Intestinal Histology
In EXP 1, the objective of the histology collection
was to quantitate morphological characteristics of
broiler duodenal and jejunal tissue. Two 42-d-old broilers
per pen (96 total birds) were randomly selected for
tissue collection. The selected broilers were weighed and
then euthanized via cervical dislocation prior to intestinal
tissue collection. Two personnel who were blinded to
the treatments in this experiment were provided with
broiler carcasses to extract intestinal tissues. A 2.54
cm segment of the duodenum (defined as extending
from the end of the gizzard to the end of the duodenal
loop) and jejunum (defined as extending from
the end of the duodenal loop to Meckel’s diverticulum
or location of yolk sac remnant) were harvested
and immediately placed in 10% neutral buffered formalin
in an individual container labeled with information pertaining to treatment, replicate, and individual
bird. Tissues were processed at the Histology Laboratory
associated with the Department of Comparative
Biosciences in the College of Veterinary Medicine at
the University of Illinois at Urbana-Champaign. Procedures
included routine processing, paraffin embedding,
sectioning, hematoxylin and eosin staining, and
cover-slipping. For sectioning, 3 tissue steps (independent
parts of the tissue that are 100 μm apart) were
collected with 3 to 4 serial sections/step to ensure that
enough villi and crypts would be counted. Completed
slides were automatically scanned at 20× magnification
using automated equipment (Nanozoomer Digital
Pathology, Hamamatsu Corp., Bridgewater, NJ), and
digital images of tissue sections were manually scored
by trained personnel. Individual villus height and crypt
depth were measured using the Nanozoomer Digital
Pathology software and were averaged per bird. The
final data point represented an average of all measures
taken per bird.
Calculated data from the measurements included the
ratio of villus height to crypt depth and the apparent
villus surface area, which was calculated as follows: apparent
villus surface area = (villus basal width + villus
apical width)/2 × villus height.
In EXP 2, two 42-d-old broilers per pen (96 total
birds) were randomly selected for tissue collection on
d 21 and 35. Materials and methods for EXP 2 were
similar to EXP 1 with the exceptions that ileal (defined
as Meckel’s diverticulum or location of yolk sac
remnant to 1 inch above the ceca) samples were extracted,
and all intestinal samples from the duodenum,
jejunum, and ileum that were extracted from one bird
were placed in a container so that each section could be
identified at the Poultry Diagnostic Research Center
Histology Laboratory. Serial sections of the duodenum,
jejunum, and ileum were cut, routinely processed, embedded,
sectioned, and stained with hematoxylin and
