Material and methods
2.1. Cheese processing
The cheese was processed according to a recently published technology (Gomes, Braga et al., 2011) with some modifications. Fifty liters of pasteurized milk (3.4 g fat/100 L milk, Cooperativa Barra Mansa, Rio de Janeiro, Brazil) was heated to 35 °C and the following additions were made: 0.03 g calcium chloride/100 L milk (Vetec, Rio de Janeiro, Brazil), lactic culture (Lactococcus lactis R-704, Chr Hansen, Valinhos, São Paulo, Brazil, DVS, approximately 6–7 log CFU/g, 0.05 g/L) and probiotic culture (Lactobacillus acidophilus La5 Chr Hansen, Valinhos, São Paulo, Brazil, 8 log CFU/mL). Liquid rennet (1.0 ml/L, HA LA, Chr Hansen, Valinhos, São Paulo, Brazil) was used to coagulate the milk within 40 min. After coagulation, the curd was cut into approximately 2.0 cm cubes, followed by slow agitation for 20 min. The curd was weighed and divided into four equal portions, which were submitted to salting and drying according to the following experimental design: Qc (NaCl, 100%), QI (NaCl/KCl 75/25%), QII (50/50%, NaCl/KCl), and QIII (50/50%, 1% arginine). The salts and arginine (Vetec, Rio de Janeiro, Brasil) concentrations were expressed as g/arginine or salt mixture in relation to the total weight. Then, the cheeses were packed into polyethylene bags and stored at 5 °C for 14 days. The microbiological, physicochemical, and rheological characterizations were carried out after 1, 7, and 14 days of refrigerated storage.
2.2. Microbiological analyses
The samples were prepared by stomaching. For that, 25 g cheese and 225 mL sterile 0.1% w/v peptone water (Oxoid, São Paulo, Brazil) were homogenized, and further dilutions were made. The microbial counts were carried out in duplicate using the pour plate technique. For enumeration of starter Lactococci, the culture medium M17 agar (Oxoid, São Paulo, Brazil) was used, which was incubated at 30 °C for 72 h under aerobic conditions. The enumeration of L. acidophilus LA-5 was performed in duplicate under aerobic conditions using 0.15 w/v% bile salts MRS agar (Oxoid, São Paulo, Brazil), incubated at 37 °C for 72 h ( Gomes, Braga et al., 2011 and Gomes, Cruz et al., 2011). L. acidophilus La-5 counts were determined after exposure to simulated gastrointestinal conditions (acidic pH and exposure to bile salts) ( Fernandes et al., 2013). One gram of cheese was homogenized with 9 mL gastric juice (Vetec, São Paulo, Brazil, 0.2% NaCl, pH 2.0) in test tubes, and incubated at 37 °C for 30 min. One mL of this mixture was then transferred to tubes containing 9 mL of intestinal juice (0.6% bile salts, pH 7.0) and incubated at 37 °C for 60 min to simulate the conditions in the gastrointestinal tract of a healthy individual who had not been fasting for a long time (Mortazavian et al., 2008).
