคราะห์ I3A2.7.1 การสกัดกะหล่ำปลี (50 g) อยู่ใน 200 mL ของน้ำเดือด และกวนใน 5 นาที ส่วนผสมระบายความร้อนด้วยอุณหภูมิห้อง และ homogenised กับอัลตร้า Turrax การผสมนี้ 50 mL ของ dichloromethane มีเพิ่ม และกวนใน 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง Sauerkraut จะถูกกรองออกจากโซลูชัน และมีแบ่งชั้นอินทรีย์ ชั้นอควีถูกสกัดสี่ครั้ง ด้วย dichloromethane 25 mL ชั้นอินทรีย์รวมได้แห้งมากกว่าได Na2SO4 ตัวทำละลายส่วนเกินที่ออกภายใต้สุญญากาศ และส่วนยุบอีกครั้งกับ dichloromethane การให้ค่าปริมาตรรวมของ 5 mL และเก็บไว้ที่ −80 ° C จนกว่าจะวิเคราะห์ต่อไป2.7.2 การวิเคราะห์กำหนดเนื้อหาการระเหยของกะหล่ำปลี โดย GC – MS ใช้ chromatograph แก๊ส Agilent 6890 คอลัมน์ DB 5 MS (60 m × 0.32 มม.× 0.25 μm) และการตรวจโดยรวมใช้ inert Agilent 5975 ปริมาณฉีดได้ 1 μL และอัตราการไหลของคอลัมน์ 2 mL/min หัวฉีดที่ถูกดำเนินการในการแยกโหมด (1:1) โดยอุณหภูมิ 200 องศาเซลเซียส มีตั้งเครื่องตรวจจับอุณหภูมิที่ 230 ° C โปรแกรมอุณหภูมิเตาอบถูกตั้งค่าเป็นดังนี้: 50 ° C จัดใน 2 นาที และเพิ่มขึ้น 6 องศาเซลเซียส/นาทีถึง 200 ° C จัด 1 นาที แล้วเพิ่มขึ้นถึง 260 ° C ที่ 15 ° C/นาที กับค้างสุดท้ายใน 1 นาที สเปกโตรมิเตอร์จำนวนมากถูกดำเนินการในโหมด ionisation อิเล็กตรอน (70 eV), และข้อมูลที่ได้รับมาในโหมดการสแกนแบบเต็มผ่านช่วง m/z 27 – 400 I3A ระบุอ้างอิงถึงไลบรารี NIST (NIST EPA/NIH มวลสเปกตรัมไลบรารีรุ่น 2.0 d สถาบันมาตรฐานแห่งชาติและเทคโนโลยี Gaithersburg, MD) และได้รับการยืนยัน โดยการเปรียบเทียบการรักษาเวลาและมวลสเปกตรัมมาตรฐานวิเคราะห์ I3A2.8. สถิติวิเคราะห์วิเคราะห์ทางสถิติได้ดำเนินการ โดยโปรแกรม 15.0 (การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว Bonferroni < p 0.05)3. ผลลัพธ์ และสนทนา3.1. pHหมักได้ตาม ด้วยการวัดค่า pH ได้โดยตรงในหม้อหมักประกอบด้วยกะหล่ำปลีหั่น กะหล่ำปลีหั่น pH เริ่มต้น 6.0 และมันเล็กน้อยลดลงไป 5.9 หลังผสมกับเกลือ (วัน 0); หลังจาก h 48 (วันที่ 2) pH เริ่มต้นลดลงถึง 5.4 ตาม ด้วยการลดลงอย่างมากการ 4.2 โดย 5 วัน 7 วันจนถึง 56 วัน pH อยู่ ประมาณ 4.0 (Fig. 1a) ยูอย่างรวดเร็วในระหว่างการหมักการผลิตเพิ่มขึ้นของแล็กติกและกรดอินทรีย์อื่น ๆ ในขั้นตอนการหมักครั้งแรกได้ นี้จะตาม ด้วยระยะที่สองของหมักดองซึ่งเป็นขั้นสุดท้ายค่า pH ต่ำกว่า 4 แห่ง ลดลงอย่างรวดเร็วใน pH ที่จุดเริ่มต้นของการหมักเป็นเรื่องสลักสำคัญสำหรับคุณภาพ sauerkraut เป็นมัน minimises อิทธิพลของเน่าเสียแบคทีเรีย (Viander et al., 2003 และหยง et al., 2014)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 การวิเคราะห์และ ABG I3C 2.6.1 สกัดสำหรับการสกัด ABG I3C และขั้นตอนการแก้ไขเล็กน้อยจาก Ciska et al, ถูกนำมาใช้ (Ciska และ Pathak, 2004) ประมาณ 20 กรัมของกะหล่ำปลีและ 2 กรัมโซเดียมคลอไรด์ถูก homogenised