eosin to evaluate villus height. Villus height measurements
were determined by measuring the distance from
the crypt opening to the villus tip (Kik et al., 1990) and
by using the ImageJ software available on the National
Institutes of Health website.
ลำไส้จุลใน EXP 1 วัตถุประสงค์ของการเก็บเนื้อเยื่อที่กำลังจะquantitate ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของลำไส้ไก่เนื้อและเนื้อเยื่อjejunal สองไก่ 42 d เก่าต่อปากกา(96 นกทั้งหมด) มีการสุ่มเลือกสำหรับคอลเลกชันของเนื้อเยื่อ ไก่ที่เลือกได้รับการชั่งน้ำหนักและแล้ว euthanized เคลื่อนที่ผ่านปากมดลูกก่อนที่จะลำไส้คอลเลกชันของเนื้อเยื่อ สองบุคลากรที่ได้รับการตาบอดในการรักษาในการทดลองนี้ได้ให้ไว้กับซากไก่ที่จะดึงเนื้อเยื่อลำไส้ 2.54 ส่วนเซนติเมตรต้น (หมายถึงการขยายจากจุดสิ้นสุดของกระเพาะอาหารของนกที่จะจุดสิ้นสุดของลำไส้เล็กส่วนต้นวง) และ jejunum (ตามที่กำหนดยื่นออกมาจากปลายสุดของห่วงลำไส้เพื่อผนังอวัยวะMeckel ของหรือสถานที่ตั้งที่เหลือถุงไข่แดง) ได้รับการเก็บเกี่ยวและวางไว้ทันทีในฟอร์มาลินบัฟเฟอร์เป็นกลาง 10% ในภาชนะของแต่ละบุคคลที่มีข้อความที่มีข้อมูลที่เกี่ยวข้องกับการรักษาซ้ำและบุคคลนก เนื้อเยื่อที่ถูกประมวลผลที่ห้องปฏิบัติการจุลเกี่ยวข้องกับกรมเปรียบเทียบชีววิทยาศาสตร์ในวิทยาลัยสัตวแพทยศาสตร์ที่มหาวิทยาลัยอิลลินอยส์Urbana-Champaign ขั้นตอนรวมถึงการประมวลผลประจำฝังพาราฟินsectioning, hematoxylin และการย้อมสี Eosin และครอบคลุมการลื่นไถล สำหรับ sectioning, 3 ขั้นตอนเนื้อเยื่อ (อิสระส่วนของเนื้อเยื่อที่มี100 ไมโครเมตรออกจากกัน) ได้รับการเก็บรวบรวมกับ3-4 ส่วนอนุกรม / ขั้นตอนเพื่อให้แน่ใจว่าvilli เพียงพอและสัจจะจะนับ ที่เสร็จสมบูรณ์ภาพนิ่งถูกสแกนโดยอัตโนมัติใน 20 ×ขยายการใช้อุปกรณ์อัตโนมัติ(Nanozoomer ดิจิตอลพยาธิวิทยาHamamatsu คอร์ปบริดจ์วอเตอร์, นิวเจอร์ซีย์) และภาพดิจิตอลของเนื้อเยื่อส่วนที่ถูกยิงด้วยตนเองโดยการฝึกอบรมบุคลากร ความสูงของแต่ละบุคคลและ villus ห้องใต้ดินลึกถูกวัดโดยใช้Nanozoomer ดิจิตอลซอฟต์แวร์พยาธิวิทยาและเฉลี่ยต่อนก จุดข้อมูลสุดท้ายเป็นตัวแทนของค่าเฉลี่ยของมาตรการทั้งหมดที่นำมาต่อนก. ข้อมูลคำนวณจากการวัดรวมทั้งอัตราส่วนของความสูง villus ที่จะฝังศพใต้ถุนโบสถ์เชิงลึกและชัดเจนพื้นที่ผิวvillus ซึ่งได้รับการคำนวณดังนี้ชัดเจนพื้นที่ผิวvillus = (villus ความกว้างฐาน + villus กว้างปลาย) / 2 ×สูง villus. ใน 2 EXP สองไก่ 42 d เก่าต่อปากกา (รวม 96 นก) ได้รับการสุ่มเลือกสำหรับคอลเลกชันของเนื้อเยื่อในd 21 และ 35. วัสดุและวิธีการสำหรับ EXP 2 ก็คล้ายกับEXP 1 มีข้อยกเว้นที่ ileal (ตามที่กำหนดเป็นผนังอวัยวะMeckel หรือตำแหน่งของถุงไข่แดงที่เหลือถึง1 นิ้วข้างต้นซีกัม) ตัวอย่างที่ถูกสกัดและตัวอย่างลำไส้จากลำไส้เล็กส่วนต้น, jejunum และ ileum ที่ถูกสกัดจากนกตัวหนึ่งถูกวางไว้ในภาชนะเพื่อให้แต่ละส่วนจะได้รับการระบุในสัตว์ปีกศูนย์วิจัยวินิจฉัยจุลห้องปฏิบัติการ ส่วนอนุกรมของลำไส้เล็กส่วนต้น, jejunum และ ileum ถูกตัดการประมวลผลประจำฝังตัวตัดและย้อมด้วยสีhematoxylin และEosin ในการประเมินความสูง villus villus วัดความสูงได้รับการพิจารณาโดยการวัดระยะทางจากการเปิดห้องใต้ดินไปยังปลายvillus (กิ๊ก et al., 1990) และโดยใช้ซอฟต์แวร์ImageJ ที่มีอยู่บนแห่งชาติสถาบันของเว็บไซต์สุขภาพ
การแปล กรุณารอสักครู่..

