2.6. Generation of quantification s

2.6. Generation of quantification standards
A fragment of 348 bp of M gene of PPRV contain-ing the real time RT-PCR primers binding sites wereamplified using the primer pair M4F (forward primer): 5-CCAGGTAAGGGTCATCGATCC-3(99–119) and M4R (reverseprimer): 5-AAGCGGGACTAGGTTGACTGCA-3(426–447) (In housedesigned). The RT-PCR product was cloned into T&A cloningvector according to the manufacturer’s instructions. Plasmid DNAwas recovered from the transformed Escherichia coli BL-21 cellsusing AxyPrep Plasmid Miniprep Kit (Axygen Biosciences). TheOD value of the plasmid DNA standard concentrations was mea-sured at 260 nm/280 nm on Thermo Scientific NanoDropTM1000Spectrophotometer (NanoDrop Technologies, LLC, Wilmington,DE, USA). Plasmid copy number was calculated using the for-mula described by Adams (2006). The concentration of theobtained plasmid DNA was 95 ng/l which equates 2.88 × 1010copies/l.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6 การสร้างนับมาตรฐานส่วนของ 348 bp ของยีน M ของ PPRV ประกอบด้วย-ing M4F คู่ไพรเมอร์ RT-PCR ที่ผูก wereamplified เว็บไซต์ที่ใช้รองพื้นแบบเวลาจริง (รองพื้นไปข้างหน้า): 5 - CCAGGTAAGGGTCATCGATCC-3 (99 – 119) และ M4R (reverseprimer): 5 - AAGCGGGACTAGGTTGACTGCA-3 (426-447) (ใน housedesigned) ผลิตภัณฑ์ RT-PCR ถูกโคลนเป็น T และ cloningvector ตามคำแนะนำของผู้ผลิต Plasmid DNAwas กู้คืนจากการแปรรูป Escherichia coli BL-21 cellsusing AxyPrep Plasmid Miniprep ชุด (เวลาออก Axygen) ค่า TheOD ที่ plasmid DNA มาตรฐานความเข้มข้นได้หลากหลาย สถานที่ 260 nm/nm 280 ในเทอร์โม NanoDropTM1000Spectrophotometer วิทยาศาสตร์ (เทคโนโลยี NanoDrop, LLC วิลมิ DE สหรัฐอเมริกา) จำนวนสำเนา plasmid ถูกคำนวณโดยใช้การสำหรับ-mula โดย Adams (2006) ความเข้มข้นของ theobtained plasmid DNA ถูก 95 ng / l ซึ่งเท่า 2.88 × 1010copies / l

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 การสร้างมาตรฐานปริมาณ
ส่วนของ 348 bp ของยีน M ของ PPRV มีไอเอ็นจีเรียลไทม์ไพร RT-PCR ผูกพันเว็บไซต์ wereamplified ใช้คู่ไพร M4F (ไพรเมอร์ไปข้างหน้า)? 5 -CCAGGTAAGGGTCATCGATCC-3 (99-119) และ M4R (reverseprimer): 5 -AAGCGGGACTAGGTTGACTGCA-3 (426-447) (ใน housedesigned)? สินค้า RT-PCR เป็นโคลนเป็น T & cloningvector ตามคำแนะนำของผู้ผลิต พลาสมิด DNAwas หายจากการเปลี่ยน Escherichia coli BL-21 cellsusing AxyPrep พลาสมิด miniprep Kit (Axygen Biosciences) ค่า Theod ของพลาสมิดดีเอ็นเอมาตรฐานความเข้มข้นของกฟน. ได้รับการ-sured ที่ 260 นาโนเมตร / 280 นาโนเมตรบนเทอร์โมวิทยาศาสตร์ NanoDropTM1000Spectrophotometer (NanoDrop Technologies, LLC, Wilmington, DE, USA) จำนวนสำเนาพลาสมิดที่คำนวณโดยใช้สำหรับ Mula อธิบายโดยอดัมส์ (2006) ความเข้มข้นของพลาสมิดดีเอ็นเอ theobtained 95 ng /? ลิตรซึ่งเท่ากับ 2.88 × 1010copies /? ลิตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 รุ่นมาตรฐานปริมาณ
ส่วนของ 348 BP ของ M ของยีน pprv ประกอบด้วยอิงเวลาจริงบนเว็บไซต์นี้รวม wereamplified โดยใช้ไพรเมอร์คู่ m4f ( forward primer ) : 5  - ccaggtaagggtcatcgatcc-3  ( 99 ( 119 ) และเพลง ( reverseprimer ) : 5  - aagcgggactaggttgactgca-3  ( 426 ( 555 ) ( housedesigned )สินค้านี้ถูกโคลนเข้า T &เป็นโคลนนิ่งเวคเตอร์ตามคำแนะนำของผู้ผลิต พลาสมิด dnawas หายจากแปลง Escherichia coli bl-21 cellsusing ชุด miniprep พลาส axyprep ( axygen Biosciences ) ค่า theod ของพลาสมิดดีเอ็นเอมาตรฐานความเข้มข้นคือการไฟฟ้านครหลวง แน่นอนว่าที่ 260 nm / 280 nm ใน nanodroptm1000spectrophotometer วิทยาศาสตร์ ( เทคโนโลยี nanodrop เทอร์โม ,LLC , Wilmington , DE , USA ) จำนวนสำเนาพลาสมิดที่ใช้สำหรับอธิบาย โดยคำนวณจากอดัมส์ ( 2006 ) ความเข้มข้นของพลาสมิดดีเอ็นเอนำ 95 ng /  L ซึ่งเท่ากับ 2.88 × 1010copies /  L