2. Materials and methods
2.1. Reagents and standards
ABTS, (+)-catechin, DPPH, Folin–Ciocalteu’s phenol reagent, and
gallic acid were purchased from Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO,
USA). Ascorbic acid was obtained from Fisher Scientific (Fair Lawn,
NJ, USA). 2,2-Azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride was
purchased from Wako Chemicals Inc. (Richmond, VA, USA). All
chemicals used were of analytical grade. Standard solutions were
prepared with distilled deionized water.
2.2. Selection of food samples
To cover a variety of antioxidant-rich foods that are widely
consumed in the US, the top 100 foods in terms of (1) antioxidant
content and (2) amount of consumption were identified. Therefore,
the National Health and Nutrition Examination Survey (NHANES)
1999–2000 and 2001–2002 datasets (NCHS, 2002, 2004) were
linked to the USDA flavonoid, isoflavone and proanthocyanidin
databases and the USDA database for standard references
(AgricResServ, 2004, 2005, 2007a, 2008). A total of 8809
individuals aged >19 years who had completed a 24-h dietary
recall (24-h DR) and provided information on antioxidant
supplement use were included in this preliminary study (Chun
et al., 2007). Antioxidant content of each food was multiplied by
the average amount of consumption of this food in the US
population and food items were ranked according to their
contribution to antioxidant intake in this population.
From the top 100 foods, the 50 fruits, vegetables and beverages
that contribute most to antioxidant intake in the US were
identified. For fruits and vegetables, raw foods were included
and prepared foods were excluded, such as ‘chili con carne with
beans’. Four exceptions of processed liquid foods were included:
‘tomato catsup’; ‘canned pinto beans’; ‘canned red kidney beans’;
and ‘canned cranberries’, because they were convenient to analyze.
‘White potato chips’ and ‘white potato home fries’ were previously
excluded. Instead, their shared ingredient, ‘raw potato’, was
included on the list. Tea was split into three items on the final
list: ‘black tea, caffeinated’, ‘green tea, caffeinated’ and ‘green tea,
decaffeinated.’ Any beverages that were enriched with vitamin C
were excluded, except for grape juice because it was the only kind
available in the supermarket. For all juices, ‘pure juice’ or ‘100%
from concentrate’ and ‘no pulp’ was selected for analysis.
2.3. Sample collection and preparation
All foods and beverages were purchased fresh at local supermarkets
or liquor stores in Tolland and Mansfield, CT, and were
stored in the fridge until extraction up to three days. For each food
item, a diverse sample was obtained, including three different
brands per food which was possible for 60% of the sample. For 40%
of the sample only two or one brands were available at the
supermarket. At least three pieces of each brand were collected. If
available, one organic brand was included for analysis. Apples, for
example, 2 kg of each brand ‘Gala Washington’, ‘Empire NY’ and
‘McIntosh’ were purchased. Similar for beverages, 3 brands and at
least 1 L per brand for each drink were included into the analysis.
Orange juice, for example, 2 L of each ‘Florida’s Natural’, ‘Tropicana’
and ‘Simply Orange’, were collected. Fruits and vegetables were
washed with tap water, dried and chopped. Different brands of one
item were mixed, weighed and extracted. For the hot beverages,
2 g tea or coffee were brewed with 150 mL boiling tap water for
2 min. Different brands were mixed and analyzed after cooling to
room temperature. Cold beverages were mixed, weighed and
analyzed immediately. Drink from powder was prepared according
to instructions on the package and analyzed immediately.
2.4. Sample extraction
Samples were extracted with methanol (Kim et al., 2003).
Briefly, chopped fresh samples (50 g) were mixed with 100 mL
absolute methanol and blended for 2 min under nitrogen gas using
the Waring Laboratory Blender LB10 (Waring Laboratory, Torrington,
CT, USA). The mixture was then filtered through Whatman #2
filter paper (Whatman International Limited, Maidstone, UK) with
a chilled Bu¨ chner funnel and rinsed with additional methanol. The
first extract obtained was stored in a 20 8C freezer. The solid filter
cake was resolved in 100 mL of 80% (v/v) methanol, blended for
2 min and filtered again (second extract). Both extracts were
combined and the solvent evaporated using a rotary evaporator
under reduced pressure at 45 8C. The extract of about 40 mL was
dissolved with additional 50 mL absolute methanol and made up
to a total volume of 100 mL with distilled deionized water. For each
food item, extraction was done in triplicate. Extracts were stored at
20 8C until analysis up to three days.