ในอัลตร้า Turrax homogeniser (IKA-T-25 พื้นฐาน) ตัวอย่าง homogenised ถูกสกัดด้วยอะซิโตน (3 × 20 มล) อะซีโตนส่วนที่เกินจะถูกลบออกในสุญญากาศ 10 มิลลิลิตรเล่มสุดท้าย สมาธิที่ถูกสกัดด้วยเอทิลอะซิเตท (3 × 20 มลแทนของทั้งสองครั้งจาก Ciska et al, ขั้นตอน.) ชั้นรวมอินทรีย์แห้งไม่มีน้ำมากกว่า Na2SO4 และตัวทำละลายจะถูกลบออก ที่เหลือก็เลือนหายไปใน acetonitrile กรอง (กรอง PTFE, Chromafil 1.0 / 0.2 ไมครอน) และทำขึ้นเป็นเล่มสุดท้ายของว่า 5 มิลลิลิตร สารสกัดถูกเก็บไว้ที่ -80 องศาเซลเซียสจนถึงการวิเคราะห์. 2.6.2 HPLC-MS การวิเคราะห์ปริมาณได้ดำเนินการกับAgilent 1100 ซีรีส์ HPLC / DAD ระบบด้วย Nucleodur 100-5-C18 ec คอลัมน์ (250 มมมม× 4 กับคอลัมน์ยาม) จาก Macherey-แจคกี้ ปริมาณการฉีด 5 ไมโครลิตรและอัตราการไหล 0.4 มิลลิลิตร / นาทีถูกนำมาใช้และอุณหภูมิคอลัมน์ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 20 ° C เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย 0.05% TFA ในน้ำเป็นตัวชะ A และ acetonitrile 100% เป็นตัวชะบีชะลาดเริ่มต้นด้วย 20% ของตัวชะ B สำหรับครั้งแรก 20 นาทีเพิ่มขึ้นถึง 30% B ชะจนถึง 25 นาทีและต่อไปเพิ่มขึ้น 99% ชะ B จนกว่า 27 นาทีแล้วลดลงถึง 20% B ชะที่ 32 นาที สารประกอบที่ถูกตรวจพบและปริมาณรังสียูวีโดยการดูดซึมที่ 280 นาโนเมตร ปริมาณก็ประสบความสำเร็จโดยการสอบเทียบแต่ละเส้นโค้ง (ภายนอก) จากส่วนผสมของสารที่มีมาตรฐานและ ABG I3C (ขีด จำกัด ของการตรวจสอบ 0.002 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร). 2.6.3 HPLC-ESI-MSN วิเคราะห์สภาพMS มีดังนี้ Nebuliser ดัน 40 ปอนด์ต่อตารางนิ้วเป็นและอัตราการไหลของไนโตรเจน 8 ลิตร / นาทีที่อุณหภูมิอบแห้ง 350 ° C สแกนมวลได้ดำเนินการจากม. / z 50-2000 ในโหมด Ionisation บวก เงื่อนไขการตรวจสอบมีดังนี้แรงดันของเส้นเลือดฝอย, 5000 V; แรงดันไฟฟ้าพาย, -40.0 v; ออกจากหลอดเลือดฝอย -113.9 v; Oct1DC, -12.00 v; Oct2DC, 1.70 V; กับดักไดรฟ์ระดับ 48.3; OctRF, 150.0 Vpp; เลนส์ 1, -5.0 V; เลนส์ 2 -60.0 V. 2.6.4 การสังเคราะห์ ABG การสังเคราะห์ได้ดำเนินการตาม Zielinska, Frias, Penas, Valeverde และ Zielinski (2012) สั้น ๆ , 880 มิลลิกรัมวิตามินซี (5.0 มิลลิโมล) ถูกกลืนหายไปใน 40 มิลลิลิตรของบัฟเฟอร์ Mcllvaine (pH 4) นี้ 740 มิลลิกรัม I3C (5.0 มิลลิโมล) ถูกเพิ่ม ผสมปฏิกิริยาถูกกวนที่อุณหภูมิห้องภายใต้ไนโตรเจนเป็นเวลา 1 ชั่วโมงในที่มืดกรองล้างสามครั้งมี 20 มิลลิลิตรเอทิลอีเทอร์และสกัดสี่ครั้งมี 25 มิลลิลิตรเอทิลอะซีเต ชั้นเอทิลอะซิเตทรวมแห้งไม่มีน้ำมากกว่า Na2SO4 การระเหยของตัวทำละลายให้ผล 793 mg ของผลิตภัณฑ์สุดท้าย ABG 1H NMR (200 MHz, MeOD) δ: 7.61 (ง 1 H), 7.31 (ง 1 H), 7.20 (s 1 H), 7.06 (t 1 H), 6.96 (t 1 H) 4.19-4.00 (m 3 H), 3.79 (s 1 H), 3.44-3.18 (m, 2H) ppm. 2.7 การวิเคราะห์ I3A 2.7.1 สกัดกะหล่ำปลี (50 กรัม) ถูกวางลงใน 200 มิลลิลิตรของน้ำเดือดและขยับเป็นเวลา 5 นาที ส่วนผสมที่ถูกระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้องและ homogenised กับอัลตร้า Turrax ส่วนผสมนี้ 50 มิลลิลิตรไดคลอโรมีเทนมีการเพิ่มและขยับเป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง กะหล่ำปลีดองถูกกรองออกจากการแก้ปัญหาและชั้นอินทรีย์ที่ถูกแยกออกจากกัน ชั้นน้ำสกัดสี่ครั้งด้วยไดคลอโรมีเทน 25 มิลลิลิตร ชั้นรวมอินทรีย์แห้งไม่มีน้ำมากกว่า Na2SO4 ตัวทำละลายส่วนเกินจะถูกลบออกภายใต้สูญญากาศและใหม่ละลายด้วยไดคลอโรมีเทนที่จะทำให้ได้ถึงปริมาณ 5 มิลลิลิตรและเก็บไว้ที่ -80 องศาเซลเซียสจนถึงการวิเคราะห์ต่อไป. 2.7.2 การวิเคราะห์เนื้อหาความผันผวนของกะหล่ำปลีถูกกำหนดโดย GC-MS โดยใช้ Agilent 6890 chromatograph ก๊าซพร้อมกับคอลัมน์ DB-5-MS (60 เมตร× 0.32 × 0.25 มมไมครอน) และมวลเฉื่อย Agilent 5975 เครื่องตรวจจับการคัดเลือก ปริมาณการฉีด 1 ไมโครลิตรและอัตราการไหลของคอลัมน์ 2 มิลลิลิตร / นาที หัวฉีดได้รับการดำเนินการในโหมดการแบ่ง (1: 1) ที่มีอุณหภูมิ 200 องศาเซลเซียส อุณหภูมิเครื่องตรวจจับตั้งอยู่ที่ 230 องศาเซลเซียสโปรแกรมอุณหภูมิเตาอบถูกกำหนดดังต่อไปนี้: 50 ° C ซึ่งจัดขึ้นเป็นเวลา 2 นาทีและเพิ่มขึ้นใน 6 ° C / นาทีถึง 200 ° C ซึ่งจัดขึ้นเป็นเวลา 1 นาทีจากนั้นเพิ่มขึ้นถึง 260 ° C ที่ 15 ° C / นาทีถือเป็นครั้งสุดท้ายเป็นเวลา 1 นาที สเปกโตรมิเตอร์มวลได้รับการดำเนินการในโหมดอิเล็กตรอน Ionisation (70 eV) และข้อมูลที่ได้มาในโหมดเต็มสแกนช่วงเมตร / z 27-400 ที่ถูกระบุโดยอ้างอิงถึง I3A ห้องสมุด NIST (NIST / EPA / NIH มวลรุ่นห้องสมุดผี 2.0d, สถาบันมาตรฐานและเทคโนโลยี Gaithersburg, MD) และได้รับการยืนยันโดยการเปรียบเทียบเวลาการเก็บรักษาและสเปกตรัมมวลของมาตรฐานการวิเคราะห์ I3A 2.8 การวิเคราะห์ทางสถิติการวิเคราะห์ทางสถิติได้ดำเนินการโดยโปรแกรม SPSS 15.0 (ขาเดียว ANOVA; Bonferroni p <0.05). 3 และการอภิปรายผล3.1 ค่า pH หมักตามมาด้วยการวัดค่า pH โดยตรงในหม้อหมักที่มีกะหล่ำปลีหั่นฝอย ค่าพีเอชเริ่มต้นของกะหล่ำปลีหั่นเป็น 6.0 และลดลงเล็กน้อยมาอยู่ที่ 5.9 หลังจากผสมกับเกลือ (วันที่ 0); หลังจาก 48 ชั่วโมง (วันที่ 2) ค่า pH เริ่มลดลง 5.4 ตามด้วยการลดลงอย่างมากเป็น 4.2 โดยวันที่ 5 จาก 7 วันจนถึงวันที่ 56 พีเอชยังคงอยู่รอบ 4.0 (รูป. 1a) กรดอย่างรวดเร็วระหว่างการหมักเป็นที่คาดหวังเนื่องจากการเพิ่มการผลิตของแลคติกและกรดอินทรีย์อื่น ๆ ในขั้นตอนการหมักครั้งแรก นี้ตามด้วยขั้นที่สองของการหมักที่สุดท้ายค่า pH ต่ำกว่า 4 ถึง ลดลงอย่างรวดเร็วในค่า pH ที่จุดเริ่มต้นของการหมักมีความสำคัญที่มีคุณภาพที่ดีสำหรับกะหล่ำปลีดองในขณะที่มันช่วยลดอิทธิพลของเชื้อแบคทีเรียเน่าเสีย (Viander et al., 2003 และ Xiong et al., 2014)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 และการวิเคราะห์ของบริษัท i3c

