These assays use two sequence-speci

These assays use two sequence-specific oligonucleotide probes in addition to two sequence-specific DNA primers. The two probes are designed to bind to adjacent sequences in the target (Figure 4). The probes are labeled with a pair of dyes that exhibit fluorescence resonance energy transfer (FRET). The donor dye is attached to the 3' end of the first probe, while the acceptor dye is attached to the 5' end of the second probe.

During real-time PCR, excitation is performed at a wavelength specific to the donor dye, and the reaction is monitored at the emission wavelength of the acceptor dye. At the annealing step, the probes hybridize to their target sequences in a head-to-tail arrangement. This annealing brings the donor and acceptor dyes into proximity, allowing FRET to occur, resulting in fluorescent emission by the acceptor. The increasing amount of acceptor fluorescence is proportional to the amount of PCR product present.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Assays เหล่านี้ใช้คลิปปากตะเข้ oligonucleotide เฉพาะลำดับที่สองนอกจากสองลำดับเฉพาะดีเอ็นเอไพรเมอร์ คลิปปากตะเข้สองถูกออกแบบให้ผูกกับลำดับติดกันในเป้าหมาย (รูปที่ 4) คลิปปากตะเข้มีป้ายกับคู่ของสีที่แสดงการโอนย้ายพลังงานการสั่นพ้องของ fluorescence (ไม่สบายใจ) ย้อมผู้บริจาคมีแนบท้าย 3 ของโพรบแรก ในขณะย้อม acceptor กับปลาย 5' ของโพรบที่สองระหว่าง PCR แบบเรียลไทม์ ดำเนินการในการกระตุ้นที่ความยาวคลื่นเฉพาะย้อมผู้บริจาค และมีการตรวจสอบปฏิกิริยาที่ความยาวคลื่นปล่อยก๊าซของย้อม acceptor ในขั้นตอนการหลอม คลิปปากตะเข้คือการลำดับของเป้าหมายในการจัดเรียงหัวหาง นี้การอบเหนียวนำสีผู้บริจาคและ acceptor ในความใกล้ชิด ทำให้ไม่สบายใจเกิดขึ้น ผล โดย acceptor การปล่อยก๊าซเรืองแสง จำนวน acceptor fluorescence เพิ่มขึ้นเป็นสัดส่วนกับจำนวนผลิตภัณฑ์ PCR อยู่

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การตรวจเหล่านี้ใช้สองลำดับเฉพาะ probes oligonucleotide นอกเหนือไปจากสองลำดับเฉพาะไพรดีเอ็นเอ โพรบทั้งสองได้รับการออกแบบที่จะผูกกับลำดับที่ติดกันในเป้าหมาย (รูปที่ 4) ยานสำรวจที่ถูกกำกับด้วยคู่ของสีย้อมที่แสดงการเรืองแสงการถ่ายโอนพลังงานเสียง (ฉลุ) สีย้อมผู้บริจาคที่แนบมากับ 3 'ในตอนท้ายของการสอบสวนครั้งแรกในขณะที่สีย้อมใบเสร็จที่แนบมากับ 5' ในตอนท้ายของการสอบสวนที่สองในระหว่าง Real-time PCR, กระตุ้นจะดำเนินการที่ความยาวคลื่นเฉพาะสีย้อมผู้บริจาคและ ปฏิกิริยาที่มีการตรวจสอบการปล่อยความยาวคลื่นสีย้อมใบเสร็จ ในขั้นตอนการหลอม, ฟิวส์ผสมพันธุ์กับลำดับเป้าหมายของพวกเขาในการจัดหัวหาง การหลอมวิธีนี้จะทำให้ผู้บริจาคและใบเสร็จสีลงไปในบริเวณใกล้เคียงให้ฉลุที่จะเกิดขึ้นส่งผลให้การปล่อยเรืองแสงโดยใบเสร็จ จำนวนที่เพิ่มขึ้นของตัวรับแสงเป็นสัดส่วนกับปริมาณของปัจจุบันผลิตภัณฑ์ PCR

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีเหล่านี้ใช้สองลำดับเฉพาะ ซึ่งวิธีการนอกจากสองลำดับเฉพาะดีเอ็นเอไพรเมอร์ . ทั้งสองจึงถูกออกแบบมาเพื่อให้ติดลำดับในเป้าหมาย ( รูปที่ 4 ) ฟิวส์มีป้ายชื่อด้วยคู่สี ที่แสดงการถ่ายโอนพลังงานเรโซแนนซ์ ( หงุดหงิด ) ผู้บริจาคย้อมติด 3 จบชิมลางก่อนในขณะที่พระนาสิก ย้อมติด 5 จบด้วยสอง

ระหว่าง PCR แบบเรียลไทม์ และจะดำเนินการที่ความยาวคลื่นเฉพาะผู้บริจาคย้อมและปฏิกิริยาคือการตรวจสอบที่เพิ่มความยาวคลื่นของพระนาสิกย้อม เผาที่ก้าว ฟิวส์ที่ผสมกับยีนเป้าหมายของพวกเขาในการจัดเรียงหัวหางนี้อ่อนทำให้ผู้บริจาคและพระนาสิกสีในความใกล้ชิด ให้หงุดหงิดเกิดขึ้น เป็นผลในการเรืองแสงโดยพระนาสิก . ปริมาณที่เพิ่มขึ้นของพระนาสิก การเป็นสัดส่วนกับปริมาณดีเอ็นเอผลิตภัณฑ์ปัจจุบัน