2.5. Measurement of antioxidant capacity expressed as vitamin C
equivalents
Antioxidant capacity analysis was performed immediately for
beverages or within one to three days for food extracts. For both
ABTS and DPPH assays, samples were diluted appropriately with
50% (v/v) methanol. Ascorbic acid was used as an antioxidant
standard.
The ABTS assay was based on the method of van den Berg et al.
(1999) slightly modified by Kim et al. (2003). Briefly, 2.5 mM of
ABTS was mixed with 1 mM of 2,2-azobis(2-amidinopropane)
dihydrochloride in 10 mM phosphate buffered saline (PBS) solution,
pH 7.4. The mixture was heated in a water bath at 68 8C for 40 min.
The blue-green ABTS+ solution was cooled to room temperature,
filtered through nylon syringe filters, and diluted with fresh PBS
buffer until absorbance of 0.650 0.020 at 734 nm. Then, 20 mL of
vitamin C standard or sample were mixed with 980 mL of ABTS+
solution and incubated for 10 min in 37 8C water bath. The decrease of
absorbance was monitored at 734 nm after 10 min. A control consisted
either of 20 mL of acidified distilled deionized water in 980 mL of radical
solution for vitamin C standard or 50% (v/v) methanol in 980 mL of
radical solution for samples. The coefficient of variation (CV) for ABTS
assay was found to be 4.72% within day (n = 10).
The DPPH assay was performed according to the method
developed by Brand-Williams et al. (1995) slightly modified by
Kim et al. (2002). A solution of 1 mM DPPH in 80% (v/v) methanol
was stirred for 40 min. Absorbance of the solution was adjusted to
0.650 0.020 at 517 nm using fresh 80% (v/v) methanol. Then, 50 mL
of standard or sample were mixed with 2.95 mL of DPPH solution and
incubated for 30 min in the dark covered with aluminum foil.
Decrease of absorbance was monitored at 517 nm at 30 min. A control
consisted either of 50 mL of acidified distilled deionized water in
2.95 mL of DPPH solution for vitamin C standard or 50 mL of 50% (v/v)
methanol in 2.95 mL of DPPH solution for samples.
Standard curves for both assays were obtained by measuring
the ABTS+ and DPPH scavenging activities of 10, 30, 60 and 100 mg
vitamin C/L. The ABTS+ and the DPPH scavenging activities of food
extracts were expressed on the fresh weight basis as mg vitamin C
equivalent (VCE)/100 g. For beverages, antioxidant capacity was
expressed per 100 g based on the fresh weight of each beverage.
Each sample was measured in triplicate. Mean and standard
deviation (n = 3) were calculated.
2.6. Total phenolics and total flavonoids content
Total phenolics content of foods extracts and beverages was
measured by Folin–Ciocalteu’s phenol reagent (Kim et al., 2003;
Singleton and Rossi, 1965). First, 200 mL of appropriately diluted
sample or gallic acid standard were added to 2.6 mL of distilled
deionized water. Then, 200 mL of Folin–Ciocalteu’s phenol reagent
was added at time zero and mixed. After 6 min, 2 ml of 7% (w/v)
Na2CO3 solution was added and mixed. After incubation for 90 min
at room temperature, absorbance was measured at 750 nm versus a
prepared blank. The blank consisted of 200 mL 50% (v/v) methanol
instead of sample. Gallic acid in 50% (v/v) methanol solution in
concentrations of 10, 30, 60 and 100 mg/L was used as a standard
and a calibration curve was drawn for each day of analysis. The
content of total phenolics was expressed as mg gallic acid equivalent
(GAE)/100 g of fresh sample. All samples were analyzed in triplicate.
Total flavonoids content of food extracts and beverages was
determined using a spectrophotometric method (Floegel et al.,
2010). Briefly, 500 mL of sample or standard (catechin) were mixed
with 3.2 mL of distilled deionized water. At time zero, 150 mL of 5%
(w/v) sodium nitrite (NaNO2) solution were added and mixed.
