Cultivation of endophytic fungiThe

Cultivation of endophytic fungi
The fungi were cultured in appropriate media for the production of secondary metabolites.
Primarily cultivation was done in small scale to perform bioassays for the detection of bioactive
compounds. Both liquid and solid state fermentation was performed for the cultivation of
endophytic fungi. Potato Dextrose Agar (PDA) was mainly used to culture the endophytic fungi.
Liquid state fermentation was carried out for the production of metabolites. Medium was prepared
for the cultivation of endophytic fungi. Two or three cut up of the agar medium (0.5 x 0.5 cm) with
fungal cultures were inoculated in each 1000ml Erlenmeyer flask containing 400ml of potato
dextrose broth medium, and incubated on a rotary shaker at 150 rpm and 28˚C for 21 to 30 days.
The culture broths were filtered, and the culture media and mycelia were separated. The
mycelia were soaked in methanol. Metabolite was extracted by solvent extraction procedure using
ethyl acetate as organic solvent. Equal volume of the filtrate and ethyl acetate was taken in a
separating funnel and shaken vigorously for 10 min. The samples were extracted three times with
ethyl acetate. Ethyl acetate collected after extraction was evaporated and the resultant compound
was dried in vacuum evaporator using MgSO4 to yield the crude metabolite. After evaporation, a
brown coloured crude extract was obtained. The crude extract was then dissolved in Dimethyl
sulphoxide (DMSO) until analysis. The methanolic extract of mycelia was collected after 7 days of
36
soaking. The organic extracts were blended and concentrated in a vacuum at 35°C. Crude extracts
obtained were stored at −20°C until analysis (Choudhary et al. 2004).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ปลูกเชื้อรา endophyticเชื้อรามีอ่างในสื่อที่เหมาะสมสำหรับการผลิตของ metabolites รองเพาะปลูกเป็นหลักภายในขนาดเล็กเพื่อทำ bioassays ตรวจกรรมการกสารประกอบ ทำการเพาะปลูกหมักทั้งสถานะของแข็ง และของเหลวเชื้อรา endophytic มันฝรั่งขึ้น Agar (PDA) ส่วนใหญ่ใช้กับวัฒนธรรมเชื้อรา endophyticสถานะของเหลวหมักได้ดำเนินการผลิตของ metabolites มีเตรียมสื่อสำหรับการปลูกพืชของเชื้อรา endophytic สองหรือสามตัดค่ากลาง agar (0.5 x 0.5 เซนติเมตร) ด้วยวัฒนธรรมเชื้อราถูก inoculated ในแต่ละ 1000ml Erlenmeyer หนาวประกอบด้วย 400ml ของมันฝรั่งขึ้นซุปกลาง และ incubated ในเชคเกอร์โรตารี่ 150 rpm และ 28˚C 21-30 วันถูกกรอง broths วัฒนธรรม และแยกสื่อวัฒนธรรมและ mycelia ที่mycelia ถูกนำไปแช่ในเมทานอล Metabolite ที่สกัด โดยใช้กระบวนการแยกตัวทำละลายacetate เอทิลเป็นตัวทำละลายอินทรีย์ ปริมาตรสารกรองและเอทิล acetate เท่าถ่ายแบบแยกกรวย และหวั่นไหวดั่งใน 10 นาที ตัวอย่างถูกสกัดสามครั้งด้วยacetate เอทิล Acetate เอทิลรวบรวมหลังจากที่สกัดได้หายไปและผสมผลแก่ไม่แห้งใน evaporator สิวใช้ MgSO4 ให้ metabolite ดิบ หลังจากการระเหย การสารสกัดหยาบสีน้ำตาลได้รับ สารสกัดหยาบที่ละลายแล้วใน Dimethylsulphoxide (DMSO) จนถึงการวิเคราะห์ สารสกัดจาก methanolic ของ mycelia รวบรวมไว้หลังจาก 7 วัน36แช่ สารสกัดอินทรีย์ผสม และเข้มข้นในสุญญากาศที่ 35 องศาเซลเซียส สารสกัดจากน้ำมันได้ถูกเก็บไว้ที่ −20 ° C จนถึงการวิเคราะห์ (Choudhary et al. 2004)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การเพาะปลูกของเชื้อราเอนโดไฟท์เชื้อรามีการเพาะเลี้ยงในสื่อที่เหมาะสมสำหรับการผลิตของสารรอง.
หลักการเพาะปลูกได้ทำในขนาดเล็กที่จะดำเนินการ bioassays
ในการตรวจหาออกฤทธิ์ทางชีวภาพสาร
ทั้งการหมักของรัฐที่เป็นของแข็งของเหลวและได้ดำเนินการสำหรับการเพาะปลูกของเชื้อราเอนโดไฟท์ มันฝรั่ง Dextrose Agar (PDA) ถูกนำมาใช้เป็นหลักในการเพาะเลี้ยงเชื้อราเอนโดไฟท์.