เนื้อเยื่อลำไส้ใน EXP 1 วัตถุประสงค์ของเนื้อเยื่อคอลเลกชัน
ถูกกับลักษณะสัณฐานของลำไส้ jejunal
ไก่เนื้อและเนื้อเยื่อ สอง 42-d-old ไก่
/ ปากกา ( 96 นกทั้งหมด ) สุ่มสำหรับ
เก็บเนื้อเยื่อ เลือกใช้เป็นหนักและ
แล้ว euthanized ผ่านปากมดลูก เคลื่อน ก่อนเก็บเนื้อเยื่อลำไส้
2 บุคลากรที่ไป
การรักษา ในการทดลองนี้ได้ให้ไว้กับ
ไก่ซากเพื่อสกัดเนื้อเยื่อลำไส้ เป็น 2.54 ซม. ส่วนของลำไส้เล็ก (
หมายถึงการขยายจากจุดสิ้นสุดของปลาตะเพียน ปลายห่วงลำไส้
) และลำไส้เล็กส่วนกลาง ( เช่นขยายจาก
ปลายห่วงลำไส้เพื่อ meckel ของสภาวัฒนธรรมแห่งชาติ
หรือตำแหน่งของถุงไข่แดงเหลืออยู่ ) เก็บ
และทันทีที่อยู่ใน 10% neutral buffered formalin เป็น
ในแต่ละภาชนะป้ายชื่อข้อมูลเกี่ยวข้องกับการลอกเลียนแบบ และนกแต่ละคน
เนื้อเยื่อที่ถูกประมวลผลในลักษณะที่เกี่ยวข้องกับห้องปฏิบัติการ
ภาควิชาชีววิทยาเปรียบเทียบในวิทยาลัยสัตวแพทย์ที่
มหาวิทยาลัยอิลลินอยส์ Urbana Champaign . ขั้นตอน
รวมการประมวลผล พาราฟินฝัง
แบ่งรูทีน ย้อมและ eosin คราบและ
ครอบคลุมการลื่นไถล การแบ่ง , 3 ขั้นตอน ( ส่วนเนื้อเยื่ออิสระ
ของเนื้อเยื่อที่ 100 μ M กัน )
เก็บด้วย 3 ขั้นตอนเพื่อให้แน่ใจว่าพอร์ตอนุกรมส่วน /
วิไลเพียงพอและ crypts จะถูกนับ ภาพนิ่งที่ถูกสแกนโดยอัตโนมัติที่สมบูรณ์
ขยาย 20 ×การใช้อุปกรณ์อัตโนมัติ ( nanozoomer ดิจิตอล
พยาธิวิทยา Hamamatsu . Bridgewater , NJ ) และส่วนเนื้อเยื่อ
ภาพดิจิตอลได้ด้วยตนเองคะแนน
โดยบุคลากรที่ได้รับการฝึกฝน วิลลัสแต่ละความสูงและความลึกใต้ดิน
ถูกวัดโดยใช้ nanozoomer ดิจิตอล
พยาธิวิทยาซอฟต์แวร์และเฉลี่ยต่อนก
ข้อมูลจุดสุดท้ายที่แสดง โดยมาตรการทั้งหมด
ถ่ายต่อนกคำนวณข้อมูลจากการวัดสัดส่วนของความสูงรวม
วิลลัสกับความลึกใต้ดินและพื้นผิวแจ่มแจ้ง
วิลลัส ซึ่งคำนวณได้ดังนี้ พื้นที่ผิววิลลัสแจ่มแจ้ง
= ( วิลลัสแรกเริ่มวิลลัส
ความกว้างปลายกว้าง ) / 2 ×ความสูงวิลลัส .
ใน EXP 2 , 2 42-d-old ไก่กระทงต่อปากกา ( 96 นกทั้งหมด
) สุ่มสำหรับเนื้อเยื่อคอลเลกชันบน
D 21 35วัสดุและวิธีการสำหรับ EXP 2
คล้ายกับ EXP 1 กับข้อยกเว้นที่ ileal ( กำหนด
เป็น meckel ของสภาวัฒนธรรมแห่งชาติ หรือตำแหน่งของถุงไข่แดง
คนที่เหลืออยู่ 1 นิ้วเหนือ CECA ) จำนวนสกัด
และลำไส้ตัวอย่างจากลำไส้เล็ก ลำไส้เล็ก ileum
, , และที่ถูกสกัดจากนก
คือ วางอยู่ในภาชนะเพื่อให้แต่ละฝ่ายสามารถ
ระบุที่ศูนย์วิจัยสัตว์ปีก
เนื้อเยื่อ การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการ อนุกรมของลำไส้เล็กส่วน ileum ลำไส้เล็ก
, , และถูกตัด ตรวจประมวลผลฝังตัว
ตัด และย้อมด้วยสีย้อมและ
eosin ประเมินความสูง วิลลั . วิลลัส การวัดความสูง
ถูกกำหนดโดยการวัดระยะห่างจาก
หลุมศพเปิดปลายวิลลัส ( กิ๊ก et al . , 1990 ) และ
โดย ImageJ ซอฟต์แวร์พร้อมใช้งานในสถาบันแห่งชาติ
ของเว็บไซต์สุขภาพ
การแปล กรุณารอสักครู่..