วัสดุและวิธีการ
2.1 การประมวลผลชีส
ชีสที่ได้รับการดำเนินการตามที่เป็นเทคโนโลยีที่เผยแพร่เมื่อเร็ว ๆ (โกเมส, Braga et al. 2011) มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง ห้าสิบลิตรของนมพาสเจอร์ไรส์ (3.4 กรัมไขมันนม / 100 L, Cooperativa Barra Mansa ริโอเดอจาเนโร, บราซิล) ถูกความร้อนถึง 35 องศาเซลเซียสและเพิ่มเติมต่อไปนี้ถูกสร้างขึ้นมา: 0.03 กรัมแคลเซียมคลอไรด์ / 100 L นม (Vetec ริโอเดอ จาเนโร, บราซิล), วัฒนธรรมแลคติก (Lactococcus lactis R-704, Chr แฮนเซน Valinhos, เซาเปาโล, บราซิล, DVS ประมาณ 6-7 log CFU / g, 0.05 กรัม / ลิตร) และวัฒนธรรมโปรไบโอติก (Lactobacillus acidophilus La5 Chr แฮนเซน Valinhos, เซาเปาโลประเทศบราซิล, 8 log CFU / มิลลิลิตร) วัวเหลว (1.0 มล. / L HA LA, Chr แฮนเซน Valinhos, เซาเปาโลประเทศบราซิล) ถูกใช้ในการแข็งตัวนมภายใน 40 นาที หลังจากการแข็งตัวของนมเปรี้ยวที่ถูกตัดเป็นก้อนประมาณ 2.0 ซม. ตามด้วยการกวนช้า 20 นาที นมเปรี้ยวได้รับการชั่งน้ำหนักและแบ่งออกเป็นสี่ส่วนเท่ากันซึ่งถูกส่งไปเกลือและการอบแห้งตามการออกแบบการทดลองต่อไปนี้: QC (โซเดียมคลอไรด์ 100%) ฉี (โซเดียมคลอไรด์ / KCl 75/25%) QII (50/50% , โซเดียมคลอไรด์ / โพแทสเซียมคลอไรด์) และ QIII (50/50% arginine 1%) เกลือและอาร์จินี (Vetec ริโอเดอจาเนโร, บราซิล) ความเข้มข้นแสดงเป็นกรัม / อาร์จินีหรือของผสมเกลือในความสัมพันธ์กับน้ำหนักรวม จากนั้นชีสที่ถูกบรรจุลงในถุงพลาสติกชนิดและเก็บไว้ที่ 5 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 14 วัน จุลชีววิทยา, เคมีกายภาพและสมบัติการไหลได้ดำเนินการหลังวันที่ 1, 7, 14 วันของการจัดเก็บในตู้เย็น
2.2 จุลชีววิทยาวิเคราะห์
ตัวอย่างถูกจัดทำขึ้นโดย stomaching สำหรับที่ 25 กรัมชีสและ 225 มลผ่านการฆ่าเชื้อ 0.1% w / น้ำเปปโตน V (Oxoid, เซาเปาโลประเทศบราซิล) กำลังหดหายและเจือจางเพิ่มเติมได้ทำ นับจุลินทรีย์ได้ดำเนินการในที่ซ้ำกันโดยใช้เทคนิคเทจาน สำหรับการแจงนับเริ่มต้นของ Lactococci, สื่อวัฒนธรรม M17 วุ้น (Oxoid, เซาเปาโลประเทศบราซิล) ถูกนำมาใช้ซึ่งได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชั่วโมงภายใต้เงื่อนไขแอโรบิก แจงนับของ L. acidophilus LA-5 ได้รับการดำเนินการในที่ซ้ำกันภายใต้เงื่อนไขการใช้แอโรบิก 0.15 w / v% เกลือน้ำดี MRS agar (Oxoid, เซาเปาโลประเทศบราซิล) บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชั่วโมง (โกเมส, บรากา, et al 2011 และเมสครูซ et al. 2011) L. acidophilus La-5 นับได้รับการพิจารณาหลังจากที่สัมผัสกับเงื่อนไขทางเดินอาหารจำลอง (pH เป็นกรดและการสัมผัสกับเกลือน้ำดี) (เฟอร์นันเด et al., 2013) หนึ่งกรัมของชีสทำให้เป็นเนื้อเดียวกันกับ 9 มลน้ำย่อย (Vetec, เซาเปาโล, บราซิล, 0.2% โซเดียมคลอไรด์มีค่า pH 2.0) ในหลอดทดลองและบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที หนึ่งมิลลิลิตรผสมนี้นั้นก็ย้ายไปหลอดที่มี 9 มิลลิลิตรของน้ำในลำไส้ (0.6% เกลือน้ำดีมีค่า pH 7.0) และบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 นาทีเพื่อจำลองสภาพในระบบทางเดินอาหารของบุคคลที่มีสุขภาพดีที่ไม่ได้รับการ การอดอาหารเป็นเวลานาน (Mortazavian et al., 2008)
การแปล กรุณารอสักครู่..