After 5 min, 150 mL of 10% (w/v) aluminum chloride (AlCl3) was
added and mixed. After 6 min, 1 mL of 1 M sodium hydroxide
(NaOH) was added and mixed. Absorbance of the colored
flavonoid–aluminum complex was measured immediately at
510 nm versus a blank. The blank consisted of 500 mL of 50% (v/
v) methanol instead of sample. For standard catechin was
dissolved in 50% (v/v) methanol to concentrations of 10, 30, 60
and 100 mg/L. A calibration curve was drawn. Total flavonoid
content of the foods was expressed as mg catechin equivalent (CE)/
100 g fresh sample. All samples were analyzed in triplicate.
2.7. Statistical analysis
Data from the NHANES 1999–2000 and 2001–2002 and USDA
databases were analyzed using Statistical Analysis System (SAS)
software, release 8.1, 2000 (SAS Institute Inc., Cary, NC) and the
Survey Data Analysis (SUDAAN) for multi-stage sample designs
professional software package, release 8.0.2, 2003 (Research
Triangle Institute, Research Triangle Park, NC). Statistical Package
for the Social Sciences (SPSS) 17.0 software, release 2008 (SPSS Inc.,
Headquarters, Chicago, IL) was used for statistical comparison of
the two assays. Data was reported as mean, standard deviation and
coefficient of variation (CV). Food items were ranked according to
their antioxidant capacities, total phenolics and total flavonoids
concentrations. As the data was not normally distributed, but
right-skewed, Spearm
2. วัสดุและวิธีการ
2.1 รีเอเจนต์และมาตรฐาน
ABTS (+) - catechin, DPPH, Folin-Ciocalteu
ของสารฟีนอลและกรดฝรั่งเศสที่ซื้อมาจากSigma เคมี จำกัด (เซนต์หลุยส์, MO,
USA) วิตามินซีที่ได้รับจากฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ (แฟร์ลอว์,
นิวเจอร์ซีย์, สหรัฐอเมริกา) 2,2-Azobis (2 amidinopropane) dihydrochloride
ถูกซื้อมาจากสารเคมีWako อิงค์ (ริชมอนด์, VA, USA)
ทั้งหมดสารเคมีที่ใช้เป็นของเกรดวิเคราะห์
โซลูชั่นมาตรฐานที่ถูกปรุงด้วยน้ำกลั่นปราศจากไอออน.
