This technique is based upon the polymorphic nature of restriction enzyme digestion sites within a defined genetic region. RFLP involves restriction digestion of the chromosomal DNA followed by southern blotting for detection of specific genetic loci. Whole chromosomal DNA is restriction digested, fragments are then separated on agarose-ge1 and transferred on to the nitrocellular / nylon membrane (Sambrook et al., 1989). The DNA fragments immobilized on the membrane are then hybridized with one or more labeled probes. Only the genomic DNA fragments, which will have specificity for the probe, will be detected, simplifying the restriction endonuclease analysis greatly. This differentiates the strains as the position and length of target sequences will vary in the fragments of different isolates. RFLP has been used to subtype Brucella sp. (Grimont et al., 1992), Legionella pneumophila (Tram et al., l990), Pseudomonas (Loutit et al., l99l), Mycobacterium tuberculosis (van Embden et al., 1993). Ribotyping is also a form of RFLP typing in which the probe’s target is in a multicopy operon i.e. the rrn operon.
เทคนิคนี้เป็นไปตามธรรมชาติ polymorphic ของไซต์ย่อยอาหารเอนไซม์จำกัดภายในภูมิภาคพันธุกรรมกำหนด RFLP เกี่ยวข้องกับข้อจำกัดในการย่อยอาหารของ DNA ของโครโมโซมที่ตามใต้ blotting วิธีตรวจ loci เฉพาะทางพันธุกรรม ดีเอ็นเอทั้งหมดของโครโมโซมคือ ข้อจำกัดเจ่า มีแล้วแยกจากกันใน agarose ge1 และโอนย้ายไป nitrocellular / ไนลอนเมมเบรน (Sambrook et al., 1989) ชิ้นส่วนดีเอ็นเอที่ตรึงบนเมมเบรนมีแล้วเป็นกับอย่าง น้อยหนึ่งคลิปปากตะเข้ป้าย เฉพาะ genomic DNA ชิ้นส่วน ซึ่งจะมี specificity ในการโพรบ จะพบ ให้วิเคราะห์ endonuclease จำกัดมากขึ้น นี้แตกต่างสายพันธุ์ที่เป็นตำแหน่ง และความยาวของลำดับเป้าหมายจะแตกต่างกันในการกระจายตัวของการแตกแยก มีการใช้ RFLP จะ Brucella sp. (Grimont et al., 1992), Legionella pneumophila (ราง et al., l990), ชนิดย่อยลี (Loutit et al., l99l) มัยโคแบคทีเรียวัณโรค (van Embden et al., 1993) Ribotyping เป็นแบบฟอร์มของ RFLP พิมพ์ซึ่งเป้าหมายของโพรบอยู่ใน multicopy operon เช่น rrn operon
การแปล กรุณารอสักครู่..

เทคนิคนี้จะขึ้นอยู่กับลักษณะของเอนไซม์ย่อยอาหารที่มีเว็บไซต์ภายในกำหนดทางพันธุกรรม ) : ข้อ จำกัด ที่เกี่ยวข้องกับการย่อยอาหารของโครโมโซม ดีเอ็นเอ รองลงมา คือ ภาคใต้ การตรวจหาความผิดปกติของโปรตีน . โครโมโซมดีเอ็นเอทั้งหมดคือการเข้าใจเศษแล้วแยกบน agarose-ge1 และโอนไปยังเยื่อ nitrocellular / ไนล่อน ( sambrook et al . , 1989 ) มีชิ้นส่วนดีเอ็นเอที่ถูกตรึงบนเยื่อแผ่นแล้ว ) กับหนึ่งหรือมากกว่าข้อความเครื่องมือตรวจสอบ แต่จีโนมดีเอ็นเอ ซึ่งมีความจำเพาะด้วย จะต้องตรวจ ลการตัดด้วยเอนไซม์ตัดจำเพาะการวิเคราะห์อย่างมากนี้เป็นสายพันธุ์ที่เป็นตำแหน่งและความยาวของยีนเป้าหมายจะแตกต่างกันในชิ้นส่วนที่แตกต่างกันของเชื้อ : มีการใช้ทั้งบรูเซลลา sp . ( grimont et al . , 1992 ) , ลีจิโอเนลลา pneumophila ( รถราง et al . , l990 ) , Pseudomonas ( loutit et al . , l99l ) , เชื้อวัณโรค ( รถตู้ embden et al . , 1993 )ribotyping ยังเป็นรูปแบบของ RFLP ในการพิมพ์ ซึ่งเป้าหมายของโพรบใน multicopy โอเปอรอน เช่น rrn โอเปอรอน .
การแปล กรุณารอสักครู่..
