5.3.1 Screening of media to establi

5.3.1 Screening of media to establish optimum initiation of tissue cultures
Before attempting to initiate callus cultures, the literature must be consulted to establish whether there has been a successful callus initiation previously for the species and genotype under consideration. There are only a limited number of genotypes of a crop species that have been cultured successfully. If tissue cultures are required from a species or genotype not previously in culture, then it may be necessary to modify a medium that was used for a related species genotype.

The standard approach would be to start with one of the defined media, foe examble, MS, SH or GB5 (Chapter 4) and experiment by manipulating both the concentration of auxin and cytokinin and the ratio between the two groups of plant growth regulators. The practice is to identify a range of six concentrations of auxin (e.g. 0, 0.1, 0.25, 0.5, 1.0, and 5.0 mg 1^(-1)) and six concentrations of auxin (e.g. 0, 0.1, 0.25, 0.5, 1.0, and 5.0 mg〖 1〗^(-1)) and test them in all thirty six combination produces the optimum development of callus (table 5.1). The range of concentrations will be determined by the concentration of auxin and cytokinin in media used to initiate callus of a related species or genotype. If the response to thest combinations is poor, then other growth regulator combinations will have to be investigated using the same approach.

Each media combination is replicated 10 times since the response is normally quite variable. The response is assessed on a semi quantitative basis by giving the amount of callus production on each explant a score of 1-4. The combination of auxin and cytokinin with the largest score is the one that is the most suitable for callus initiation.

Normally, modifications are only made to the growth regulator composition rather than the other major components or individual
Table5.1. Latin Squara arrangement for testing media combinations of auxin and cytokinin
Cytokinin
conc.mg 〖 1〗^(-1) Auxin
conc.mg 〖 1〗^(-1)
0.0 0.0 0.1 0.25 0.5 1.0 5.0
0.1
0.25
0.5
1.0
5.0
elements. However, in some cultures such as haploid or protoplasts cultures threre may be an alteration to other parts of the medium (see Chapters 8 and 9)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

5.3.1 การคัดกรองของสื่อที่จะสร้างการเริ่มต้นที่ดีที่สุดของวัฒนธรรมเนื้อเยื่อ
ก่อนที่จะพยายามที่จะเริ่มต้นการเพาะเลี้ยงแคลลัส, วรรณกรรมจะต้องมีการปรึกษาหา​​รือในการสร้างไม่ว่าจะได้มีการเริ่มต้นแคลลัสที่ประสบความสำเร็จก่อนหน้านี้สำหรับชนิดและสายพันธุ์ภายใต้การพิจารณา มีเพียงจำนวน จำกัด ของยีนของสายพันธุ์พืชที่ได้รับการเพาะเลี้ยงที่ประสบความสำเร็จเป็นถ้าวัฒนธรรมเนื้อเยื่อจะต้องจากสายพันธุ์หรือสายพันธุ์ไม่ได้ก่อนหน้านี้ในวัฒนธรรมแล้วมันอาจจะเป็นความจำเป็นในการปรับเปลี่ยนสื่อที่ใช้สำหรับการตรวจหาสายพันธุ์ชนิดที่เกี่ยวข้อง.

วิธีการมาตรฐานที่จะเริ่มต้นด้วยหนึ่งของสื่อที่กำหนดศัตรู examble, มิลลิวินาทีดวลจุดโทษหรือ GB5 (บทที่ 4) และการทดสอบโดยการจัดการกับทั้งสองความเข้มข้นของออกซินและไซโตไคนิและอัตราส่วนระหว่างสองกลุ่มของพืชควบคุมการเจริญเติบโต การปฏิบัติคือการระบุช่วงของความเข้มข้นของหกออกซิน (เช่น 0, 0.1, 0.25, 0.5, 1.0, และ 5.0 มิลลิกรัมต่อ 1
(-1)) และความเข้มข้นของหกออกซิน (เช่น 0, 0.1, 0.25, 0.5, 1.0 , และ 5.0 มิลลิกรัม〖〗 1
(-1)) และทดสอบพวกเขาในทุก 36 รวมกันผลิตการพัฒนาที่เหมาะสมของแคลลัส (ตารางที่ 5.1) ช่วงของความเข้มข้นที่จะถูกกำหนดโดยความเข้มข้นของออกซินและไซโตไคนิในสื่อที่ใช้ในการเริ่มต้นของแคลลัสชนิดที่เกี่ยวข้องหรือจีโนไทป์ ถ้าการตอบสนองต่อการผสม thest ไม่ดีจากนั้นชุดควบคุมการเจริญเติบโตอื่น ๆ จะต้องได้รับการตรวจสอบโดยใช้วิธีการเดียวกัน.

