Adults of each insect species were

Adults of each insect species were individually
ground in 400 μl of cold extraction buffer (10 mM Tris, pH 8.0, 0.1 M
EDTA, 20 μg/ml RNase and 0.5% SDS)
The ground sample was
incubated at 50 °C for 10 min with 5 μl of proteinase K (20 mg/ml).
To remove macromolecules other than nucleic acids, a mixture of
phenol (pH 8.0) and chloroform (1:1, v/v) was added in a volume
equal to the bground?N sample.The mixture was then centrifuged at
14,000 rpm for 2 min. The upper layer was removed and mixed with
an equal volume of a mixture of chloroform and isopropyl alcohol
(24:1, v/v). Genomic DNA was then isolated by ethanol precipitation
and resuspended in sterilized deionized water

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผู้ใหญ่แต่ละพันธุ์แมลงถูกแยกพื้นใน μl 400 บัฟเฟอร์สกัดเย็น (10 mM ตรี ค่า pH 8.0, 0.1 MEDTA, 20 μg/ml RNase และ 0.5% SDS)ตัวอย่างดินถูกincubated ที่ 50 ° C สำหรับ 10 นาทีกับ μl 5 ของ proteinase K (20 mg/ml)เอาส่วนผสมของ macromolecules ไม่ใช่กรดนิวคลีอิกเพิ่มปริมาณการวาง (pH 8.0) และคลอโรฟอร์ม (1:1, v/v)เท่ากับ bgroundตัวอย่าง Nส่วนผสมถูก centrifuged แล้วที่14000 รอบต่อนาทีใน 2 นาที ชั้นบนถูกเอาออก และผสมกับปริมาตรเท่ากันผสมระหว่างคลอโรฟอร์มและแอลกอฮอล์ isopropyl(24:1, v/v) Genomic DNA ถูกแล้วแบ่งแยกฝนเอทานอลและ resuspended ในน้ำ deionized sterilized

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผู้ใหญ่ของแต่ละสายพันธุ์แมลงได้เป็นรายบุคคล
ในพื้นดิน 400 ไมโครลิตรของสารสกัดเย็น (10 mM Tris พีเอช 8.0, 0.1 M
EDTA, 20 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร RNase และ 0.5% SDS)
ตัวอย่างพื้นดินได้รับการ
บ่มที่อุณหภูมิ 50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีด้วย . 5 ไมโครลิตรของโปร K (20 mg / ml)
ในการลบโมเลกุลอื่นที่ไม่ใช่กรดนิวคลีอิกส่วนผสมของ
ฟีนอล (pH 8.0) และคลอโรฟอร์ม (1: 1, v / v) ถูกเพิ่มเข้ามาในปริมาณ
? เท่ากับ bground ไม่มี ส่วนผสม sample.The ถูกปั่นแล้วที่
14,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 2 นาที ชั้นบนจะถูกลบออกและผสมกับ
ปริมาณที่เท่ากันของส่วนผสมของคลอโรฟอร์มและเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ isopropyl
(24: 1, v / v) ดีเอ็นเอที่แยกได้แล้วโดยการตกตะกอนเอทานอล
และ resuspended ในน้ำปราศจากไอออนผ่านการฆ่าเชื้อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผู้ใหญ่ของแมลงแต่ละชนิด แต่ละพื้นดินใน 400 μ L
กันชน การสกัดเย็น ( 10 มม. นอกจากนี้ พีเอช 8.0 ความเข้มข้น 0.1 M
EDTA 20 μ g / ml และเลส 0.5 % t )

พื้นตัวอย่างบ่มที่อุณหภูมิ 50 องศา C นาน 10 นาทีกับ 5 ลิตร K ( 20 μโปรมิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) .
เอาโมเลกุลอื่นนอกจากกรดนิวคลีอิก ส่วนผสมของ
ฟีนอล ( pH 8.0 ) และคลอโรฟอร์ม ( 1 : 1 v / v ) คือเพิ่มในปริมาณ
เท่ากับ bground ?n ตัวอย่าง ส่วนผสมก็ระดับที่
14000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 2 นาทีชั้นบนจะถูกลบออกและผสมกับ
ปริมาณเท่ากับของผสมคลอโรฟอร์ม และไอโซโพรพิล แอลกอฮอล์
( 24 : 1 v / v ) ดีเอ็นเอถูกแยกโดยการฆ่าเชื้อ resuspended
และเอทานอลในน้ำคล้ายเนื้อเยื่อประสาน