ดูแล . การสกัด

สำหรับการสกัดและการแก้ไขเล็กน้อยตั้งแต่ i3c เป็นขั้นตอนจาก ciska et al . ใช้ ( ciska & pathak , 2004 ) ประมาณ 20 กรัมกะหล่ำปลีและ 2 กรัมของเกลือเป็น homogenised ใน Ultra turrax homogeniser ( ika-t-25 พื้นฐาน ) การ homogenised ตัวอย่างถูกสกัดด้วยอะซีโตน ( 3 × 20 ml )อะซิโตนส่วนเกินจะถูกลบออกใน vacuo 10 ml ของเล่มสุดท้าย สมาธิถูกสกัดด้วยเอทิลอะซิเตท ( 3 × 20 มิลลิลิตร แทน ของ สอง ครั้ง จาก ciska et al . ขั้นตอน ) รวมอินทรีย์ชั้นแห้งกว่า na2so4 ปราศจากน้ำและตัวทำละลายจะถูกลบออก ตกค้างที่ละลายใน ไน , กรอง ( กรอง chromafil 1.0/0 PTFE .2 μ M ) และสร้างขึ้นเป็นเล่มสุดท้ายของตรง 5 ml สารสกัดที่อุณหภูมิ 80 องศา C −จนถึงการวิเคราะห์

