To isolate efficient PHs-degrading

To isolate efficient PHs-degrading bacteria and filamentous
fungi, the method described by Mukherjee and Das (2005) was
adopted. Briefly, 1.0 g of crude oil-contaminated soil was mixed
with 100 ml of modified M9 medium (6.4 g Na2HPO4.7H2O; 1.5 g
KH2PO4; 0.25 g NaCl; 0.5 g NH4Cl; 0.2 ml of 1 M MgSO4; 10 mL of 1 M
CaCl2; final volume adjusted to 100 ml with distilled water) containing
1% (v/v) diesel in a 250 ml Erlenmeyer flask, incubated at
37
C in an orbital shaker (200 rpm). We used diesel because it is a
well-known soil pollutant with less volatility and abundant
amounts of readily degradable hydrocarbons (Van De Steene et al.,
2007; Kang et al., 2009; Maddela et al., 2015). An aliquot of 0.1 ml of
suspension was spread onto nutrient agar medium (N9405 Fluka),
and incubated at 37
C for 4 d. Morphologically, six predominant
bacteria were selected, and axenic cultures were developed by
repeated subculturing on agar slopes. These isolates were incubated
individually at 37
C in minimal salts medium supplemented
with 1% diesel to test for their capabilities in degrading PHs. In
order to isolate PHs-degrading filamentous fungi, 1.0 g of soil
sample was homogeneously mixed with 0.1 ml of Tween-80 (Sigma
Aldrich), a loopful of this sample was sprinkled on Sabouraud
dextrose agar (SDA) plates (Fluka) and the plates were incubated at
28
C for 5 d. Three distinct cultures were subcultured onto fresh
SDA plates to obtain pure cultures, and screened for their PHsdegrading
abilities following modified method proposed by
Hanson et al. (1993). Finally, two isolates each of bacteria and fungi
(Fig. 1a), efficient in degrading PHs in diesel were preserved
at 80
C using 25% (v/v) glycerol.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การแยกแบคทีเรียย่อยสลาย PHs ประสิทธิภาพ และด้ายเชื้อรา วิธีการอธิบาย โดย Mukherjee และ Das (2005) ได้นำมาใช้ สั้น ๆ 1.0 กรัมของดินที่ปนเปื้อนน้ำมันดิบถูกผสมกับ 100 มิลลิลิตรสารแก้ไข M9 (6.4 กรัม Na2HPO4.7H2O; 1.5 gKH2PO4 0.25 กรัม NaCl 0.5 กรัม NH4Cl 1 M MgSO4; 0.2 มิลลิลิตร 10 มิลลิลิตรของ 1 เมตรCaCl2 ที่ประกอบด้วยปริมาตรสุดท้ายปรับเป็น 100 มิลลิลิตรด้วยน้ำกลั่น)ดีเซล 1% (v/v) 250 ml Erlenmeyer กระติกน้ำ รับการกกที่C 37 ในการปั่นของวงโคจร (200 rpm) เราใช้เครื่องยนต์ดีเซลเพราะมีมลพิษดินรู้จัก มีความผันผวนน้อยลง และอุดมสมบูรณ์จำนวนเงินพร้อมย่อยสลายสารไฮโดรคาร์บอน (Van De Steene et al.,2007 Kang et al. 2009 Maddela et al. 2015) ส่วนลงตัวของ 0.1 มิลลิลิตรระงับการแพร่กระจายไปบนอาหารวุ้นขนาดกลาง (N9405 Fluka),และรับการกกที่ 37 C สำหรับ 4 d. หก Morphologically ที่โดดเด่นแบคทีเรียที่ถูกเลือก และวัฒนธรรม axenic ถูกพัฒนาโดยซ้ำ subculturing บนเนินวุ้น แยกเหล่านี้ได้รับการกกมีเอกลักษณ์ที่ 37 C น้อยที่สุดในเกลือเสริมกลางด้วยเครื่องยนต์ดีเซล 1% การทดสอบความสามารถในการย่อยสลาย PHs. ในสั่งแยกย่อยสลาย PHs ด้ายเชื้อ 1.0 กรัมของดินตัวอย่างถูกผสมกับ 0.1 มล.