cell lines employing the colorimetric method .
Adriamycin was used as the reference substance which exhibits activity
against KB and HeLa cell lines. The 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-
diphenyl-tetrazolium bromide (Sigma Chemical Co., USA) was dis-
solved in saline to make a 5 mg/mL stock solution. Cancer cells
(3 × 103 cells) suspended in 100 μg/wells of MEM medium containing
10% fetal calf serum (FCS, Gibco BRL, Life Technologies, NY, USA) were
seeded onto a 96-well culture plate (Costar, Corning Incorporated, NY
14831, USA). After 24 h pre-incubation at 37 °C in a humidified atmo-
sphere of 5% CO2/95% air to allow cellular attachment, various concen-
trations of test solution (10 μL/well) were added and these were then
incubated for 48 h under the above conditions. At the end of the incuba-
tion, 10 μL of tetrazolium reagent was added into each well followed by
further incubation at 37 °C for 4 h. The supernatant was decanted, and
DMSO (100 μL/well) was added to allow Formosan solubilization. The
optical density (OD) of each well was detected using a microplate
cell lines employing the colorimetric method .Adriamycin was used as the reference substance which exhibits activityagainst KB and HeLa cell lines. The 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide (Sigma Chemical Co., USA) was dis-solved in saline to make a 5 mg/mL stock solution. Cancer cells(3 × 103 cells) suspended in 100 μg/wells of MEM medium containing10% fetal calf serum (FCS, Gibco BRL, Life Technologies, NY, USA) wereseeded onto a 96-well culture plate (Costar, Corning Incorporated, NY14831, USA). After 24 h pre-incubation at 37 °C in a humidified atmo-sphere of 5% CO2/95% air to allow cellular attachment, various concen-trations of test solution (10 μL/well) were added and these were thenincubated for 48 h under the above conditions. At the end of the incuba-tion, 10 μL of tetrazolium reagent was added into each well followed byfurther incubation at 37 °C for 4 h. The supernatant was decanted, andDMSO (100 μL/well) was added to allow Formosan solubilization. Theoptical density (OD) of each well was detected using a microplate
การแปล กรุณารอสักครู่..
เซลล์จ้างวิธีการสี. Adriamycin ถูกใช้เป็นสารอ้างอิงที่แสดงกิจกรรมกับKB และ HeLa เซลล์ 3 (4,5-dimethylthiazol-2-YL) -2,5- โบรไมด์ diphenyl-tetrazolium (ซิกม่า Chemical Co. , USA) ได้ปรากฏการแก้ไขในน้ำเกลือที่จะทำให้5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรวิธีการแก้ปัญหาสต็อก เซลล์มะเร็ง(3 × 103 เซลล์) ที่ลอยอยู่ใน 100 ไมโครกรัม / หลุมของกลาง MEM ที่มี10% ซีรั่มน่องทารกในครรภ์ (FCS, Gibco BRL เทคโนโลยีชีวิต, นิวยอร์ก, สหรัฐอเมริกา) ได้รับเมล็ดลงบนแผ่นวัฒนธรรม96 หลุม (ดารา, Corning Incorporated , NY 14831, USA) หลังจาก 24 ชั่วโมงก่อนการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสใน atmo- ความชื้นทรงกลมของCO2 5% / 95% ของอากาศที่จะอนุญาตให้สิ่งที่แนบโทรศัพท์มือถือความเข้มข้นต่างๆtrations ของการแก้ปัญหาการทดสอบ (10 ไมโครลิตร / ดี) มีการเพิ่มและสิ่งเหล่านี้แล้วบ่ม48 ชั่วโมงภายใต้เงื่อนไขดังกล่าวข้างต้น ในตอนท้ายของ incuba- การ 10 ไมโครลิตรของสาร tetrazolium ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละตามอย่างดีจากการบ่มเพิ่มเติมได้ที่37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 ชั่วโมง สารละลายถูก decanted และDMSO (100 ไมโครลิตร / ดี) ถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อให้การละลาย Formosan ความหนาแน่นของแสง (OD) ของดีแต่ละคนถูกตรวจพบโดยใช้ไมโคร
การแปล กรุณารอสักครู่..
เซลล์โดยใช้วิธี Colorimetric
ขาวโพลนที่ถูกใช้เป็นสารอ้างอิง ซึ่งมีการจัดแสดงกิจกรรม
ต่อเซลล์ Hela บางครั้ง และเส้น 3 - ( 4,5-dimethylthiazol-2-yl ) - 2 , 5 -
อีเธอร์ tetrazolium โบรไมด์ ( Sigma Chemical Co . , USA ) เป็น dis -
แก้ดินเค็มให้ 5 มก. / มล. และหุ้นโซลูชั่น
เซลล์มะเร็ง ( 3 × 103 เซลล์แขวนลอยใน 100 μกรัม / บ่อขนาดกลางที่มี
แหม่ม10% เซรั่มของลูกวัว ( FCS gibco BRL , เทคโนโลยี , ชีวิต , NY , USA )
เมล็ดลงบนจาน 96 ดีวัฒนธรรม ( COSTAR , Corning Incorporated , NY
14831 , USA ) หลังจาก 24 ชั่วโมงก่อนบ่มที่ 37 ° C ใน humidified atmo -
ทรงกลม 5% CO2 / 95 อากาศเพื่อให้โทรศัพท์มือถือแนบต่าง ๆ concen -
trations ทดสอบโซลูชั่น ( 10 μลิตร ) เพิ่มเหล่านี้แล้ว
บ่มเชื้อเป็นเวลา 48 ชั่วโมงภายใต้เงื่อนไขข้างต้น ในตอนท้ายของ incuba -
tion , 10 μ l tetrazolium รีเอเจนต์ถูกเพิ่มลงในแต่ละหลุม ตามด้วย
เพิ่มเติมบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 4 ชั่วโมง นำกำลังรินและ
DMSO ( 100 μ L / ดี ) คือการเพิ่มการอนุญาตให้ formosan ขณะ
แสงความหนาแน่น ( OD ) ของแต่ละคนก็ถูกตรวจพบใช้พื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย
การแปล กรุณารอสักครู่..