ดาวน์โหลด . การวิเคราะห์ปริมาณ hplc-ms

ได้ดำเนินการกับ Agilent 1100 ชุด HPLC / พ่อ ด้วยระบบ nucleodur 100 – 5-c18 EC คอลัมน์ ( 250 มม. × 4 มม. พร้อมยามคอลัมน์ ) จาก macherey –นาเกล . ฉีดμปริมาณ 5 ลิตรและอัตราการไหลของ 04 มิลลิลิตรต่อนาที และใช้คอลัมน์อุณหภูมิไว้ที่ 20 องศา เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยระดับ 0.05 % ในน้ำนี้เป็น 100% ไนนี้ข. ลาด ( เริ่มต้นกับ 20% ของตัว B สำหรับ 20 นาที เพิ่มเป็น 30% สารละลาย B จนถึง 25 นาที และยังเพิ่ม 99% สารละลาย B จนถึง 27 นาทีและจากนั้นลดลง 20% ตัว B ที่ 32 นาทีสารที่ตรวจพบและ quantified โดยการดูดซึมรังสี UV ที่ 280 nm . ปริมาณเท่ากับโดยเส้นโค้งสอบเทียบแต่ละ ( ภายนอก ) จากมาตรฐาน สารผสมที่ประกอบด้วยบริษัท i3c ( ขีด จำกัด ของการตรวจหาและ 0.002 mg / ml )

2.6.3 . การวิเคราะห์ HPLC – ESI MSN

นางสาวเงื่อนไขดังนี้ ความดัน Nebuliser 40 psi และไนโตรเจนอัตราการไหลเท่ากับ 8 ลิตร / นาที ที่อุณหภูมิ 350 องศา อบแห้งสแกนได้จากมวล m / z 50 2000 ในโหมด ionisation บวก เงื่อนไขการตรวจสอบดังนี้ : capillary แรงดัน 5 V ; Skimmer แรงดันไฟฟ้า , − 40.0 V ; C ออกโต oct1dc −− 12 V , V ; ; oct2dc 1.70 V ; ขับ , กับดักระดับ 48.3 ; octrf 150.0 VPP เลนส์ , เลนส์ 1 , − 2 , − 5.0 V ; สภาวะที่เหมาะสม

V 2.6.4 . การสังเคราะห์ของ ABG

และได้ดำเนินการตาม zielinska frias , ,penas valeverde & ไซลินสกี้ , , ( 2555 ) สั้น ๆ , 880 มิลลิกรัม กรดแอสคอร์บิค ( 5.0 มิลลิโมล ) ถูกละลายใน 40 มิลลิลิตร mcllvaine บัฟเฟอร์ pH 4 ) นี้ i3c 740 มิลลิกรัม ( 5.0 มิลลิโมล ) มีการเพิ่ม ปฏิกิริยาผสมกวนที่อุณหภูมิห้องภายใต้ไนโตรเจนเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ในที่มืด , กรอง , ล้าง 3 ครั้ง 20 มิลลิลิตรสกัดเอทิลอีเทอร์ และครั้งที่สี่กับ 25 มิลลิลิตร เอทิลอะซิเทตรวมเอทิลอะซิเตทชั้นแห้งกว่ารัส na2so4 . การระเหยของตัวทำละลาย พบ 696 mg ของบริษัทผลิตภัณฑ์ในขั้นสุดท้าย 1H NMR ( 200 MHz meod ) δ : 7.61 d ( , 1 ) ) , 7.31 ( D 1 H ) 7.20 ( s , 1 h ) 7.06 ( T 1 H ) , ไก ( T 1 H ) , 4.19 และ 4.00 ( M , H ( , 3 ) 3.79 วินาที 1 H ) , 3.44 และ 3.18 ( M , 2H ) ppm .