2.2 การเลือกอาหารเพื่อให้ครอบคลุมความหลากหลายของอาหารที่อุดมไปด้วยสารต้านอนุมูลอิสระที่ได้รับการยอมรับอย่างกว้างขวางบริโภคในสหรัฐอเมริกาด้านบน100 อาหารในแง่ของ (1) สารต้านอนุมูลอิสระเนื้อหาและ(2) ปริมาณการบริโภคที่ถูกระบุ ดังนั้นสุขภาพแห่งชาติและการสำรวจตรวจสอบโภชนาการ (NHANES) 1999-2000 และ 2001-2002 ชุดข้อมูล (NCHS 2002, 2004) ได้รับการเชื่อมโยงกับflavonoid USDA, isoflavone และ proanthocyanidin ฐานข้อมูลและฐานข้อมูลของ USDA อ้างอิงมาตรฐาน(AgricResServ 2004 2005, 2007A, 2008) รวมของ 8809 บุคคลอายุ> 19 ปีที่ได้เสร็จสิ้นการตลอด 24 ชั่วโมงอาหารเรียกคืน(24 ชั่วโมง DR) และข้อมูลที่ให้สารต้านอนุมูลอิสระในการใช้อาหารเสริมที่ถูกรวมอยู่ในการศึกษาเบื้องต้นนี้(จุนet al., 2007) เนื้อหาสารต้านอนุมูลอิสระของอาหารแต่ละคูณด้วยจำนวนเงินเฉลี่ยของการบริโภคอาหารในสหรัฐอเมริกาประชากรและรายการอาหารที่ได้รับการจัดอันดับตามพวกเขามีส่วนร่วมในการบริโภคสารต้านอนุมูลอิสระในประชากรกลุ่มนี้. จาก 100 อันดับอาหาร 50 ผักผลไม้และเครื่องดื่มที่มีส่วนร่วมมากที่สุดในการบริโภคสารต้านอนุมูลอิสระในสหรัฐอเมริกาถูกระบุ สำหรับผักและผลไม้, อาหารดิบถูกรวมและอาหารที่เตรียมได้รับการยกเว้นเช่น'พริกนักโทษขลุกขลิกกับถั่ว' สี่ข้อยกเว้นของอาหารเหลวการประมวลผลถูกรวม: 'มะเขือเทศซอสมะเขือเทศ'; 'กระป๋องถั่ว Pinto'; 'กระป๋องถั่วแดง';. และแครนเบอร์รี่กระป๋อง 'เพราะพวกเขาสะดวกในการวิเคราะห์' มันฝรั่งทอดสีขาว 'และ' สีขาวมันฝรั่งทอดบ้านถูกก่อนหน้านี้ได้รับการยกเว้น แต่ส่วนผสมที่ใช้ร่วมกันของพวกเขา 'มันฝรั่งดิบ' ถูกรวมอยู่ในรายชื่อ ชาถูกแบ่งออกเป็นสามรายการในรอบสุดท้ายรายการ: 'ชาเขียว' ชาดำมีคาเฟอีน ',' ชาเขียวมีคาเฟอีนและ. ไม่มีคาเฟอีน ' เครื่องดื่มใด ๆ ที่อุดมไปด้วยวิตามินซีได้รับการยกเว้นยกเว้นน้ำองุ่นเพราะมันเป็นเพียงชนิดเดียวที่มีอยู่ในซูเปอร์มาร์เก็ต สำหรับน้ำผลไม้ทั้งหมด 'น้ำบริสุทธิ์' หรือ '100% จากสมาธิ' และ 'ไม่มีเยื่อกระดาษ' ได้รับเลือกสำหรับการวิเคราะห์. 2.3 การเก็บตัวอย่างและการเตรียมการทั้งหมดอาหารและเครื่องดื่มที่ซื้อมาใหม่ที่ซูเปอร์มาร์เก็ตในท้องถิ่นหรือร้านเหล้าในโทลและแมนส์ฟิลด์, CT และถูกเก็บไว้ในตู้เย็นจนสกัดถึงสามวัน สำหรับอาหารแต่ละรายการตัวอย่างที่มีความหลากหลายที่ได้รับรวมทั้งสามที่แตกต่างกันแบรนด์ต่ออาหารที่เป็นไปได้60% ของกลุ่มตัวอย่าง 40% ของกลุ่มตัวอย่างเพียงสองหรือหนึ่งในแบรนด์ที่มีอยู่ในซูเปอร์มาร์เก็ต อย่างน้อยสามชิ้นของแต่ละยี่ห้อที่ถูกเก็บรวบรวม ถ้าใช้ได้หนึ่งแบรนด์อินทรีย์ถูกรวมอยู่ในการวิเคราะห์ แอปเปิ้ลสำหรับตัวอย่างเช่น 2 กก. ของแต่ละแบรนด์ 'Gala วอชิงตัน', 'เอ็มไพร์นิวยอร์กและ' แมคอินทอช 'กำลังซื้อ ที่คล้ายกันสำหรับเครื่องดื่ม 3 แบรนด์และผู้ที่อย่างน้อย1 ลิตรต่อตราสินค้าเครื่องดื่มแต่ละถูกรวมเข้าไปในการวิเคราะห์. น้ำส้มตัวอย่างเช่น 2 ลิตรของแต่ละ 'ฟลอริด้าของธรรมชาติ', 