หมักเหลวของรัฐได้ดำเนินการในการผลิตสาร
กลางถูกจัดทำขึ้นสำหรับการเพาะปลูกของเชื้อราเอนโดไฟท์ สองหรือสามตัดขึ้นจากสื่อวุ้น (0.5 x 0.5 ซม.)
ที่มีวัฒนธรรมที่ถูกเชื้อเชื้อราในแต่ละขวดErlenmeyer 1000ml 400ml
ที่มีมันฝรั่งกลางน้ำซุปเดกซ์โทรสและบ่มในเครื่องปั่นหมุนที่150 รอบต่อนาทีและ 28C สำหรับ 21-30 วัน.
ซุปมิโสะวัฒนธรรมถูกกรองและสื่อวัฒนธรรมและเส้นใยที่ถูกแยกออกจากกัน
เส้นใยถูกแช่ในเมทานอล
สารสกัดจากขั้นตอนการสกัดโดยใช้น้ำนมอินทรีย์เป็นตัวทำละลาย ปริมาณที่เท่ากันของการกรองและเอทิลอะซิเตทที่ถูกถ่ายในช่องทางแยกและเขย่าแรง ๆ เป็นเวลา 10 นาที กลุ่มตัวอย่างถูกสกัดสามครั้งด้วยเอทิลอะซีเต เอทิลอะซิเตภายหลังได้รับการสกัดสารระเหยและผลลัพธ์แห้งในเครื่องระเหยสูญญากาศใช้ MgSO4 ให้ผลผลิต metabolite น้ำมันดิบ หลังจากการระเหยเป็นสารสกัดหยาบสีน้ำตาลที่ได้รับ สารสกัดหยาบก็เลือนหายไปแล้วใน Dimethyl sulphoxide (DMSO) จนกระทั่งการวิเคราะห์ สารสกัดเมทานอลของเส้นใยที่ถูกเก็บรวบรวมหลังจากวันที่ 7 ของ36 แบบ สารสกัดอินทรีย์ผสมและความเข้มข้นในสูญญากาศที่ 35 ° C สารสกัดที่ได้มาเก็บไว้ที่ -20 ° C จนวิเคราะห์ (Choudhary et al. 2004)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเพาะเลี้ยงเชื้อราเอนโดไฟต์
เพาะเลี้ยงในสื่อที่เหมาะสมเพื่อการผลิตสารทุติยภูมิ .
หลักปลูกได้ในขนาดเล็กแสดงละเอียดเพื่อตรวจหาสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ
. ทั้งของเหลวและของแข็งรัฐทำการหมักเพื่อการเพาะปลูก
รา .อาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar ( PDA ) ส่วนใหญ่จะใช้เพาะเชื้อราเอนโดไฟท์ .
การหมักสถานะของเหลวกระทำเพื่อผลิตสาร . กลางเตรียม
สำหรับการเพาะปลูกของราเอนโดไฟต์ที่แยก . สอง หรือ สาม ตัดขึ้นของอาหารวุ้น ( 0.5 x 0.5 ซม. ) กับ
วัฒนธรรมเชื้อราปลูกเชื้อในแต่ละ 1000ml ขวดที่มี 400ml เออร์เลนเมเยอร์ของ Potato Dextrose Broth
ขนาดกลางโดยในเครื่องปั่นหมุน 150 รอบต่อนาทีและ 28 ˚ C 21 ถึง 30 วัน
วัฒนธรรมาถูกกรองและสื่อมวลชน วัฒนธรรม และเส้นใยแยก the
mycelia สำหรับ soaked in methanol . สร้างสารสกัดจากขั้นตอนการสกัดด้วยตัวทำละลายโดยใช้
เอทิลอะซิเตตเป็นตัวทำละลายอินทรีย์ ขนาดเท่ากัน และถ่ายหนักใน
เอทิลอะซิเตทกรวยแยก และเขย่าอย่างจริงจังเป็นเวลา 10 นาทีจำนวน 3 ครั้งด้วยสารสกัดเอทิลอะซีเตท
. เอทิลอะซิเตตเก็บหลังจากการสกัดสารประกอบระเหยและระเหยแห้ง
ซึ่งในสูญญากาศโดยใช้ MgSO4 ใให้ผลผลิตอาหารดิบ หลังจากการระเหย ,
สีน้ำตาลสีสารสกัดจาก . สกัดแล้วละลายในไดเมทิล
sulphoxide ( DMSO ) จนถึงการวิเคราะห์ สารสกัดเมทานอลจากเส้นใยรวบรวมหลังจาก 7 วัน
0
การแช่ สารสกัดอินทรีย์ผสมและเข้มข้นในสูญญากาศที่อุณหภูมิ 35 องศา สกัด
ได้มีการเก็บที่ - 20 องศา C −จนกว่าการวิเคราะห์ ( choudhary et al . 2004 )