2.7 . การวิเคราะห์ i3a

การพัก . การสกัด

กะหล่ำปลี ( 50 กรัม ) คืออยู่ใน 200 ml ของน้ำเดือดและคนเป็นเวลา 5 นาที ส่วนผสมมันเย็นที่อุณหภูมิห้อง และ homogenised กับ Ultra turrax . การผสม 50 มิลลิลิตร เพื่อเพิ่มคนเป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ส่วนซาวเคร้าท์ถูกกรองออกจากสารละลายอินทรีย์เป็นชั้นแยกกันชั้นสี่ครั้งด้วยน้ำสกัดไดคลอโรมีเทน 25 ml . รวมอินทรีย์ชั้นแห้งกว่ารัส na2so4 . ตัวทำละลายส่วนเกินจะถูกลบออกในสุญญากาศและสลายไปด้วยเพื่อให้ถึงปริมาณ 5 มิลลิลิตรที่อุณหภูมิ 80 องศา C และ บริษัท เวสเทิร์น จนถึงการวิเคราะห์ต่อไป

2.7.2 . การวิเคราะห์

เนื้อหาสารระเหยของกะหล่ำปลีที่ถูกตัดสินใจโดย GC โดยใช้แก๊สโครมาโตกราฟ และนางสาวเลนต์ 6890 พร้อมกับคอลัมน์ db-5-ms ( 60 m × 0.32 มม. × 0.25 μ M ) และด้าน 5975 มวลเฉื่อยงานตรวจจับ ปริมาณการฉีดคือ 1 μลิตรและอัตราการไหลของคอลัมน์ 2 มล. / นาที หัวฉีด ดำเนินการในโหมดแยก ( 1 : 1 ) ด้วยอุณหภูมิ 200 องศา เครื่องตรวจจับอุณหภูมิถูกกำหนดไว้ที่ 230 องศาซีโปรแกรมตั้งค่าอุณหภูมิเตาอบมีดังนี้ 50 ° C , จัดขึ้นใน 2 นาทีและเพิ่มขึ้น 6 ° C / นาที ถึง 200 องศา C จัด 1 นาที แล้วเพิ่มเป็น 260 องศา C ที่ 15 ° C / นาที ถือสุดท้าย 1 นาทีแมสสเปกโตรมิเตอร์ ดำเนินการในโหมด EV ( 70 ionisation อิเล็กตรอน ) , และข้อมูลที่ได้มาในช่วงที่เต็มรูปแบบสแกนโหมด m / z 27 – 400i3a ถูกระบุโดยอ้างอิงมาตรฐานห้องสมุด ( NIST / EPA สหรัฐอเมริกามวลสเปกตรัมห้องสมุดรุ่น 2.0d แห่งชาติสถาบันมาตรฐานและเทคโนโลยี Gaithersburg MD ) และได้รับการยืนยันโดยการเปรียบเทียบความคงทนในการจำ เวลา มวล และวิเคราะห์สเปกตรัมของมาตรฐาน i3a

2.8 . สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูล คือ การวิเคราะห์สถิติ

โดยใช้โปรแกรม SPSS 15.0 ( One way ANOVA ที่ p < 0.05 ; บอนเฟอร์โรนี )

3ผลและการอภิปราย
3.1 . อ

หมักตามวัด pH โดยตรงในกระบวนการหมักหม้อที่มีกะหล่ำหั่นฝอย พีเอชเริ่มต้นของกะหล่ำปลีหั่นฝอยคือ 6.0 และมันก็ลดลงถึง 5.9 หลังจากผสมกับเกลือ ( วันที่ 0 ) ; หลังจาก 48 ชั่วโมง ( 2 วัน ) pH เริ่มลดลง 5.4 ตามการลดลงอย่างมากถึง 4.2 วัน 5จากวันที่ 7 จนถึงวันที่ 56 pH ยังคงประมาณ 4.0 ( รูปที่ 1A ) การหมักกรดอย่างรวดเร็วในช่วงที่คาดว่าจะเกิดขึ้นเนื่องจากการเพิ่มการผลิตกรดแลคติกและอินทรีย์อื่น ๆในขั้นตอนการหมักครั้งแรก นี้จะตามด้วยขั้นตอนที่สองของกระบวนการหมักที่ค่า pH 4 ถึงสุดท้ายด้านล่าง .การลดลงของ pH เริ่มต้นของการหมักมีความสำคัญสำหรับคุณภาพของกะหล่ำปลีมันช่วยลดอิทธิพลของเชื้อแบคทีเรียที่ทำให้เกิดการเน่าเสีย ( viander et al . , 2003 และสง et al . , 2010 )