'ทรอปิคาน่า' และ 'เพียงแค่สีส้ม' ที่ถูกเก็บรวบรวม ผักและผลไม้ที่ได้รับการล้างด้วยน้ำประปาแห้งและสับ แบรนด์ที่แตกต่างกันของหนึ่งในรายการที่ถูกผสมชั่งน้ำหนักและสกัด สำหรับเครื่องดื่มร้อน, ชา 2 กรัมหรือกาแฟถูกชงกับ 150 มิลลิลิตรน้ำประปาเดือด2 นาที แบรนด์ที่แตกต่างถูกผสมและวิเคราะห์หลังจากที่ระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้อง เครื่องดื่มเย็นผสมชั่งน้ำหนักและการวิเคราะห์ในทันที เครื่องดื่มจากผงถูกจัดทำขึ้นตามคำแนะนำบนแพคเกจและวิเคราะห์ทันที. 2.4 สกัดตัวอย่างตัวอย่างถูกสกัดด้วยเมทานอล (Kim et al., 2003). สั้น ๆ สับตัวอย่างสด (50 กรัม) ได้รับการผสมกับ 100 มลเมทานอลที่แน่นอนและผสมเป็นเวลา2 นาทีภายใต้ก๊าซไนโตรเจนใช้Waring ห้องปฏิบัติการปั่น LB10 (Waring ห้องปฏิบัติการ ทอร์, CT, USA) ส่วนผสมที่ถูกกรองแล้วผ่านเบอร์ # 2 กระดาษกรอง (เบอร์อินเตอร์เนชั่นแนล จำกัด เมดสโตนสหราชอาณาจักร) มีช่องทางBU แช่เย็น chner และล้างด้วยเมทานอลที่เพิ่มขึ้น สารสกัดจากครั้งแรกที่ได้มาเก็บไว้ใน 20 8C ช่องแช่แข็ง ตัวกรองของแข็งเค้กได้รับการแก้ไขใน 100 มิลลิลิตร 80% (v / v) เมทานอลผสมสำหรับ 2 นาทีและกรองอีกครั้ง (สารสกัดจากวินาที) สารสกัดทั้งสองมารวมกันและตัวทำละลายระเหยโดยใช้เครื่องระเหยแบบหมุนภายใต้ความกดดันที่ลดลงที่45 8C สารสกัดประมาณ 40 มิลลิลิตรละลายกับเพิ่มเติม50 มลเมทานอลแน่นอนและสร้างขึ้นจะมีปริมาณรวม100 มิลลิลิตรด้วยน้ำกลั่นปราศจากไอออน สำหรับแต่ละรายการอาหารที่สกัดได้ทำในเพิ่มขึ้นสามเท่า สารสกัดถูกเก็บไว้ที่? 20 8C จนวิเคราะห์ถึงสามวัน. 2.5 การวัดความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระที่แสดงเป็นวิตามินซีเทียบเท่าการวิเคราะห์ความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระได้ดำเนินการทันทีสำหรับเครื่องดื่มหรือภายใน1-3 วันสารสกัดจากอาหาร ทั้งABTS DPPH และการวิเคราะห์ตัวอย่างที่ถูกปรับลดให้เหมาะสมกับ50% (v / v) เมทานอล วิตามินซีที่ใช้เป็นสารต้านอนุมูลอิสระมาตรฐาน. การวิเคราะห์ ABTS ก็ขึ้นอยู่กับวิธีการที่ถ้ำรถตู้ Berg et al. (1999) การแก้ไขเล็กน้อยโดยคิม et al, (2003) สั้น ๆ , 2.5 มิลลิของABTS ผสมกับ 1 มิลลิของ 2,2-azobis (2 amidinopropane) dihydrochloride ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 10 มิลลิน้ำเกลือ (PBS) วิธีการแก้ปัญหาค่าpH 7.4 ส่วนผสมที่ถูกความร้อนในอ่างน้ำที่ 68 8C สำหรับ 40 นาที. ABTS สีเขียว + แก้ปัญหาที่ได้รับการระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้อง, กรองผ่านตัวกรองไนลอนเข็มฉีดยาและเจือจางด้วยพีบีเอสสดบัฟเฟอร์จนกว่าการดูดกลืนแสงของ 0.650? 