Human cytochrome P450 2A6 (CYP2A6)

Human cytochrome P450 2A6 (CYP2A6) is a highly polymorphic isoform of CYP2A subfamily. Our previous kinetic study on four CYP2A6 allelic variants (CYP2A6 15, CYP2A6 16, CYP2A6 21 and CYP2A6 22) have unveiled the functional significance of sequence mutations in these variants on coumarin 7-hydroxylation activity. In the present study, we further explored the ability of a typical CYP2A6 inhibitor, 8-methoxypsoralen (8-MOP), in inhibition of these alleles and we hypothesized that translational mutations in these variants are likely to give impact on 8-MOP inhibitory potency. The CYP2A6 variant and the wild type proteins were subjected to 8-MOP inhibition to yield IC50 values. In general, a similar trend of change in the IC50 and Km values was noted among the four mutants towards coumarin oxidation. With the exception of CYP2A6 16, differences in IC50 values were highly significant which implied compromised interaction of the mutants with 8-MOP. Molecular models of CYP2A6 were subsequently constructed and ligand-docking experiments were performed to rationalize experimental data. Our docking study has shown that mutations have induced enlargement of the active site volume in all mutants with the exception of CYP2A6 16. Furthermore, loss of hydrogen bond between 8-MOP and active site residue Asn297 was evidenced in all mutants. Our data indicate that the structural changes elicited by the sequence mutations could affect 8-MOP binding to yield differential enzymatic activities in the mutant CYP2A6 proteins.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มนุษย์ cytochrome P450 2A6 (CYP2A6) เป็น isoform สูง polymorphic ของ CYP2A subfamily สี่ CYP2A6 allelic ย่อย (CYP2A6 15, CYP2A6 16, CYP2A6 21 และ CYP2A6 22) ศึกษาเดิม ๆ ของเราก่อนหน้านี้ได้เปิดงานความสำคัญของลำดับการกลายพันธุ์ในตัวแปรเหล่านี้ coumarin 7 hydroxylation กิจกรรม ในการศึกษาปัจจุบัน เราไปเพิ่มเติมความสามารถของผลมี CYP2A6 ทั่วไป 8-methoxypsoralen (8-MOP), ในยับยั้ง alleles เหล่านี้ และเราตั้งสมมติฐานว่าที่มักจะให้ผลกระทบต่อศักยภาพของลิปกลอสไข 8 ซับ translational กลายพันธุ์ในตัวแปรเหล่านี้ ตัวแปร CYP2A6 และโปรตีนชนิดป่าถูกต้องเพื่อยับยั้ง 8 ซับให้ค่า IC50 ทั่วไป แนวโน้มที่คล้ายกันของการเปลี่ยนแปลงในค่า IC50 และ Km ถูกตั้งข้อสังเกตระหว่างสายพันธุ์ 4 ต่อออกซิเดชัน coumarin ยกเว้น CYP2A6 16 ความแตกต่างในค่า IC50 ได้สูงอย่างมีนัยสำคัญซึ่งโดยนัยถูกโจมตีโต้ตอบของสายพันธุ์กับซับ 8 ต่อมาถูกสร้างแบบจำลองโมเลกุลของ CYP2A6 และลิแกนด์เทียบทดลองดำเนินการ rationalize ข้อมูลทดลอง ศึกษาของเราเทียบได้แสดงว่า กลายพันธุ์ได้ทำให้เกิดการขยายตัวของปริมาณการใช้ในสายพันธุ์ทั้งหมดยกเว้น CYP2A6 16 นอกจากนี้ สูญเสียพันธะไฮโดรเจนระหว่าง 8-ซับและสารตกค้างใช้ Asn297 เป็นหลักฐานในทุกสายพันธุ์ ข้อมูลบ่งชี้ว่า การเปลี่ยนแปลงโครงสร้าง elicited โดยกลายพันธุ์ลำดับอาจมีผลต่อซับ 8 ผูกให้กิจกรรมเอนไซม์ในระบบส่วนในโปรตีน CYP2A6 กลายพันธุ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

