An endospore suspension of B. amylo

An endospore suspension of B. amyloliquefaciens Fad82was prepared
as described earlier (Margosch et al., 2006). Briefly, B. amyloliquefaciens
Fad82 was grown overnight in ST1 broth (Difco, Becton, Dickinson and
Company, Sparks, NV, USA) under aerobic conditions. Aliquots of 100 μL
of the overnight culture were plated onto ST1 agar and supplemented
with MnSO4 (10 mg L−1). Plates were incubated at 37 °C for 14 d.
Formation of endospores by B. amyloliquefaciens was confirmed by
phase-contrast microscopy. The surface of the agar was washed with a
sterile saline solution (0.9%). The obtained solution was centrifuged
(2700 ×g for 20 min), and the precipitate was re-suspended in 3 mL
of saline solution. Centrifugation and re-suspension was repeated five
times. Then, the spore suspension was diluted with the saline solution
to an optical density of 2.0 at 600 nm (OD600). This cell density corresponds
to approximately 109 endospores mL−1 (Hofstetter, 2012).
The endospore suspension was stored at 4 °C until inoculation

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การระงับ endospore amyloliquefaciens B. Fad82was ที่เตรียมไว้เป็นอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Margosch et al. 2006) สั้น ๆ B. amyloliquefaciensFad82 ถูกปลูกค้างคืนในน้ำซุป ST1 (Difco, Becton สัน และบริษัท ประกายไฟ NV สหรัฐอเมริกา) ภายใต้เงื่อนไขแอโรบิก Aliquots ของ 100 μLวัฒนธรรมข้ามคืนชุบลงในวุ้น ST1 และเสริมมี MnSO4 (L−1 10 มิลลิกรัม) แผ่นได้รับการกกที่ 37 ° C สำหรับ 14 dก่อตัวของ endospores โดย B. amyloliquefaciens ยืนยันการกล้องจุลทรรศน์เฟสคอนทราสต์ พื้นผิวของวุ้นได้ล้างด้วยการผ่านการฆ่าเชื้อเกลือ (0.9%) ได้จากการแก้ปัญหาที่ได้รับ(2700 × g 20 นาที), และตะกอนถูกเลื่อนออกไปอีกใน 3 mLของเกลือ หมุนเหวี่ยงและ re-ระงับแก้ไขซ้ำห้าครั้ง จากนั้น ช่วงล่างสปอร์ถูกเจือจาง ด้วยละลายน้ำเกลือการมีความหนาแน่นออปติคอล 2.0 ที่ 600 นาโนเมตร (OD600) ตรงนี้ความหนาแน่นของเซลล์ไปประมาณ 109 endospores mL−1 (Hofstetter, 2012)การระงับ endospore ถูกเก็บที่ 4 ° C จนถึงกักบริเวณ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การระงับ endospore ของ B. amyloliquefaciens Fad82was เตรียม
ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Margosch et al., 2006) สั้น ๆ , B. amyloliquefaciens
Fad82 ปลูกค้างคืนในน้ำซุป ST1 (Difco, Becton ดิกคินสันและ
บริษัท สปาร์ก, NV, USA) ภายใต้เงื่อนไขแอโรบิก aliquots 100 ไมโครลิตร
ของวัฒนธรรมในชั่วข้ามคืนถูกชุบบน ST1 วุ้นและตบท้าย
ด้วย MnSO4 (10 mg L-1) แผ่นถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 14 d.
การก่อตัวของสปอร์บี amyloliquefaciens รับการยืนยันจาก
กล้องจุลทรรศน์เฟสตรงกันข้าม พื้นผิวของวุ้นที่ถูกล้างด้วย
น้ำเกลือปราศจากเชื้อ (0.9%) วิธีการแก้ปัญหาที่ได้มาหมุนเหวี่ยง
(2700 ×กรัมเป็นเวลา 20 นาที) และตะกอนเป็นอีกครั้งที่ลอยอยู่ใน 3 มล
น้ำเกลือ การหมุนเหวี่ยงและ re-ระงับซ้ำห้า
ครั้ง จากนั้นสปอร์แขวนลอยที่ถูกเจือจางด้วยการแก้ปัญหาน้ำเกลือ
เพื่อความหนาแน่นแสงของ 2.0 ที่ 600 นาโนเมตร (OD600) ความหนาแน่นของเซลล์นี้สอดคล้อง
ประมาณ 109 สปอร์ ML-1 (Hofstetter 2012).
ระงับ endospore ถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสจนการฉีดวัคซีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เป็นเอนโดสปอร์ระงับ amyloliquefaciens fad82was เตรียมพ.ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( margosch et al . , 2006 ) สั้น ๆ amyloliquefaciens Bfad82 โตค้างคืนในน้ำซุป st1 ( difco เบคตอนดิกคินสัน , , และบริษัท สปาร์ค เนวาดา สหรัฐอเมริกา ) ภายใต้สภาวะแอโรบิก . เฉยๆของ 100 μ lของวัฒนธรรมในชั่วข้ามคืนเป็นชุบลงบน st1 วุ้น และอาหารกับ mnso4 ( 10 mg L − 1 ) จานถูกบ่มที่ 37 ° C ) 14 .การก่อตัวของนโดสปอร . amyloliquefaciens ได้รับการยืนยันโดยกล้องจุลทรรศน์ตรงกันข้ามเฟส พื้นผิวของวุ้นก็ล้างด้วยหมันน้ำเกลือ ( 0.9% ) นำสารละลายไฟฟ้า( 2 × G 20 นาที ) และเป็นอีกครั้งที่แขวนลอยใน 3 มล.ของน้ำเกลือ ปั่นและช่วงล่างกันห้าครั้ง งั้น สปอร์แขวนลอยเจือจางด้วยสารละลายเกลือมีความหนาแน่นของแสงของ 2.0 ที่ 600 nm ( od600 ) นี้สอดคล้องกับปริมาณความหนาแน่นเซลล์ประมาณ 109 นโดสปอร ml − 1 ( hofstetter , 2012 )เอนโดสปอร์ที่ถูกระงับไว้ที่ 4 ° C จนกระทั่งเชื้อ