2.3. Preparation and propagation of

2.3. Preparation and propagation of yeast cells
The dried yeast powder (S. cerevisiae) was aseptically inoculated into ten 150-ml Erlenmeyer flasks each containing 50 ml sterilized yeast malt extract (YM) broth. The flasks were incubated at 30 C for 48 h and 100 rpm in an incubator shaker (Innova 4000, New Brinswick Scientific, USA). Ten percent of the inoculum was aseptically transferred to each of 10 sterilized 250-ml Erlenmeyer flasks containing 100 ml sterilized PYGAL medium composed of (%; w/v) peptone
0.3, yeast extract 0.3, KH2PO4 0.1, MgSO47H2O 0.1 and galactose 2.0. The pH of the medium was adjusted to 5.6 and the flasks were incubated at 35 C for 24 h at 100 rpm in an incubator shaker. Fifty milliliters of the inoculum obtained from each flask after 24 h incubation was aseptically transferred to a 1-l flask containing 500 ml sterilized PYGAL medium. The 10 1-l flasks were incubated at 35 C for 24 h at 100 rpm in an incubator shaker. PYGAL medium was prepared fresh each time, just prior to the fermentation experiments. Cells were concentrated by centrifugation of culture in sterilized centrifuge tubes at 10,000 g at 4 C for 10 min in a refrigerated centrifuge (Sorvall superspeed FCC B, Sorvall Inc.,
USA). The supernatant was discarded from the centrifuge tubes and the tubes containing pellets were votexed on a vortex shaker.The contents from all the tubes were aseptically transferred to two sterilized 50-ml centrifuge tubes. Depending upon the cell count in suspension, the process was repeated for further concentration of the cells. Since the objective of this study was to achieve high ethanol productivity, the cells were concentrated to a level of 3 109 cells/ml for inoculation purpose. Previous studies reported that S. cerevisiae grown on galactose helped in simultaneous fermentation
of glucose and galactose in high cell density fermentation (Ernandes et al., 1992). In a previous study we found a 30%
increase in ethanol production from kinnow (Citrus reticulata) waste using S. cerevisiae cells grown on galactose compared with the cells grown on glucose in a SSF process (data not shown).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 การเตรียมและการแพร่กระจายของเซลล์ยีสต์ผงยีสต์แห้ง (เอส cerevisiae) ได้รับเชื้อปลอดเชื้อเป็นสิบ 150 มล. ขวด Erlenmeyer แต่ละที่มี 50 มลสารสกัดจากมอลต์ผ่านการฆ่าเชื้อยีสต์ (YM) น้ำซุป
ขวดถูกบ่มที่ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมงและ 100 รอบต่อนาทีในเครื่องปั่นศูนย์บ่มเพาะ (Innova 4000, ใหม่ Brinswick วิทยาศาสตร์สหรัฐอเมริกา) ร้อยละสิบของเชื้อถูกย้ายปลอดเชื้อให้กับแต่ละ 10 ฆ่าเชื้อ 250 มล. ขวด Erlenmeyer มี 100 มล. ฆ่าเชื้อกลาง PYGAL ประกอบด้วย (% w / v) เปปโตน
0.3 ยีสต์สกัด 0.3 KH2PO4 0.1, 0.1 MgSO47H2O และกาแลคโต 2.0 ค่า pH ของกลางที่ได้รับการปรับให้ 5.6 และขวดที่ถูกบ่มที่ 35 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 100 รอบต่อนาทีในเครื่องปั่นศูนย์บ่มเพาะ ห้าสิบมิลลิลิตรหัวเชื้อที่ได้รับจากแต่ละขวดหลังจากบ่ม 24 ชั่วโมงถูกย้ายไปที่ปลอดเชื้อขวด 1 ลิตรที่มีการฆ่าเชื้อ 500 มลกลาง PYGAL 10 1 ลิตรขวดถูกบ่มที่ 35 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 100 รอบต่อนาทีในเครื่องปั่นศูนย์บ่มเพาะ กลาง PYGAL ถูกจัดทำสดใหม่ทุกครั้งก่อนที่จะทดลองการหมัก เซลล์ที่ถูกเข้มข้นโดยการหมุนเหวี่ยงของวัฒนธรรมในการฆ่าเชื้อหลอดหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 กรัมที่ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีในการหมุนเหวี่ยงตู้เย็น (Sorvall SuperSpeed ​​FCC B, Sorvall
อิงค์สหรัฐอเมริกา) สารละลายทิ้งจากหลอดหมุนเหวี่ยงและท่อที่มีเม็ดถูก votexed ในกระแสน้ำวนเนื้อหา shaker.The จากหลอดทั้งหมดถูกโอนปลอดเชื้อสองฆ่าเชื้อ 50 มิลลิลิตรหลอดหมุนเหวี่ยง ทั้งนี้ขึ้นอยู่กับจำนวนเซลล์ในการระงับกระบวนการซ้ำสำหรับความเข้มข้นต่อไปของเซลล์ เนื่องจากวัตถุประสงค์ของการศึกษาครั้งนี้คือการผลิตเอทานอลประสบความสำเร็จสูงเซลล์มีความเข้มข้นในระดับ 3 109 เซลล์ / มล. เพื่อจุดประสงค์ในการฉีดวัคซีน ศึกษาก่อนหน้านี้มีรายงานว่าเอส cerevisiae
ที่ปลูกในกาแลคโตช่วยในการหมักพร้อมกันของน้ำตาลกลูโคสและกาแลคโตในการหมักเซลล์ความหนาแน่นสูง(Ernandes et al., 1992) ในการศึกษาก่อนหน้านี้เราพบว่า 30%
เพิ่มขึ้นในการผลิตเอทานอลจาก kinnow (Citrus reticulata) เสียโดยใช้เซลล์ S. cerevisiae ที่ปลูกในกาแลคโตเมื่อเทียบกับเซลล์ที่ปลูกในกลูโคสในกระบวนการ SSF (ที่ไม่ได้แสดงข้อมูล)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ว่าแต่ ตอนนี้มีเพียง zanoba และฉันอยู่