0.020 ที่ 734 นาโนเมตร จากนั้น 20 มลของวิตามินซีมาตรฐานหรือตัวอย่างได้รับการผสมกับ980 มิลลิลิตร ABTS + แก้ปัญหาและบ่มเป็นเวลา 10 นาทีใน 37 8C อ่างน้ำ การลดลงของการดูดกลืนแสงที่ได้รับการตรวจสอบ 734 นาโนเมตรหลังจาก 10 นาที การควบคุมประกอบด้วยทั้ง 20 มลน้ำกลั่นปราศจากไอออนกรดใน 980 มิลลิลิตรรุนแรงวิธีแก้ปัญหาสำหรับมาตรฐานวิตามินซีหรือ50% (v / v) ในเมทานอล 980 มิลลิลิตรวิธีการแก้ปัญหาที่รุนแรงสำหรับตัวอย่าง ค่าสัมประสิทธิ์ของความแปรปรวน (CV) สำหรับ ABTS ทดสอบพบว่าเป็น 4.72% ภายในวัน (n = 10). การวิเคราะห์ DPPH ได้ดำเนินการตามวิธีการที่พัฒนาโดยแบรนด์วิลเลียมส์และอัล (1995) แก้ไขเล็กน้อยโดยคิมet al, (2002) การแก้ปัญหาของ 1 มิลลิ DPPH หรือไม่? ใน 80% (v / v) เมทานอลถูกกวนเป็นเวลา40 นาที การดูดกลืนแสงของการแก้ปัญหาที่ถูกปรับเปลี่ยนเพื่อ0.650? 0.020 ที่ 517 นาโนเมตรโดยใช้สด 80% (v / v) เมทานอล จากนั้น 50 มลมาตรฐานหรือตัวอย่างได้รับการผสมกับ2.95 มิลลิลิตร DPPH? วิธีการแก้ปัญหาและการบ่มเป็นเวลา 30 นาทีในที่มืดที่ปกคลุมไปด้วยอลูมิเนียม. ลดการดูดกลืนแสงที่ได้รับการตรวจสอบ 517 นาโนเมตรใน 30 นาที ควบคุมประกอบด้วยทั้ง 50 มลน้ำกลั่นปราศจากไอออนกรดใน 2.95 มิลลิลิตร DPPH? วิธีแก้ปัญหาสำหรับมาตรฐานวิตามิน C หรือ 50 มล 50% (v / v) เมทานอลใน 2.95 มิลลิลิตร DPPH? วิธีแก้ปัญหาสำหรับตัวอย่าง. โค้งมาตรฐานสำหรับการตรวจทั้งสองที่ได้รับโดยการวัดABTS หรือไม่ + และ DPPH? กิจกรรมไล่ 10, 30, 60 และ 100 มก. วิตามินซี / L ABTS + และ DPPH หรือไม่ กิจกรรมการขับของอาหารสารสกัดถูกแสดงบนพื้นฐานน้ำหนักสดเป็นมิลลิกรัมวิตามินซีเทียบเท่า(VCE) / 100 กรัม สำหรับเครื่องดื่มสารต้านอนุมูลอิสระได้แสดงต่อ 100 กรัมขึ้นอยู่กับน้ำหนักสดของเครื่องดื่มแต่ละ. ตัวอย่างแต่ละวัดในเพิ่มขึ้นสามเท่า หมายถึงมาตรฐานและค่าเบี่ยงเบน (n = 3) จะถูกคำนวณ. 2.6 ฟีนอลรวมและ flavonoids รวมเนื้อหาเนื้อหาทั้งหมดฟีนอลสารสกัดจากอาหารและเครื่องดื่มได้รับการวัดจากสารฟีนอลFolin-Ciocalteu ของ (คิม et al, 2003;. ซิงเกิลและรอสซี 1965) ครั้งแรก 200 มิลลิลิตรเจือจางเหมาะสมตัวอย่างหรือมาตรฐานกรดฝรั่งเศสถูกเพิ่มเข้าไปใน2.6 มิลลิลิตรกลั่นน้ำปราศจากไอออน จากนั้น 200 มลสารฟีนอล Folin-Ciocalteu ของถูกเพิ่มเข้ามาในเวลาที่ศูนย์และผสม หลังจากนั้น 6 นาที, 2 มิลลิลิตร 7% (w / v) การแก้ปัญหา Na2CO3 ถูกบันทึกและผสม หลังจากการบ่มเป็นเวลา 90 นาทีที่อุณหภูมิห้องวัดการดูดกลืนแสงที่750 