β-galactosidase is an exoglycosidas

β-galactosidase is an exoglycosidase which hydrolyzes the β-glycosidic bond formed between a galactose and its organic moiety. It may also cleave fucosides and arabinosides but with much lower efficiency. It is an essential enzyme in the human body. Deficiencies in the protein can result in galactosialidosis or Morquio B syndrome. In E. coli, the gene of β-galactosidase, the lacZ gene, is present as part of the inducible system lac operon which is activated in the presence of lactose when glucose level is low.

It is commonly used in molecular biology as a reporter marker to monitor gene expression. It also exhibits a phenomenon called α-complementation which forms the basis for the blue/white screening of recombinant clones. This enzyme can be split in two peptides, LacZα and LacZΩ, neither of which is active by itself but when both are present together, spontaneously reassemble into a functional enzyme. This property is exploited in many cloning vectors where the presence of the lacZα gene in a plasmid can complement in trans another mutant gene encoding the LacZΩ in specific laboratory strains of E. coli. However, when DNA fragments are inserted in the vector, the production of LacZα is disrupted, the cells therefore show no β-galactosidase activity. The presence or absence of an active β-galactosidase may be detected by X-gal, which produces a characteristic blue dye when cleaved by β-galactosidase, thereby providing an easy means of distinguishing the presence or absence of cloned product in a plasmid.

In 1995, Dimri et al. proposed a new isoform for beta-galactosidase with optimum activity at pH 6.0 (Senescence Associated beta-gal or SA-beta-gal)[2] which would be specifically expressed in senescence (The irreversible growth arrest of cells). Specific quantitative assays were even developed for its detection.[3][4][5] However, it is now known that this is due to an overexpression and accumulation of the lysosomal endogenous beta-galactosidase,[6] and its expression is not required for senescence. Nevertheless, it remains the most widely used biomarker for senescent and aging cells, because it is reliable and easy to detect.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

β-galactosidase เป็น exoglycosidase ซึ่งไฮโดรไลซ์พันธบัตรβ-glycosidic ที่เกิดขึ้นระหว่างกาแลคโตและครึ่งหนึ่งอินทรีย์ นอกจากนี้ยังอาจแยก fucosides และ arabinosides แต่มีประสิทธิภาพที่ต่ำกว่ามาก มันเป็นเอนไซม์สำคัญในร่างกายมนุษย์ ข้อบกพร่องในโปรตีนที่ได้ผลในการ galactosialidosis หรือ Morquio ซินโดรมบี เชื้อ E. coli ในยีนของβ-galactosidase ที่ยีน lacZ ที่เป็นปัจจุบันเป็นส่วนหนึ่งของระบบ inducible operon ครั่งซึ่งจะเปิดใช้งานในการปรากฏตัวของแลคโตสเมื่อระดับน้ำตาลอยู่ในระดับต่ำ. เป็นที่นิยมใช้ในทางชีววิทยาโมเลกุลเป็นนักข่าว เครื่องหมายการตรวจสอบการแสดงออกของยีน นอกจากนี้ยังมีการจัดแสดงนิทรรศการปรากฏการณ์ที่เรียกว่าα-complementation ซึ่งเป็นพื้นฐานสำหรับการฟ้า / สีขาวคัดกรองของโคลนไข้ทรพิษ เอนไซม์นี้สามารถแบ่งออกเป็นสองเปปไทด์และLacZαLacZΩทั้งที่มีการใช้งานด้วยตัวเอง แต่เมื่อทั้งสองมีอยู่ด้วยกันตามธรรมชาติรวมกันอีกครั้งเป็นเอนไซม์ที่ทำงาน คุณสมบัตินี้ถูกใช้ประโยชน์ในเวกเตอร์โคลนจำนวนมากที่การปรากฏตัวของยีนlacZαในพลาสมิดสามารถเติมเต็มในทรานส์อีกยีนกลายพันธุ์เข้ารหัสLacZΩสายพันธุ์ในห้องปฏิบัติการเฉพาะของเชื้อ E. coli แต่เมื่อดีเอ็นเอจะถูกแทรกในเวกเตอร์, การผลิตของLacZαกระจัดกระจายเซลล์จึงแสดงกิจกรรมβ-galactosidase การปรากฏตัวหรือกรณีที่ไม่มีการใช้งานβ-galactosidase อาจถูกตรวจพบโดย X-สาวซึ่งเป็นผู้ผลิตสีย้อมสีฟ้าลักษณะเมื่อแยกจากβ-galactosidase จึงให้เป็นวิธีที่ง่ายของการแยกความแตกต่างมีหรือไม่มีสินค้าโคลนในพลาสมิดได้. ใน 1995 Dimri et al, เสนอไอโซฟอร์มใหม่สำหรับเบต้า galactosidase กับกิจกรรมที่ดีที่สุดที่ pH 6.0 (ชราภาพเกี่ยวข้องเบต้าแกลลอนหรือ SA-เบต้าแกลลอน) [2] ซึ่งจะแสดงเฉพาะในชราภาพ (การจับกุมการเจริญเติบโตของเซลล์กลับไม่ได้) เฉพาะปริมาณการตรวจแม้กระทั่งการพัฒนาสำหรับการตรวจสอบ. [3] [4] [5] แต่ก็เป็นที่รู้จักกันว่านี่คือเนื่องจากการแสดงออกและการสะสมของ lysosomal ภายนอกเบต้า galactosidase [6] และมันแสดงออกไม่ได้ ที่จำเป็นสำหรับการชราภาพ แต่มันยังคงเป็น biomarker ใช้กันอย่างแพร่หลายสำหรับเซลล์ senescent และริ้วรอยเพราะมันมีความน่าเชื่อถือและง่ายต่อการตรวจสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