cytochrome P450 2A6 มนุษย์ (CYP2A6) เป็นไอโซฟอร์ม polymorphic สูงของอนุวงศ์ CYP2A การศึกษาเกี่ยวกับการเคลื่อนไหวของเราก่อนหน้านี้สี่สายพันธุ์ allelic CYP2A6 (CYP2A6 15 CYP2A6 16, 21 และ CYP2A6 CYP2A6 22) ได้เปิดตัวการทำงานอย่างมีนัยสำคัญของการกลายพันธุ์ในลำดับสายพันธุ์เหล่านี้บน coumarin 7 hydroxylation กิจกรรม ในการศึกษาปัจจุบันเรายังสำรวจความสามารถของสารยับยั้ง CYP2A6 ทั่วไป 8 methoxypsoralen (8-MOP) ในการยับยั้งการอัลลีลเหล่านี้และเราตั้งสมมติฐานว่าการกลายพันธุ์แปลในสายพันธุ์เหล่านี้มีแนวโน้มที่จะให้ผลกระทบในวันที่ 8-MOP แรงยับยั้ง . ตัวแปร CYP2A6 และโปรตีนชนิดป่าถูกยัดเยียดให้ยับยั้ง 8 MOP เพื่อให้ค่า IC50 โดยทั่วไปมีแนวโน้มที่คล้ายกันของการเปลี่ยนแปลงในค่า IC50 และกิโลเมตรที่ถูกบันทึกไว้ในหมู่สี่กลายพันธุ์ไปสู่​​การเกิดออกซิเดชัน coumarin ด้วยข้อยกเว้นของ CYP2A6 16 ความแตกต่างในค่า IC50 อย่างมีนัยสำคัญอย่างมากซึ่งโดยนัยบุกรุกปฏิสัมพันธ์ของมนุษย์กลายพันธุ์ที่มี 8-MOP แบบจำลองโมเลกุลของ CYP2A6 ถูกสร้างขึ้นในภายหลังและการทดลองแกนด์-เชื่อมต่อได้ดำเนินการให้เหตุผลการทดลอง เชื่อมต่อการศึกษาของเราได้แสดงให้เห็นว่าการกลายพันธุ์ได้เหนี่ยวนำให้เกิดการขยายตัวของปริมาณการใช้งานเว็บไซต์ในการกลายพันธุ์ทั้งหมดที่มีข้อยกเว้นของ CYP2A6 16 นอกจากนี้การสูญเสียของพันธะไฮโดรเจนระหว่าง 8 MOP และกากใช้งานเว็บไซต์ Asn297 เป็นหลักฐานในการกลายพันธุ์ทั้งหมด ข้อมูลของเราแสดงให้เห็นว่าการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างที่เกิดจากการกลายพันธุ์ลำดับที่อาจมีผลต่อ 8 MOP ผูกพันที่จะให้ผลผลิตกิจกรรมของเอนไซม์ที่แตกต่างกันในโปรตีน CYP2A6 กลายพันธุ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2a6 ไซโตโครมพี 450 ของมนุษย์ ( 1.14% ) เป็นสายพันธุ์ของไอโซฟอร์มสูง cyp2a subfamily . การศึกษาจลนศาสตร์ของเราก่อนหน้า allelic ตัวแปรสี่ 1.14% ( 1.14% 1.14% 1.14% 15 , 16 , 21 และ 22 1.14% ) ได้เปิดตัวทำหน้าที่สำคัญของลำดับยีนในสายพันธุ์เหล่านี้ในกิจกรรม 7-hydroxylation coumarin . ในการศึกษาครั้งนี้เราสํารวจเพิ่มเติม ความสามารถในการ ยับยั้ง 1.14% โดยทั่วไป8-methoxypsoralen ( 8-mop ) ในการยับยั้งยีนเหล่านี้และเราตั้งสมมุติฐานว่าแปลการกลายพันธุ์ในสายพันธุ์เหล่านี้มีแนวโน้มที่จะให้ผลในการยับยั้ง 8-mop ความแรง การเปลี่ยนแปลง 1.14% และป่าประเภทโปรตีนจะถูกยับยั้ง 8-mop ผลผลิต ic50 ค่า โดยทั่วไปที่คล้ายกัน และแนวโน้มของการเปลี่ยนแปลงใน ic50 กม. ค่าสังเกตทั้ง 4 สายพันธุ์ต่อ coumarin ออกซิเดชัน ด้วยข้อยกเว้นของ 16 1.14% , ความแตกต่างใน ic50 มีค่าสูงแสดงว่าละเมิดความปฏิสัมพันธ์ของพวกกลายพันธุ์กับ 8-mop . โมเลกุลรูปแบบถูกสร้างขึ้นในภายหลัง ) 1.14% และ Docking ทดลองจะหาเหตุผลการทดลองของเราเชื่อมต่อการศึกษาได้แสดงให้เห็นว่าการกลายพันธุ์และการขยายตัวของปริมาณการใช้งานเว็บไซต์ในสายพันธุ์ทั้งหมดยกเว้น 16 1.14% . นอกจากนี้การสูญเสียของพันธะไฮโดรเจนระหว่าง 8-mop และการใช้งานเว็บไซต์กาก asn297 คือไม่มีคนกลายพันธุ์ข้อมูลบ่งชี้ว่า การเปลี่ยนแปลงโครงสร้างโดยใช้ลำดับของการกลายพันธุ์ที่อาจส่งผลกระทบต่อผลผลิต 8-mop ผูกค่าเอนไซม์กิจกรรมใน 1.14%
โปรตีนกลายพันธุ์