นาโนเมตรเมื่อเทียบกับเตรียมที่ว่างเปล่า ประกอบด้วยว่างเปล่า 200 มิลลิลิตร 50% (v / v) เมทานอลแทนของกลุ่มตัวอย่าง กรดในฝรั่งเศส 50% (v / v) การแก้ปัญหาเมทานอลในความเข้มข้น10, 30, 60 และ 100 มิลลิกรัม / ลิตรถูกนำมาใช้เป็นมาตรฐานและเส้นโค้งการสอบเทียบถูกดึงออกมาในแต่ละวันของการวิเคราะห์ เนื้อหาจากทั้งหมดฟีนอลได้รับการแสดงเป็นมิลลิกรัมเทียบเท่ากรดฝรั่งเศส(GAE) / 100 กรัมของตัวอย่างสด ตัวอย่างทั้งหมดได้รับการวิเคราะห์ในเพิ่มขึ้นสามเท่า. flavonoids รวมเนื้อหาของสารสกัดจากอาหารและเครื่องดื่มได้รับการพิจารณาโดยใช้วิธีสเปก(Floegel et al., 2010) สั้น ๆ , 500 มิลลิลิตรตัวอย่างหรือมาตรฐาน (catechin) ผสมกับ3.2 มิลลิลิตรน้ำกลั่นปราศจากไอออน ในขณะที่ศูนย์ 150 มิลลิลิตร 5% (w / v) โซเดียมไนไตรท์ (NaNO2) วิธีการแก้ปัญหาที่ถูกเพิ่มผสม. หลังจาก 5 นาที, 150 มิลลิลิตร 10% (w / v) อลูมิเนียมคลอไรด์ (AlCl3) ได้รับการเพิ่มและผสม หลังจากนั้น 6 นาที, 1 มิลลิลิตร 1 M โซดาไฟ(NaOH) ถูกบันทึกและผสม การดูดกลืนแสงของสีที่ซับซ้อน flavonoid อลูมิเนียมวัดได้ทันทีที่ 510 นาโนเมตรเมื่อเทียบกับที่ว่างเปล่า ว่างประกอบด้วย 500 มิลลิลิตร 50% (v / V) เมทานอลแทนของกลุ่มตัวอย่าง สำหรับ catechin มาตรฐานถูกกลืนหายไปใน50% (v / v) เมทานอลความเข้มข้น 10, 30, 60 และ 100 มิลลิกรัม / ลิตร เส้นโค้งการสอบเทียบที่ถูกดึงออกมา flavonoid รวมเนื้อหาของอาหารที่ได้รับการแสดงเป็นมิลลิกรัมเทียบเท่าcatechin (CE) / 100 กรัมตัวอย่างสด ตัวอย่างทั้งหมดได้รับการวิเคราะห์ในเพิ่มขึ้นสามเท่า. 2.7 การวิเคราะห์ทางสถิติข้อมูลจาก NHANES 1999-2000 และ 2001-2002 และ USDA ฐานข้อมูลที่ได้มาวิเคราะห์โดยใช้สถิติการวิเคราะห์ระบบ (SAS) ซอฟแวร์ปล่อย 8.1 2000 (SAS Institute อิงค์แครี, NC) และการวิเคราะห์ข้อมูลการสำรวจ(SUDAAN) สำหรับ ตัวอย่างแบบหลายขั้นตอนการออกแบบแพคเกจซอฟต์แวร์มืออาชีพปล่อย8.0.2, 2003 (การวิจัยสามเหลี่ยมสถาบันResearch Triangle Park, NC) แพคเกจทางสถิติสำหรับสังคมศาสตร์ (SPSS) 17.0 ซอฟแวร์รุ่น 2008 (SPSS อิงค์สำนักงานใหญ่, Chicago, IL) ถูกนำมาใช้สำหรับการเปรียบเทียบทางสถิติของทั้งสองชุดตรวจ ข้อมูลที่ถูกรายงานว่าค่าเฉลี่ยส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานและค่าสัมประสิทธิ์ของความแปรปรวน (CV) รายการอาหารที่ได้รับการจัดอันดับตามขีดความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระของพวกเขาฟีนอลรวมและ flavonoids รวมความเข้มข้น เป็นข้อมูลที่ไม่ได้รับการกระจายตามปกติ แต่ขวาเบ้Spearm
การแปล กรุณารอสักครู่..