วัสดุและวิธีการ2.1 . การประมวลผลของชีสชีสถูกประมวลผลตามเมื่อไม่นานมานี้ เทคโนโลยี ( โกเมส บราก้า , et al . , 2011 ) ที่มีการปรับเปลี่ยน 50 ลิตรของนมพาสเจอร์ไรส์ ( 3.4 ลิตร / 100 กรัมไขมันนม โคโอเปอเรติวา Barra Mansa , ริโอ เดอ จาเนโร ประเทศบราซิล ) ก็ร้อนถึง 35 องศา C และเพิ่มต่อไปนี้เกิดขึ้น : 0.03 กรัม แคลเซียม คลอไรด์ / 100 ลิตรนม ( vetec Rio de Janeiro บราซิล ) , วัฒนธรรมติก ( แลคโตค คัส r-704 Chr lactis , แฮนเซน valinhos , , เซาเปาลู , บราซิล , DVS , ประมาณ 6 – 7 log CFU / g , 0.05 กรัม / ลิตร ) และ โปรไบโอติก ( Lactobacillus acidophilus วัฒนธรรม la5 Chr valinhos แฮนเซน , , เซาเปาลู , บราซิล , 8 log CFU / ml ) เรนเนทของเหลว ( 1.0 มล. / ลิตร ฮา ลา คุณแฮนเซ่น valinhos เซาเปาลู , บราซิล ) ถูกใช้ในการจับตัวนมภายใน 40 นาที หลังการตกตะกอน , เต้าหู้ หั่นประมาณ 2.0 ซม. ก้อน ตามด้วยการกวนช้า 20 นาทีแล้วยังหนักแบ่งออกเป็นสี่ส่วนเท่ากัน ซึ่ง ได้ถูกส่งไปยังเกลือและแห้งตามการทดลอง : QC ( NaCl 100 % ) , ฉี ( NaCl / . 75 / 25 % ) qii ( 50 / 50 % NaCl / โพแทสเซียม ) และ qiii ( 50 / 50 % 1% อาร์ ) เกลือ และอาร์จินีน ( vetec Rio de Janeiro บราซิล ) โดยมีแสดงเป็น g / อาร์ หรือผสมเกลือในความสัมพันธ์กับน้ำหนักรวม แล้ว ชีสถูกบรรจุใส่ถุงพลาสติกและเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 5 องศา C เป็นเวลา 14 วัน ด้านจุลินทรีย์ เคมีฟิสิกส์และไหล characterizations ทดลองหลัง 1 , 7 , และตู้เย็นกระเป๋า 14 วัน2.2 . การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาตัวอย่างที่เตรียมโดย stomaching . ที่ 25 กรัมชีสและ 225 ml เป็นหมัน 0.1 % W / V ( oxoid เปปโตนน้ำ , เซาเปาลู , บราซิล ) เป็นโฮโม และวิธีการเพิ่มเติมได้ นับจากได้ทดลองซ้ำโดยใช้เทคนิคในเทมเพลท สำหรับการเริ่มต้นแลกโตค ไค วัฒนธรรมกลาง ( oxoid m17 , เซาเปาลู , บราซิล ) ถูกนำมาใช้ ซึ่งถูกบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศา C เป็นเวลา 72 ชั่วโมง ภายใต้สภาวะแอโรบิก . การแจงนับของ L . acidophilus la-5 ในการปฏิบัติซ้ำภายใต้สภาวะแอโรบิกใช้ 0.15 W / V % น้ำดีเกลือ MRS agar ( oxoid เซาเปาลู , บราซิล ) , บ่มที่ 37 องศา C เป็นเวลา 72 ชั่วโมง ( โกเมส บราก้า , et al . , 2011 และ Gomes ครูซ et al . , 2011 ) L . acidophilus la-5 ครั้งถูกกำหนดหลังจากการจำลองสภาพ pH เป็นกรดในทางเดินอาหาร และการสัมผัสกับเกลือน้ำดี ) ( Fernandes et al . , 2013 ) หนึ่งกรัมของชีสมันบดกับน้ำ 9 ml ( vetec กระเพาะอาหาร , เซาเปาลู , บราซิล , 0.2 % NaCl , pH 2.0 ) ในหลอดทดลอง และบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 30 นาที หนึ่งมิลลิลิตร ผสมนี้ถูกโอนให้กับหลอดที่มี 9 ml ของน้ำย่อยในลำไส้ ( 0.6% น้ำดีเกลือ อ 7.0 ) และบ่มที่ 37 องศา C นาน 60 นาที เพื่อจำลองสภาพในระบบทางเดินอาหารของแต่ละคนมีสุขภาพดีที่ไม่ได้อดอาหารเป็นเวลานาน ( mortazavian et al . , 2008 )
การแปล กรุณารอสักครู่..