บีตา - galactosidase ซึ่งเป็น exoglycosidase hydrolyzes และบีตา - พันธะไกลโคซิดิกเกิดขึ้นระหว่างปัจจัยที่มีผลต่อการผลิตกึ่งหนึ่งของอินทรีย์ มันอาจจะยังติดอยู่และ fucosides arabinosides แต่ประสิทธิภาพต่ำกว่ามาก มันเป็นเอนไซม์ที่สำคัญในร่างกายมนุษย์ การขาดโปรตีนได้ผลใน galactosialidosis หรือ morquio B ซินโดรม ใน E . coli , ยีนบีตา - galactosidase lacz , ยีน ,ปัจจุบันเป็นส่วนหนึ่งของระบบ inducible . kz ซึ่งสามารถใช้งานได้ในการปรากฏตัวของแลคโตส เมื่อระดับกลูโคสต่ำ

มันเป็นที่นิยมใช้ในอณูชีววิทยาเป็นนักข่าวเครื่องหมายการตรวจสอบการแสดงออกของยีน นอกจากนี้ยังจัดแสดงปรากฏการณ์ที่เรียกว่าเอนไซม์แอลฟาซึ่งเป็นพื้นฐานสำหรับการโคลนยีนสีน้ำเงิน / ขาว . เอนไซม์นี้สามารถแยกสองเปปlacz α lacz Ωและที่ไม่ใช้งานด้วยตัวเอง แต่เมื่อทั้งสองอยู่ด้วยกัน ได้รวมกันอีกครั้งเป็นเอนไซม์หน้าที่ คุณสมบัตินี้จะใช้ประโยชน์ในเวกเตอร์โคลนมากมายซึ่งการปรากฏตัวของยีน lacz αในพลาสมิดที่สามารถเติมเต็มในทรานส์ยีนที่กลายพันธุ์อื่นΩ lacz เฉพาะในปฏิบัติการสายพันธุ์ของเชื้อ อีโคไล อย่างไรก็ตามเมื่อชิ้นส่วนดีเอ็นเอจะถูกแทรกลงในเวกเตอร์ , การผลิต lacz αกระจัดกระจาย เซลล์จึงไม่แสดงกิจกรรมบีตา - galactosidase การแสดงตนหรือการขาดบีตา - ปราดเปรียว galactosidase อาจถูกตรวจพบโดย x-gal ซึ่งก่อให้เกิดลักษณะสีฟ้าย้อมของบีตา - galactosidase จาก ,จึงให้ง่ายวิธีการแยกการแสดงตนหรือขาดของตัวผลิตภัณฑ์ในพลาสมิด

ในปี 1995 dimri et al . เสนอไอโซฟอร์มใหม่สำหรับเบต้า galactosidase กิจกรรมสูงสุดที่ pH 6.0 ( การเสื่อมสภาพที่เกี่ยวข้องหรือซาเบต้าเบต้าแกลลอนแกลลอน ) [ 2 ] ซึ่งจะแสดงเฉพาะในการชราภาพ ( สนับสนุนการเจริญเติบโตจับเซลล์ )เฉพาะเชิงปริมาณ ) ถูกพัฒนาสำหรับการตรวจสอบ . [ 3 ] [ 4 ] [ 5 ] แต่ขณะนี้ทราบว่า นี้คือเนื่องจากมี overexpression และการสะสมของ lysosomal galactosidase เบต้าภายนอก [ 6 ] และการแสดงออกที่ไม่ต้องเกิด แต่ก็ยังคงใช้กันอย่างแพร่หลายไบโอมาร์คเกอร์สำหรับชราภาพอายุเซลล์ เพราะเป็นที่เชื่อถือได้และง่ายในการตรวจสอบ