ในการเดินในห้องเย็น ในระหว่างกระบวนการสกัดความหนืดของการแก้ปัญหาอย่างมีนัยสำคัญจะเพิ่มขึ้นและของแข็งเป็นของเหลวอัตราส่วน 1:60 (w / v) ถูกนำมาใช้เพื่อให้แน่ใจว่าการเข้าพักการแก้ปัญหาที่มีความหนืดที่เหมาะสมและสามารถขยับจากกวนแม่เหล็ก . โปรตีนต่ำและสกัดสารตกค้างผิวก็จะถูกสกัด ASC ด้วยกรดอะซิติกในน้ำ (0.5 M) สำหรับ 72 ชั่วโมงกับกวนอ่อนโยนต่อเนื่อง หลังจาก tion extrac- ระงับถูกกรองผ่านผ้าชีสคู่พับ นอกจากนี้การกรองที่ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 20,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 60 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียสโดยใช้ ultracentrifuge (Beckman Coulter, Inc, เดนเวอร์, MA, USA) หลังจากนั้นใสที่ถูกเก็บรวบรวมและยัดเยียดให้เกลือออกโดยการเพิ่มโซเดียมคลอไรด์ความเข้มข้นสุดท้ายของ 2.6 M ในการปรากฏตัวของ 0.05 M Tris (hydroxymethyl) ก๊าซมีเทนอะมิโน (pH 7.0) คอลลาเจนตกตะกอนถูกเก็บรวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 20,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 60 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียสและละลายในปริมาณขั้นต่ำที่ 0.5 M กรดอะซิติก วิธีการแก้ปัญหา tant resul- ได้ภายใต้การฟอกเลือด (MW ตัด ~ 12-14 กิโลดาลตัน) กับ 0.1 M กรดอะซิติกเป็นเวลา 48 ชั่วโมงกับการเปลี่ยนแปลงของการแก้ปัญหาทุก 12 ชั่วโมงตามด้วยน้ำกลั่นกับการเปลี่ยนแปลงของน้ำจนกว่าค่า pH เป็นกลางเป็น obtain- เอ็ด วิธีการแก้ปัญหาที่ถูก dialyzed แห้งใช้แช่แข็งแห้ง (Scanvac ปปลอดภัย, Vassingerod, DK-3540 Lynge, เดนมาร์ก) คอลลาเจนที่ได้รับก็จะเรียกว่า ASC และเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสจนการใช้งาน M 1 กรดอะซิติกเป็นเวลา 48 ชั่วโมงกับการเปลี่ยนแปลงของการแก้ปัญหาทุก 12 ชั่วโมงตามด้วยน้ำกลั่นกับการเปลี่ยนแปลงของน้ำจนค่า pH เป็นกลางเป็นเอ็ด obtain- วิธีการแก้ปัญหาที่ถูก dialyzed แห้งใช้แช่แข็งแห้ง (Scanvac ปปลอดภัย, Vassingerod, DK-3540 Lynge, เดนมาร์ก) คอลลาเจนที่ได้รับก็จะเรียกว่า ASC และเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสจนการใช้งาน M 1 กรดอะซิติกเป็นเวลา 48 ชั่วโมงกับการเปลี่ยนแปลงของการแก้ปัญหาทุก 12 ชั่วโมงตามด้วยน้ำกลั่นกับการเปลี่ยนแปลงของน้ำจนค่า pH เป็นกลางเป็นเอ็ด obtain- วิธีการแก้ปัญหาที่ถูก dialyzed แห้งใช้แช่แข็งแห้ง (Scanvac ปปลอดภัย, Vassingerod, DK-3540 Lynge, เดนมาร์ก) คอลลาเจนที่ได้รับก็จะเรียกว่า ASC และเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสจนการใช้งาน
การแปล กรุณารอสักครู่..