ของโลก-80 (Sigma homogeneouslyAldrich), loopful อย่างนี้คือโรยบน Sabouraudแผ่นวุ้น (SDA) เดกซ์โทรส (Fluka) และแผ่นได้รับการกกที่28 C สำหรับ 5 d สามวัฒนธรรมถูก subcultured ไปยังสดSDA แผ่นรับวัฒนธรรมบริสุทธิ์ และผ่านตรวจ PHsdegrading ของพวกเขาความสามารถดังต่อไปนี้แก้ไขวิธีที่เสนอโดยแฮนสัน et al. (1993) ในที่สุด สองแยกเชื้อแบคทีเรียและเชื้อรา(รูปที่ 1a), PHs ในดีเซลมีประสิทธิภาพในการย่อยสลายได้ถูกรักษาไว้ที่ 80 C ที่ใช้กลีเซอรอล 25% (v/v)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อแยก PHS ย่อยสลายที่มีประสิทธิภาพแบคทีเรียและเส้นใย
เชื้อราวิธีการอธิบายโดยเคอและดาส (2005) ถูก
นำมาใช้ สั้น ๆ , 1.0 กรัมของดินที่ปนเปื้อนน้ำมันดิบผสม
กับ 100 มล. ของกลาง M9 ปรับเปลี่ยน (6.4 กรัม Na2HPO4.7H2O 1.5 กรัม
KH2PO4; 0.25 กรัมโซเดียมคลอไรด์ 0.5 กรัม NH4Cl; 0.2 มล. 1 เมตร MgSO4 10 มล 1 เมตร
CaCl2; เล่มสุดท้ายปรับ 100 มล. ด้วยน้ำกลั่น) ที่มี
1% (v / v) ดีเซลใน 250 มล Erlenmeyer ขวดบ่มที่อุณหภูมิ
37 องศาเซลเซียสในเครื่องปั่นโคจร (200 รอบต่อนาที) เราใช้ดีเซลเพราะมันเป็น
มลพิษดินที่รู้จักกันดีมีความผันผวนน้อยลงและความอุดมสมบูรณ์
ปริมาณของสารไฮโดรคาร์บอนที่ย่อยสลายได้อย่างง่ายดาย (Van De Steene, et al.,
2007; Kang et al, 2009;.. Maddela et al, 2015) หาร 0.1 มิลลิลิตร
ระงับกระจายลงบนสื่อสารอาหารวุ้น (N9405 Fluka)
และบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 D morphologically หกเด่น
แบคทีเรียที่ได้รับการคัดเลือกและวัฒนธรรม axenic ได้รับการพัฒนาโดยการ
ถ่ายเชื้อซ้ำวุ้นอยู่บนเนินเขา สายพันธุ์เหล่านี้ถูกบ่ม
ทีละ 37 องศาเซลเซียสในเกลือน้อยเสริมกลาง
กับน้ำมันดีเซล 1% เพื่อทดสอบความสามารถของตนในการย่อยสลาย PHS ใน
การสั่งซื้อเพื่อแยก PHS ย่อยสลายเชื้อรา 1.0 กรัมของดิน
ตัวอย่างผสมเป็นเนื้อเดียวกันกับ 0.1 มิลลิลิตร Tween-80 (ซิกม่า
ดิช) ซึ่งเป็น loopful ของตัวอย่างนี้ถูกโรยบน Sabouraud
dextrose agar (SDA) แผ่น (Fluka) และ แผ่นถูกบ่มที่
28 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 D สามวัฒนธรรมที่แตกต่างกันได้รับการเลี้ยงบนสด
แผ่น SDA ที่จะได้รับเชื้อบริสุทธิ์และการตรวจคัดกรอง PHsdegrading ของพวกเขา
มีความสามารถดังต่อไปนี้วิธีการแก้ไขที่เสนอโดย
แฮนสัน, et al (1993) ในที่สุดทั้งสองแยกแต่ละเชื้อแบคทีเรียและเชื้อรา
(รูป. 1A) มีประสิทธิภาพในการย่อยสลาย PHS ในน้ำมันดีเซลถูกเก็บรักษาไว้
ที่ 80 องศาเซลเซียสโดยใช้ 25% (v / v) กลีเซอรอล