แต่ละชุดสื่อถูกจำลองแบบ 10 ครั้งตั้งแต่การตอบสนองเป็นปกติค่อนข้างตัวแปร การตอบสนองที่ได้รับการประเมินบนพื้นฐานเชิงปริมาณกึ่งโดยให้ปริมาณการผลิตแคลลัสในแต่ละชิ้นคะแนน 1-4การรวมกันของออกซินและไซโตไคนิที่มีคะแนนมากที่สุดเป็นหนึ่งที่เหมาะสมที่สุดสำหรับแคลลัสเริ่มต้น.

โดยปกติการปรับเปลี่ยนจะทำเฉพาะกับองค์ประกอบควบคุมการเจริญเติบโตมากกว่าองค์ประกอบอื่น ๆ ที่สำคัญหรือบุคคล
table5.1 จัด squara ละตินสำหรับการรวมการทดสอบสื่อของออกซินและไซโตไคนิ

ไซโตไคนิ conc.mg 〖〗 1
(-1) ออกซิน
conc.mg 〖〗 1
(-1)
00 0.0 0.1 0.25 0.5 1.0 5.0 0.1

0.25

0.5 1.0 5.0

องค์ประกอบ แต่ในวัฒนธรรมบางอย่างเช่นวัฒนธรรมเดี่ยวหรือ protoplasts threre อาจมีการเปลี่ยนแปลงไปยังส่วนอื่น ๆ ของสื่อ (ดูบทที่ 8 และ 9)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

5.3.1 คัดกรองสื่อสร้างเริ่มต้นที่เหมาะสมของเนื้อเยื่อวัฒนธรรม
รับการก่อนที่จะพยายามเริ่มต้นให้วัฒนธรรม วรรณคดีต้องได้พิจารณาสร้างว่า ได้มีการเริ่มต้นให้ประสบความสำเร็จก่อนหน้านี้สำหรับพันธุ์และลักษณะทางพันธุกรรมภายใต้การพิจารณา มีเพียงจำนวนจำกัดของชนิดพืชที่มี cultured เสร็จเรียบร้อยแล้ว ถ้าเนื้อเยื่อวัฒนธรรมจำเป็นจากสายพันธุ์หรือลักษณะทางพันธุกรรมไม่เคยในวัฒนธรรม แล้วอาจจำเป็นต้องปรับเปลี่ยนสื่อที่ใช้สำหรับลักษณะทางพันธุกรรมชนิดที่เกี่ยวข้อง

วิธีมาตรฐานจะเริ่มต้น ด้วยการกำหนดสื่อ ศัตรู examble, MS SH หรือ GB5 (หมวด 4) และทดลอง โดยการจัดการกับทั้งความเข้มข้นที่ของออกซิน และ cytokinin และอัตราส่วนระหว่างสองกลุ่มของหน่วยงานกำกับดูแลการเจริญเติบโตของพืช การปฏิบัติคือการ ระบุช่วงของหกความเข้มข้นของออกซิน (เช่น 1
(-1)) 0, 0.1, 0.25, 0.5, 1.0 และ 5.0 มิลลิกรัมและ 6 ความเข้มข้นของออกซิน (เช่น 0, 0.1, 0.25, 0.5, 1.0 และ 5.0 mg〖 1〗
(-1)) และทดสอบพวกเขาในทั้งหมดสามสิบหกชุดผลิตพัฒนาสูงสุดของแคลลัส (ตาราง 5.1) ช่วงของความเข้มข้นจะถูกกำหนด โดยความเข้มข้นของออกซินและ cytokinin ในสื่อที่ใช้เริ่มต้นแคลลัสของสปีชีส์ที่เกี่ยวข้องหรือลักษณะทางพันธุกรรม ถ้าการตอบสนองต่อชุด thest ไม่ดี จาก นั้นชุดควบคุมอื่น ๆ เจริญเติบโตจะต้องถูกตรวจสอบโดยใช้แบบเดียวกันวิธีการ

แต่ละชุดสื่อถูกจำลองแบบ 10 ครั้งเนื่องจากการตอบสนองเป็นตัวแปรปกติมาก มีประเมินการตอบสนองตามกึ่งเชิงปริมาณ โดยให้คะแนน 1-4 จำนวนผลิตแคลลัสบน explant แต่ละ ออกซินและ cytokinin มีคะแนนมากที่สุดคือที่เหมาะสุดสำหรับการเริ่มต้นให้

ปกติ ปรับเปลี่ยนเท่านั้นขึ้นกับองค์ประกอบควบคุมการเจริญเติบโต แทนส่วนประกอบที่สำคัญอื่น ๆ หรือแต่ละ
Table5.1 Squara ติจัดทดสอบชุดสื่อของออกซินและ cytokinin
Cytokinin
conc.mg 〖 1〗
(-1) Auxin
conc.mg 〖 1〗
(-1)
0.0 0.0 0.1 0.25 0.5 1.0 5.0
0.1
0.25
0.5
1.0
5.0
องค์ประกอบ อย่างไรก็ตาม ในบางวัฒนธรรมเช่นวัฒนธรรม haploid หรือโป threre อาจมีการดัดแปลงไปยังส่วนอื่น ๆ ของสื่อ (ดูบทที่ 8 และ 9)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

5.3.1 คัดกรองของสื่อเพื่อสร้างการเริ่มต้นสูงสุดของวัฒนธรรมเนื้อเยื่อ
ก่อนทำการเริ่มต้นวัฒนธรรม callus วรรณกรรมที่จะต้องหารือเพื่อสร้างไม่ว่าจะมีการเริ่ม callus ประสบความสำเร็จที่ก่อนหน้านี้สำหรับสายพันธุ์และลักษณะสำคัญในขั้นตอนของการพิจารณา มีเพียงจำนวนจำกัด(มหาชน)ที่ของ genotypes ของสายพันธุ์พืชที่มีการเพาะเลี้ยงขึ้นเสร็จสมบูรณ์หากเนื้อเยื่อวัฒนธรรมเป็นที่ต้องการจากที่สายพันธุ์หรือลักษณะสำคัญไม่ได้ก่อนหน้านี้ในวัฒนธรรม,อาจเป็นได้ว่ามีความจำเป็นที่จะต้องแก้ไขที่มีขนาดกลางที่ใช้สำหรับสายพันธุ์ที่เกี่ยวข้องลักษณะสำคัญ.

มาตรฐานวิธีการจะเริ่มต้นด้วยหนึ่งในที่ตั้งไว้มีเดีย,ศัตรู examble , MS ,sh GB หรือ 5 (บทที่ 4 )และการทดลองโดยการจัดการความเข้มข้นของ cytokinin และ auxin และมีอัตราส่วนระหว่างสองกลุ่มของผู้ควบคุมกฎการขยายพันธุ์พืชทั้งสอง. การปฏิบัติหน้าที่คือการระบุช่วงหกความเข้มข้นของ auxin (เช่น 0 0.1 0.25 0.5 1.0 และ 5.0 มก. 1
( - 1 ))และความเข้มข้นของ auxin (เช่น 0 0.1 0.25 0.5 1.0 และ 5.0 mg〖 1 〗
ตามมาตรฐาน( - 1 ))และทำการทดสอบพวกเขาในการรวมกันทั้งหมดสามสิบหกมีการพัฒนาที่เหมาะสมของ callus (ตาราง 5.1 ) ความหลากหลายของความเข้มข้นจะได้รับการกำหนดโดยการระดม cytokinin และ auxin ในสื่อที่ใช้ในการเริ่มต้น callus ของลักษณะสำคัญหรือสายพันธุ์ที่เกี่ยวข้อง ถ้าการตอบสนองเพื่อใช้ร่วมกับ thest เป็นคนยากจนการใช้ร่วมกันแล้วตัวควบคุมการขยายตัวอื่นๆจะต้องได้รับการสอบสวนโดยใช้วิธีเดียวกันกับที่.

การผสมผสานสื่อแต่ละห้องได้รับทำซ้ำ 10 ครั้งตั้งแต่การตอบสนองโดยปกติจะเป็นตัวแปรค่อนข้าง การตอบกลับที่มีการประเมินผลการปฏิบัติบนพื้นฐานในเชิงปริมาณแบบกึ่งโดยให้ปริมาณการผลิต callus บน explant แต่ละคะแนนที่ของ 1-4 1-4 1-4การรวมกันของ cytokinin auxin และมีคะแนนมากที่สุดจะเป็นผู้เล่นที่มากที่สุดคือการเริ่มต้นที่เหมาะสมสำหรับ callus .

ตามปกติการแก้ไขจะทำให้การเขียนตัวควบคุมการขยายตัวได้มากกว่าส่วนประกอบที่สำคัญอีกประการหนึ่งในการที่บุคคลหรือ
โต๊ะ 5.1 เท่านั้น ละติน squara การจัดเตรียมสำหรับการใช้สื่อและการทดสอบของ auxin cytokinin cytokinin

conc .มก.〖 1 〗
( - 1 ) auxin
conc .มก.〖 1 〗
( - 1 )
0 .0 0.0 0.1 0.25 0.5 1.0 5.0 0.1


0.25 0.5

1.0 5.0
องค์ประกอบ. แต่ถึงอย่างไรก็ตามในบางประเทศเช่น haploid หรือวัฒนธรรม protoplasts เก็บกรณีอาจมีการเปลี่ยนแปลงเพื่อไปยังส่วนพื้นที่อื่นๆของขนาดกลาง(ดูที่บท 8 และ 9 )